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化工儀器網>產品展廳>試劑標物>行業(yè)專用試劑>臨床醫(yī)學檢驗用試劑> 霍亂弧菌(VC)熒光PCR核酸擴增檢測試劑盒

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霍亂弧菌(VC)熒光PCR核酸擴增檢測試劑盒

參考價1500-2800
具體成交價以合同協議為準

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上海晅科生物科技有限公司系一家集研發(fā)、生產、銷售為一體的生物技術企業(yè)。公司主要經營酶聯免疫檢測試劑盒、原裝進口試劑盒、分子生物學檢測試劑盒、免疫學分析試劑盒、各品牌*抗體抗原、細胞菌株、生物培養(yǎng)基、血清、標準品、生化試劑等上萬余種科研試劑產品 ,致力于為廣大科研工作者、學校和企事業(yè)單位提供高品質的科研試劑和完善的技術服務,滿足生物化學、分子生物學、細胞生物學、免疫學等多領域生物科技實驗需求。我們視質量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司始終秉承信譽為生存之本的宗旨,以過硬的質量和優(yōu)良的服務來維護和拓展市場,大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標。我們愿與您精誠合作,共創(chuàng)美好的未來。

試劑,標準品,抗體,蛋白,細胞,菌種,ELISA試劑盒,膠體金快速檢測卡,PCR試劑盒,擔體

供貨周期 現貨 規(guī)格 48T
貨號 XK-PCR-1218 主要用途 科學研究

霍亂弧菌(VC)熒光PCR核酸擴增檢測試劑盒說明書

【產品名稱】

通用名稱:霍亂弧菌 (VC)核酸擴增檢測試劑盒(PCR 熒光探針法)

Name :Diagnostic Kit for Vibrio cholerae DNA (PCR Fluorescence Probing)

【包裝規(guī)格】48T/盒

【使用方法】

1. 樣品處理(樣本處理區(qū))

1.1樣本前處理

水樣便 13000rpm 離心 2min,去盡上清;疑似污染的食物用手術剪剪碎混勻

后取 0.05g 于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理鹽水后繼續(xù)研磨,待勻漿后轉至

1.5mL 滅菌離心管中,8000rpm 離心 2min,取上清液 100uL 于 1.5mL 滅菌離

心管中;疑似污染的水直接取 100uL

1.2DNA 提取

1) 對上述處理好的標本加入等體積核酸提取液(固體標本加入50uL核酸提取液),

100℃恒溫處理 10 分鐘,13,000 rpm 離心 5 分鐘,取上清液轉移至新的 1.5ml

EP 管,-20℃保存;

2) DNA 的提取也可以采用上海晅科生物科技有限公司生產的 DNA 提取試劑

盒(離心柱提取法),請嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

2. 試劑配制(試劑準備區(qū))

根據待檢測樣本總數,設所需要的 PCR 反應管管數為 N(N=樣本數+1 管陰性

對照+1 管陽性對照;樣品每滿 7 份,多配制 1 份),每測試反應體系配制如下表:

試劑 VC 反應液 酶液

用量(樣本數為 N) 20μl 1μl

3. 加樣(樣本處理區(qū))

將步驟 1 提取的 DNA、陽性質控品、陰性質控品各取 4μl,分別加入相應的反

應管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。

4. PCR 擴增(核酸擴增區(qū))

4.1 將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內;

4.2 設置好通道、樣品信息,反應體系設置為 25ul;

熒光通道選擇: 檢測通道(Reporter Dye)FAM, 淬滅通道(Quencher Dye)

NONE,請勿選擇 ROX 參比熒光。

4.3 推薦循環(huán)參數設置:

步驟 循環(huán)數 溫度 時間 收集熒光信號

1 1 cycle 95℃ 10min 否

2 40 cycle

94℃ 15sec 否

55℃ 30sec 是

5. 結果分析判定

5.1結果分析條件設定

【預期用途】

本試劑盒適用于檢測水樣糞便,疑似污染的水、食物等樣本中的霍亂弧菌,用于霍亂弧菌感染的輔助診斷,其檢測結果僅供參考。

【檢驗原理】

本試劑盒用一對霍亂弧菌特異性引物,結合一條特異性探針,用熒光 PCR 技術對霍亂弧菌的核酸進行體外擴增檢測,用于臨床上對可疑感染者的病原學診斷。

說明:不同批號的試劑盒組分不可交互使用。

【儲存條件和有效期】

試劑盒保存于-20±5℃,有效期 12 個月;

避免反復凍融,凍融次數不超過 5 次;試劑開瓶后,在室溫條件下放置時間不

應超過 8 小時;運輸采用干冰(或者冰袋)保持低溫,運輸時間不應超過 4 天。試

劑盒生產日期見產品標簽。

【適用儀器】

ABI 7300、7500、ABI stepone / stepone plus 、安捷倫 MX3000P/3005P、MJ

Opticon2 等其他熒光定量 PCR 檢測儀。

【標本要求】

標本采集:水樣便取0.5~1mL;疑似污染的食物取1g

保存運輸:上述標本短期內可保存于-20℃,長期保存可置-70℃,但不能超過6個月,標本運送應采用 2~8℃冰袋運輸,嚴禁反復凍融。

設置 Baseline 和 Threshold:一般直接按機器自動分析的結果分析,當曲線出

現整體傾斜時,根據分析后圖像調節(jié) Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍

內調節(jié))、stop 值(一般可在 5~20 范圍內調節(jié)),以及 Threshold 的 Value 值(上

下拖動閾值線至高于陰性對照),重新分析結果。

5.2結果判斷

陽性:檢測通道 Ct 值≤35.0,且曲線有明顯的指數增長曲線;

可疑:檢測通道 35.0<Ct 值≤37,建議重復檢測,如果檢測通道仍為 35.0<Ct

值≤37,且曲線有明顯的增長曲線,判定為陽性,否則為陰性;

陰性:樣本檢測結果 Ct 值>37 或無 Ct 值。

6. 檢測方法的局限性

1)樣本檢測結果與樣本收集、處理、運送以及保存質量有關;

2)樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會出現假陽性結果;

3)陽性對照、擴增產物泄漏,會導致假陽性結果;

4)病原體在流行過程中基因突變、重組,會導致假陰性結果;

5)不同的提取方法存在提取效率差異,會導致假陰性結果;

6)試劑運輸,保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,出現假陰性或定量檢測不準確的結果;

7)本檢測結果僅供參考,如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段。

7. 質控標準

陰性質控品:無明顯擴增曲線或無 Ct 值顯示;

陽性質控品:擴增曲線有明顯指數生長期,且 Ct 值≤32;

以上條件應同時滿足,否則實驗視為無效。

8. 產品性能指標

陰陽性參考品符合率:8 份陽性參考品符合率為 100%;10 份陰性參考品符合

率為 100%。

低檢測限:2.0×102copies/ml。

精密度:批內、批間精密度檢測 Ct 值的變異系數(CV)均≤3%。

【注意事項】

1.所有操作嚴格按照說明書進行;

2.試劑盒內各種組分使用前應自然融化,*混勻并短暫離心;

3.反應液應避光保存;

4.反應中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;

5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)工作服;

6.樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進行,以免交叉污染;

7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器;

8.試劑盒里所有物品應視為污染物對待,并按照《微生物生物醫(yī)學實驗室生物安全通則》進行處理。

公司優(yōu)勢:
1)質量:我司提供的的試劑為世界
2)價格:價格實惠,量大從優(yōu)。
4)服務:提供完整的售前、售后和售中服務。售后到底

如需訂購霍亂弧菌(VC)熒光PCR核酸擴增檢測試劑盒,請聯系我們。

此外公司還提供:

0111口蹄疫病毒通用型(FMDV-U)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
1211鏈球菌B族(GBS)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
1111溶血性鏈球菌A群(GAS)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
1011氣腫疽梭菌(CC)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
0911類鼻疽伯克霍爾德菌(PP)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
0811廣州管圓線蟲核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T


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