實(shí)驗(yàn)方法步驟：

特點(diǎn)：

1. 即開(kāi)即用，用戶(hù)只需要提供病毒樣品。

2. 根據(jù)保守序列設(shè)計(jì)的專(zhuān)一性引物，與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。

3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。

4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè)，避免后續(xù)污染。

5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。

6. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

儲(chǔ)存條件：-20℃以下，有效期12個(gè)月。

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱(chēng)：溫和氣單胞菌核酸檢測(cè)試劑盒48T

貨號(hào):YS-01P6483

產(chǎn)品規(guī)格：48T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

運(yùn)輸：低溫

注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：

1.    特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。

2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。

3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。

4.   檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。

5. 序列資源豐富，除公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

6.   該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1（10pM）               2μl

引物2（10PM）              2μl

Taq酶（2U/μl）            1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至               50 μl

視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

三、注意事項(xiàng)

１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)專(zhuān)用的PCR實(shí)驗(yàn)室。

２．純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。

３．所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。

４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。

５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿(mǎn)意，然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。

６．試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。

７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi)，并且要充分混勻。

對(duì)壬基酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品，異構(gòu)體混合物乙(95%) CP,95.0%人腎上腺髓質(zhì)(ADM)免疫試劑盒

對(duì)壬基酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品,純品乙(95%)  for HPLC人腎上腺能a1A受體(ADRA1A)免疫試劑盒

正 AR,97%乙(95%) GR,95.0%        人腎上腺(EPI)免疫試劑盒

正 CP,95%乙(95%)  ACS人腎上腺皮質(zhì)抗體(ACA)免疫試劑盒

正 Standard for GC，>99%(GC)95%藥用酒精 藥用級(jí)人蛋白(nephrin)免疫試劑盒

乙正酯 AR,99.0% 95%乙 光譜純?nèi)四I(RNLS/MAO-C)免疫試劑盒

甲醋酯 99%高哌 98%人神經(jīng)軸突絲蛋白(NAFP)自身抗體免疫試劑盒

乙二  99.4%2-基吡啶 98%人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)免疫試劑盒

正 CP,98.5% 乙基黃原 AR，95%人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)免疫試劑盒

聚乙烯吡咯烷酮 平均分子量 8000, K16-18乙基黃原 98%人神經(jīng)型一氧化氮合成(nNOS)免疫試劑盒

三乙烯 CP,98.5%2-氨基嘧啶 98%人神經(jīng)粘著分子(NRCAM)免疫試劑盒

1,2,3,4-四氫萘 CP2-(3-氧基) 98%人神經(jīng)粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)免疫試劑盒

1,2,3,4-四氫萘 AR，97%1-甲酰哌啶 99%人神經(jīng)特異性烯化(NSE)免疫試劑盒

1,2,3,4-四氫萘 Standard for GC, ≥99.5% (GC)3-吡啶甲 98%人神經(jīng)肽Nesfatin-1 免疫試劑盒

1,2,3,4-四氫萘  >98.5%(GC)反-玉米 98%人神經(jīng)絲蛋白M(NF-M)免疫試劑盒
溫和氣單胞菌核酸檢測(cè)試劑盒48T兔子促甲狀腺（TSH）ELISA試劑盒,6-吲哚B淋巴淋巴瘤因子9抗體

腦鈉/腦鈉尿肽（BNP）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人2-溴-5-甲膽綠還原抗體

CBZ-L-色氨2-溴-5-甲BIVM蛋白抗體

大薊  Pectolinarin2-溴-5-甲血型Lewis A抗原抗體

二氫辣椒  Dihydrocapsaicin2-溴甲基烯乙酯粘蛋白/巖藻糖基轉(zhuǎn)移3抗體

苦杏仁 Amygdalin2-溴甲基烯乙酯Bloom綜合征相關(guān)蛋白抗體

2′-脫氧鳥(niǎo)-5′-三磷四鈉鹽六鈦骨形態(tài)發(fā)生蛋白8b抗體

人膀胱腫瘤抗原（BTA）ELISA試劑盒,BTA ELISA kitAmiloride HCl dihydrate磷化非受體性蛋白酪氨激ETK抗體