隋志偉：基于免疫熒光流式技術(shù)的微生物快速檢測方法
【化工儀器網(wǎng) 會議新聞】作為最常見的食品安全問題，微生物污染已經(jīng)成為食品檢測的重點(diǎn)關(guān)注對象。雖然目前已經(jīng)有較多的微生物檢測技術(shù)，如發(fā)酵法、平皿培養(yǎng)法等，相關(guān)的技術(shù)、步驟等也在不斷優(yōu)化發(fā)展，但是常規(guī)的檢測方法仍然屬于傳統(tǒng)培養(yǎng)法，需要經(jīng)過培養(yǎng)富集、菌落計(jì)數(shù)或代謝物檢測以及人工判讀等步驟，不僅繁瑣耗時，精度也無法完全滿足現(xiàn)在的需求。因此我國已經(jīng)開始開發(fā)非培養(yǎng)、速度快、高靈敏的活微生物測量方法。
在第十四屆中國國際食品安全技術(shù)論壇CBIFS2021上，眾多食品安全領(lǐng)域的專家學(xué)者與技術(shù)人員匯聚一堂，分享和交流先進(jìn)的技術(shù)成果，其中也有許多新的微生物檢測方法涌現(xiàn)。如中國計(jì)量科學(xué)研究院副研究員隋志偉在微生物檢驗(yàn)及環(huán)境微生物監(jiān)測專題論壇上就帶來了利用流式細(xì)胞技術(shù)檢測微生物的報告《基于免疫熒光標(biāo)記與流式分析的微生物快速檢測方法研究》。
流式細(xì)胞術(shù)作為先進(jìn)的細(xì)胞定量技術(shù)，可以對處在快速直線流動狀態(tài)中的單個細(xì)胞或生物顆粒進(jìn)行多參數(shù)的連續(xù)快速檢測。除了快速和多參數(shù)檢測之外，流式細(xì)胞術(shù)還有樣本制備簡單、可以把指定特征的細(xì)胞分離出來等優(yōu)勢，已經(jīng)成為微生物測量溯源體系的參考測量程序。中國計(jì)量科學(xué)研究院對流式細(xì)胞術(shù)在微生物測量中的應(yīng)用就進(jìn)行了深入的研究。
在報告中，隋志偉研究院以乳品中痕量金黃色葡萄球菌快速靈敏檢測和乳品中單個沙門氏菌快速靈敏檢測為例，詳細(xì)介紹了流式細(xì)胞分析技術(shù)檢測微生物的原理方法。
在乳品中痕量金黃色葡萄球菌快速靈敏檢測中，中國計(jì)量科學(xué)研究院結(jié)合免疫熒光標(biāo)記與流式分析技術(shù)，建立了微生物活性表征與快速精確測量方法，其技術(shù)路線包括：為金黃色葡萄球菌添加特異性熒光標(biāo)記，進(jìn)行流式分析儀測量參數(shù)優(yōu)化(包括上樣體積、液流速度、分析時間等)，進(jìn)行最佳測量范圍和檢測限的評估，然后進(jìn)行不確定度評定，最后實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)測量。對于奶粉中沙門氏菌的檢測，中國計(jì)量科學(xué)研究院同樣建立了流式分析法。利用流式細(xì)胞術(shù)檢測的優(yōu)勢主要有：速度快；靈敏度高，可實(shí)現(xiàn)單個致病菌檢測；區(qū)分死菌與活菌；不確定度小。
在報告的最后一部分，隋志偉還介紹了食品中微生物國家有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)及其應(yīng)用。我國已經(jīng)成功研制具有溯源性微生物國家一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，可以實(shí)現(xiàn)微生物在不同時間和空間的量值復(fù)現(xiàn)。食品微生物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在能力驗(yàn)證和質(zhì)量控制中都能夠發(fā)揮重要作用，對于我國食品微生物檢測行業(yè)的發(fā)展有著很大的意義。
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