效價耗材抗生素實(shí)驗(yàn)牛津杯小鋼管

     本公司生產(chǎn)效價耗材抗生素實(shí)驗(yàn)牛津杯小鋼管適用于抗生素原料藥、制劑的生物效價測定。符合《中華人民共和國藥典》、《中華人民共和國獸藥典》、《國家*標(biāo)準(zhǔn)》、《*標(biāo)準(zhǔn)》、《獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》、《進(jìn)口獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》所規(guī)定。

    抗生素管碟檢定法是利用抗生素在攤布特定試驗(yàn)菌的固體培養(yǎng)基內(nèi)呈球面形擴(kuò)散，形成含一定濃度抗生素球形區(qū)，抑制了試驗(yàn)菌的繁殖而呈現(xiàn)出透明的抑菌圈。此法系根據(jù)抗生素在一定濃度范圍內(nèi)，對數(shù)劑量與抑菌圈直徑（面積）呈線性關(guān)系，通過比較標(biāo)準(zhǔn)品與供試品產(chǎn)生抑菌圈的大小，計算出供試品的效價。

    ， 內(nèi)徑6.0±0.1mm，外徑7.8±0.1mm，高10.0±0.1mm，每盒100支小鋼管重量差異不超過±0.01g，內(nèi)外壁及兩端面光潔平坦，管壁厚薄*。配合牛津杯鋼管自動放置器使用，可以有效降低誤差。

雙碟的制備

1  倒底層培養(yǎng)基

    將培養(yǎng)基于水浴或微波爐中加熱融化，冷卻至60～70℃。將雙碟按編號平擺在水平操作臺上，用滅菌大口吸管吸取培養(yǎng)基20ml于雙碟內(nèi)，使其在碟底均勻分布，等凝固后更換干燥的陶瓦蓋。同時用紫外光燈消毒潔凈室。

2  加菌層培養(yǎng)基

    將已經(jīng)加熱融化的菌層培養(yǎng)基冷卻至48～50℃(芽孢可至60℃)，以無菌操作加入適量試驗(yàn)菌懸液，搖勻，用滅菌刻度吸管吸取菌層培養(yǎng)基5ml，使均勻攤布在底層培養(yǎng)基上，置水平操作臺上，用陶瓦蓋覆蓋，放置20～30分鐘，待凝固，備用。加菌液量，事*行預(yù)測，二劑量法高濃度抑菌圈直徑應(yīng)控制在18～22mm之間，三劑量法中心濃度的抑菌圈直徑應(yīng)控制在15～18mm之間。

滴定和培養(yǎng)

1  每批樣品用九只雙碟，用鋼管放置器，二劑量法每碟安置四個小鋼管，三劑量法每碟安置六個小鋼管

2  滴加標(biāo)準(zhǔn)品與供試品溶液，因?qū)嶒?yàn)設(shè)計不同而異。二劑量法，每碟中對角的兩個小鋼管分別滴加高、低濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，其余兩個小鋼管分別滴加相應(yīng)的高、低兩種濃度的樣品溶液。三劑量法的6個鋼管中間隔3個鋼管中分別滴加標(biāo)準(zhǔn)品及供試品高（H）、中（M）、低（L）3種濃度的溶液，并使相同濃度成對角。滴加量以與小鋼管口齊平為宜，各鋼管加入量應(yīng)盡量*。滴加溶液的順序，二劑量法應(yīng)按照S_H→T_H→S_L→T_L的順序滴加；三劑量法應(yīng)按照S_H→T_H→S_M→T_M→S_L→T_L的順序滴加。 滴加溶液的時間不可過長，一般二劑量法，九只雙碟應(yīng)在3分鐘之內(nèi)滴加完畢。

3  滴碟完畢，將雙碟以水平方向搬至托盤上，并用陶瓦圓蓋蓋好，平穩(wěn)地移入恒溫室或恒溫箱,在規(guī)定溫度下培養(yǎng)至所需時間。

結(jié)果計算

    將培養(yǎng)好的雙碟取出，倒出小鋼管，測量前，應(yīng)檢查各抑菌圈是否圓整，如發(fā)現(xiàn)破圈或不圓整應(yīng)棄之。由儀器測量各抑菌圈的直徑或面積，并按生物檢定統(tǒng)計法進(jìn)行可靠性測驗(yàn)、效價計算及可信限計算。對于同一批樣品多次測定結(jié)果應(yīng)進(jìn)行合并計算，參加合并計算的每組數(shù)據(jù)中各技術(shù)參數(shù)均應(yīng)符合要求，合并計算結(jié)果應(yīng)均一，參加合并計算的初試與復(fù)試組數(shù)應(yīng)接近。

特別要注意：

     不同次購買的鋼管必須同時進(jìn)行重量挑選，即每套鋼管重量差異不超過±0.05g。挑選時可將新舊批次的鋼管分別混合均勻，并分別隨機(jī)取出40個稱定，求出新舊鋼管的平均重量，若新舊鋼管混合后的平均重量接近（相差≤5mg）求出新舊鋼管混合后的平均重量m，按照此重量對新舊鋼管進(jìn)行重量挑選，新舊鋼管混合使用。若新舊鋼管平均重量之差超過5mg，按照新鋼管平均重量對新鋼管進(jìn)行重量挑選，新舊鋼管分開使用。