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色譜柱常見問題（七）
2020年07月20日 08:46:43
來源：化工儀器網(wǎng) 點(diǎn)擊量：8547
會使用色譜儀，不代表對了解色譜儀，尤其是色譜儀的各種配件。色譜柱作為色譜系統(tǒng)的心臟，越了解它，就能更好的掌握色譜儀。
【化工儀器網(wǎng) 技術(shù)指導(dǎo)】會使用色譜儀，不代表對了解色譜儀，尤其是色譜儀的各種配件。色譜柱作為色譜系統(tǒng)的心臟，越了解它，就能更好的掌握色譜儀。
1、柱子才用了四個月出現(xiàn)峰形拖尾現(xiàn)象，是什么原因？
用了四個月峰形拖尾是很正常的，需要維護(hù)清洗一下色譜柱，清除引起拖尾的柱頭污染。如果柱頭塌陷，可以從其它廢柱子里取點(diǎn)填料填補(bǔ)塌陷，但效果不一定好。
2、流動相里有酸，單純用乙腈沖洗能把酸沖洗干凈嗎？
流動相里有酸，應(yīng)該先用純水或80：20的水/乙腈溶劑沖洗。如果一直在酸性環(huán)境，固定相容易流失，造成保留時間前移和其它色譜性能下降。
3、C18和RP18有什么區(qū)別，在檢測三聚氰胺時為什么結(jié)果響應(yīng)值不同？
RP18就是C18。不過C18柱之間也有區(qū)別，測定三聚氰胺一般要用極性比較大的水性C18柱。
4、磺化交聯(lián)的苯乙烯-二乙烯基共聚物為填充劑的色譜柱沒有儲存冰箱中，發(fā)霉后可以將此色譜柱修復(fù)好嗎？
聚合物柱子因?yàn)椴慌滤釅A，就直接用強(qiáng)酸強(qiáng)堿清洗。如果是H型，用1M硫酸沖洗；如果是Ca型，可以先用1M硫酸沖洗，再用EDTA鈣鹽轉(zhuǎn)換回Ca型柱；如果是中性的聚合物反相柱，直接用1M的NaOH沖洗。
5、柱子的柱效影響大嗎？一般柱子的柱效規(guī)定是多少？
柱效是柱子性能好壞的一個重要體現(xiàn)指標(biāo)。柱效會影響分離度，當(dāng)然是峰形越尖銳，柱效越高，和其它峰越容易分開。另外柱效高峰形尖銳，對峰面積的積分誤差就小，甚至可以用峰高來定量。一般C18柱，在測定甲苯等不易拖尾的小分子中性不電離物質(zhì)時，5um的填料，每米的柱效能達(dá)到80000以上的塔板數(shù)，就算合格。在實(shí)際分析物的測定時，一般藥典有規(guī)定低柱效是2000-3000，新柱子的柱效都高于這個數(shù)。
6、流動相中加入四氫呋喃對柱子有損害嗎?
四氫呋喃(THF)是反相色譜中洗脫能力極強(qiáng)的溶劑。在流動相中加入THF能改善某些難分離的物質(zhì)對的分離度，但THF不穩(wěn)定，容易降解生成具有很強(qiáng)反應(yīng)活性的過氧化物，能與分析物反應(yīng)生成新化合物，導(dǎo)致拖尾、峰分裂和鬼峰產(chǎn)生。
THF對柱子有損傷這點(diǎn)是無疑的，但這種損傷是隨時間累積的。THF放得越久，產(chǎn)生的過氧化物含量越大，因此應(yīng)該避免使用生產(chǎn)很久的THF溶劑，而且好將THF冷藏、干燥和避光保存，使用前檢測一下過氧化物的含量。
7、哪些原因會造成色譜峰變寬、峰高變低？
如果其它色譜條件沒有改變，柱效下降是導(dǎo)致峰變寬的主要原因。對于易電離的極性物質(zhì)，如果流動相pH選擇不合適，分析物既有中性分子態(tài)存在，又有離子態(tài)存在，峰也會變寬變矮。色譜柱使用后柱效逐步下降是正常現(xiàn)象，如突然降低則屬異常，多半是因?yàn)槭褂貌划?dāng)，造成填料特性或柱床結(jié)構(gòu)改變所致。
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