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小鼠雜交瘤細胞;1H6培養(yǎng)*

2025-04-04

產(chǎn)      地:
進口/國產(chǎn)
所在地區(qū):
上海上海市
有效期還剩 181舉報該信息

細胞名稱  小鼠雜交瘤細胞;1H6培養(yǎng)
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣

品牌 半貼壁生長

特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS

傳代方法 1:

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況 C25

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 

支原體檢測 陰性 

STR

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類

小鼠雜交瘤細胞;1H6培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
小鼠雜交瘤細胞;1H6培養(yǎng)操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-Inhibin Alpha/FITC 熒光素標記抑制素α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Anti-ROCK2/FITC 熒光素標記Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh ANKS3 錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 規(guī)格 0.2ml

Rabbit Anti-mouse IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗小鼠IgG 0.1ml

GPR92 英文名稱: G蛋白偶聯(lián)受體GPR92蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗人IgG 規(guī)格 0.1ml

Anti-ROCK2/FITC 熒光素標記Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Matriptase 蛋白裂解酶(一種新的癌基因)抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Anti-AMPK alpha 2 腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-B-Raf (Thr401) 磷酸化B-Raf抗體 規(guī)格 0.1ml

檸檬酸鹽溶液-即枸櫞酸鹽 2L/袋 10mM pH 6.0,低背景著色

VGAT 英文名稱: 基丁酸轉(zhuǎn)運蛋白VGAT抗體 0.1ml

DDIT4L 英文名稱: DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄樣蛋白4抗體 0.2ml

Anti-AMPK alpha 2 腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgM/FITC FITC標記的兔抗大鼠IgM 0.3ml

GDNF 英文名稱: 膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh APOA1 載脂蛋白A1抗體 規(guī)格 0.1ml

Anti-IL-10R Beta/IL10RB/CDw210b/FITC 熒光素標記白細胞介素-10受體β抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human sIgA/PE PE標記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格 0.1ml

Anti-PSP/FITC 熒光素標記抗PSP抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
小鼠雜交瘤細胞;1H6培養(yǎng)midnolin isoform Protein 1 中腦核仁蛋白1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Anti-CD33L/OBBP1 CD33L抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh PACRG 麻瘋病和帕金森氏病共同調(diào)節(jié)蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

DKK3 Kit Mouse 小鼠 DKK3 ELISA配對抗體 ELISA

TBR2 英文名稱: 脫中胚蛋白抗體 0.1ml

C21ORF56 英文名稱: 21號染色體開放閱讀框56抗體 0.2ml

Anti-CD33L/OBBP1 CD33L抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
小鼠雜交瘤細胞;1H6培養(yǎng)懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。


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