川木通（莖/藤）標(biāo)準(zhǔn)品

川木通，中藥名。為毛茛科植物小木通Clematis armandii Franch.或繡球藤Clematis montana Buch.-Ham.的干燥藤莖。春、秋二季采收，除去粗皮，曬干，或趁鮮切薄片，曬干。

生理特性

本品呈長圓柱形，略單曲，長50～l0，直徑2～87.5px。表面黃棕色或黃褐色，有縱向凹溝及棱線；節(jié)處多膨大，有葉痕及側(cè)枝痕。殘存皮部易撕裂。質(zhì)堅(jiān)硬，不易折斷。切片厚2～4mm，邊緣不整齊，殘存皮部黃棕色，木部淺黃棕色或淺黃色，有黃白色放射狀紋理及裂隙，其間布滿導(dǎo)管孔，髓部較小，類白色或黃棕色，偶有奎腔。氣微，味淡。

川木通（莖/藤）標(biāo)準(zhǔn)品

慢病毒感染快速指南

1. 將目的細(xì)胞按 30%匯合度接種到 24 孔板，約 3-5×104細(xì)胞數(shù)/孔，不同細(xì)胞因?yàn)榧?xì)胞大小不同細(xì)胞數(shù)量會(huì)不同，快速指南以細(xì)胞數(shù)量為 5×104為例，加入 500uL wan全培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。

2. 接種后 12-20h 感染陰性對照慢病毒（接種細(xì)胞至病毒感染細(xì)胞時(shí)間不宜太長，否則細(xì)胞增殖影響細(xì)胞密度不利用后期抗性篩選）。

3.加病毒量計(jì)算方法：（細(xì)胞數(shù)×MOI 值/病毒滴度）×103=病毒量（uL），加病毒量見下表。同時(shí)加入 Polybrene，每孔加 0.25uL，濃度為 10mg/mL Polybrene，細(xì)胞培養(yǎng)液中終濃度為5ug/mL。

4.感染 16-20h 后更換培養(yǎng)基，棄去培養(yǎng)基，每孔加入 500uL 新鮮的培養(yǎng)基。

5.感染后 48-96h 顯微鏡觀察熒光。（注：如果 48h-96h 期間細(xì)胞匯合度達(dá)到 100%，請及時(shí)傳代培養(yǎng)）。

6.建議將 48 孔板細(xì)胞進(jìn)行傳代，傳代 12 孔板，后繼續(xù)觀察熒光，根據(jù)細(xì)胞狀態(tài)和熒光細(xì)胞比例綜合判斷細(xì)胞感染最佳 MOI 值。一般選擇細(xì)胞生長良好，感染效率 80%左右的感染條件作為最佳感染條件。（注：100%熒光感染不一定為細(xì)胞最佳 MOI 值，因?yàn)榭赡軙?huì)造成細(xì)胞慢病毒感染拷貝數(shù)太高，影響細(xì)胞狀態(tài)。