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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標(biāo)物>生化試劑>其它生化試劑> 纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)檢測試劑盒

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纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)檢測試劑盒

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優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司是一家專業(yè)經(jīng)營生化試劑、實驗室耗材的公司, 包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、科研診斷等多個研究及應(yīng)用領(lǐng)域。系集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售為一體的技術(shù)企業(yè)。公司擁有:分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、化學(xué)等方面的多名專業(yè)技術(shù)人員。是數(shù)家國外生命科學(xué)類公司在中國的總進口商及總經(jīng)銷商。另一方面也非常重視自主產(chǎn)品研究和開發(fā),推出了一系列具有競爭力的產(chǎn)品和服務(wù)。同時國家對于生物行業(yè)的發(fā)展給予了的重視,更多地側(cè)重于科研的投入。

公司客戶遍布大學(xué)、研究所、生物技術(shù)公司等科研單位。立足于生命科學(xué)領(lǐng)域,全力打造高品質(zhì)生物科技產(chǎn)品鏈和技術(shù)服務(wù)鏈,也具備豐富的管理經(jīng)驗,同時我們建立了集技術(shù)支持、售后服務(wù)等多方位的服務(wù)體系。我們有激情、有理想,更有責(zé)任感,是您科研道路上值得信賴的伙伴。

我公司將始終堅持信譽立業(yè)、以人為本、質(zhì)量為先、誠信服務(wù)的宗旨,不斷拼搏,開拓進取,與各界朋友攜手共創(chuàng)美好未來。






ELISA試劑盒,PCR試劑盒,細(xì)胞,抗體,菌種,生化試劑,標(biāo)準(zhǔn)品,質(zhì)粒,培養(yǎng)基

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 96T/48T
貨號 YLK-2048E 主要用途 科研實驗
英文名稱 Mouse plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1 ELIS 樣本 血清、血漿及相關(guān)液體樣本
適應(yīng)物種 人、大鼠、小鼠、植物、動物等 檢測方法 雙抗體夾心法
保存條件 2-8℃ 保質(zhì)期 6個月
纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)檢測試劑盒
                                                             (ELISA) 使用說明書


? 纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)檢測試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)的含量。
? 有效期:6個月
? 保存條件:2-8℃
? 本試劑盒僅供科研使用,不得用于臨床診斷


實驗原理實驗

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并che底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。


試劑盒組成


需要而未提供的試劑和器材
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱

4. 蒸餾水或去離子水


樣品收集、處理及保存方法
1)血清 操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后1000×g 離心 10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2)血漿 EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g 離心 30 分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液 1000×g 離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿 將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g 離心 10 分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在 37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
注:標(biāo)本溶血會影響最后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進行此項檢測。


備注:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:80、40、20、10、5、2.5 U/L
2. 經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗,標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過最大標(biāo)準(zhǔn)品濃度時,可用樣本/稀釋液將標(biāo)本進行適當(dāng)稀釋后再進行實驗。


試劑準(zhǔn)備
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。


操作步驟
1. 從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回 4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品 50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本 50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置 1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板 5 次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
7. 每孔加入終止液 50μL,15min 內(nèi),在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。


實驗結(jié)果計算
以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。


試劑盒性能
1. 檢測范圍:2.5 U/L – 80 U/L。
2. 靈敏度:Z低檢測濃度小于 0.1 U/L。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4. 重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于 10% ,板間變異系數(shù)小于 15% 。


注意事項
1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫 20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響 OD 值。
4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
9. 不能使用過期產(chǎn)品。
10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。


說明
由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析,本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險。
1. 最終的實驗結(jié)果與試劑的有效性、實驗者的相關(guān)操作以及當(dāng)時的實驗環(huán)境密切相關(guān),請務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。
2. 不同批次的同一產(chǎn)品可能會有少許差別,如:檢測限、靈敏度以及顯色時間等,請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進行實驗操作,網(wǎng)站電子版說明書僅作參考。
3. 只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到最佳的檢測結(jié)果。
4. 本公司只對試劑盒本身負(fù)責(zé),不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé),請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預(yù)留充足的樣本。
5. 使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA 實驗結(jié)果偏差。
6. 若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。
7. 某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。


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