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鴨源性成分Co1基因(Duck-Co1)熒光PCR試劑盒

參考價(jià)1500-2800
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱 上海晅科生物科技有限公司
  • 品牌其他品牌
  • 型號(hào)
  • 所在地上海市
  • 廠商性質(zhì)生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間2023/7/5 8:36:53
  • 訪問(wèn)次數(shù) 926

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上海晅科生物科技有限公司系一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售為一體的生物技術(shù)企業(yè)。公司主要經(jīng)營(yíng)酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒、原裝進(jìn)口試劑盒、分子生物學(xué)檢測(cè)試劑盒、免疫學(xué)分析試劑盒、各品牌*抗體抗原、細(xì)胞菌株、生物培養(yǎng)基、血清、標(biāo)準(zhǔn)品、生化試劑等上萬(wàn)余種科研試劑產(chǎn)品 ,致力于為廣大科研工作者、學(xué)校和企事業(yè)單位提供高品質(zhì)的科研試劑和完善的技術(shù)服務(wù),滿足生物化學(xué)、分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等多領(lǐng)域生物科技實(shí)驗(yàn)需求。我們視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司始終秉承信譽(yù)為生存之本的宗旨,以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。我們?cè)概c您精誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。

試劑,標(biāo)準(zhǔn)品,抗體,蛋白,細(xì)胞,菌種,ELISA試劑盒,膠體金快速檢測(cè)卡,PCR試劑盒,擔(dān)體

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 48T
貨號(hào) XK-PCR-1085 主要用途 科學(xué)研究

鴨源性成分Co1基因(Duck-Co1)熒光PCR試劑盒說(shuō)明書(shū)

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱:鴨源性成分Co1基因(Duck-Co1)核酸檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR 法)

Name   :Duck-Co1 Gene (Duck-Co1) Nucleic Acid Detection Kit (Fluorescence-PCR)

【包裝規(guī)格】48T/盒

【預(yù)期用途】

動(dòng)物源性成分廣泛分布于食品、飼料、化妝品等,與人們的生活息息相關(guān),其中食品和飼料所占的比例大。肉及肉制品摻假成為世界各國(guó)共同關(guān)注的熱點(diǎn)問(wèn)題,肉食品及其飼料的安全隱患直接關(guān)系到人類的安危。近幾十年來(lái),以PCR技術(shù)為核心的動(dòng)物源性成分檢測(cè)獲得了廣泛應(yīng)用。

本試劑盒適用于動(dòng)物組織以及食品、飼料等樣本中鴨源性成分Co1基因的檢測(cè)。

【檢驗(yàn)原理】

本試劑盒對(duì)鴨源性成分Co1基因保守區(qū)設(shè)計(jì)特異性的引物和探針[1-3],用熒光 PCR 技術(shù)對(duì)核酸進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè),從而達(dá)到快速檢測(cè)之目的。

【試劑組成】

名 稱 規(guī) 格

酶液 50μL×1 管

Chicken 反應(yīng)液 1.0mL×1 管

Chicken 陽(yáng)性質(zhì)控品 50μL ×1 管

陰性質(zhì)控品 250μL ×1 管

注:

1)不同批號(hào)試劑不能混用。

2)試劑盒內(nèi)各試劑組份足夠包裝規(guī)格所標(biāo)示的檢測(cè)次數(shù)。

【儲(chǔ)存條件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過(guò) 5 次。有效期 12 個(gè)月。

【適用儀器】

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、MJ Opticon2、LightCycler480、Bio-Rad、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測(cè)儀。

【標(biāo)本采集】

取動(dòng)物組織及其制品、食品或飼料約 1g。

【保存和運(yùn)輸】

上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃,長(zhǎng)期保存可置-70℃。但不能超過(guò)6個(gè)月,標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用0℃。

【使用方法】

1.樣品處理(樣本處理區(qū))

1.1樣本前處理:

取動(dòng)物組織及其制品、食品或飼料約 1g,手術(shù)剪剪碎混勻后取 0.5g 于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理鹽水后繼續(xù)研磨,待勻漿后轉(zhuǎn)至 1.5mL 滅菌離心管中, 8000rpm 離心 2min,取上清液 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中。

1.2DNA 提取

DNA 的提取推薦采用上海晅科生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA 提取試劑盒(離心柱提取法),請(qǐng)嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

2.試劑配制(試劑準(zhǔn)備區(qū))

根據(jù)待檢測(cè)樣本總數(shù),設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對(duì)照+1 管陽(yáng)性對(duì)照;樣品每滿 7 份,多配制 1 份),每測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:

步驟 循環(huán)數(shù) 溫度 時(shí)間 收集熒光信號(hào)

1 1 cycle 95℃ 10min 否

2 40 cycles 94℃ 15sec 否

55℃ 30sec 是

5.結(jié)果分析判定

5.1結(jié)果分析條件設(shè)定

設(shè)置 Baseline 和 Threshold:一般直接按機(jī)器自動(dòng)分析的結(jié)果分析,當(dāng)曲線出現(xiàn)整體傾斜時(shí),根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop 值(一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)),以及 Threshold 的 Value 值(上下拖動(dòng)閾值線至高于陰性對(duì)照),重新分析結(jié)果。

5.2判斷

a)檢測(cè)通道 Ct 值<30.0,有 FAM 熒光信號(hào)檢出,并出現(xiàn)明顯的擴(kuò)增曲線,判斷樣品為陽(yáng)性。

b)當(dāng) 30.0≤Ct 值≤35.0 時(shí),且有明顯的擴(kuò)增曲線時(shí),則需重復(fù)實(shí)驗(yàn)。再次擴(kuò)增后檢測(cè)體系的Ct 值仍≤35.0,且有明顯的擴(kuò)增曲線,則判定該樣品含有相應(yīng)的動(dòng)物源性成分。當(dāng)再次擴(kuò)增后,檢測(cè)體系 Ct 值>35.0,或無(wú)明顯的擴(kuò)增曲線,則判定該樣品不含相應(yīng)的動(dòng)物源性成分。

6.檢測(cè)方法的局限性

1)樣本檢測(cè)結(jié)果與樣本收集、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān);

2)樣本提取過(guò)程中沒(méi)有控制好交叉污染,會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果;

3)陽(yáng)性對(duì)照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏,會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果;

4)病原體在流行過(guò)程中基因突變、重組,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;

5)不同的提取方法存在提取效率差異,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;

6)試劑運(yùn)輸,保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測(cè)效能下降,出現(xiàn)假陰性或   定量檢測(cè)不準(zhǔn)確的結(jié)果;

7)本檢測(cè)結(jié)果僅供參考,如須確診請(qǐng)結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測(cè)手段。

7.質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

a)空白對(duì)照:無(wú)FAM 熒光信號(hào)檢出或 Ct 值≥35.0,未出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線。

b)陰性對(duì)照:無(wú)FAM 熒光信號(hào)檢出或 Ct 值≥35.0,未出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線。

c)陽(yáng)性對(duì)照:有 FAM 熒光信號(hào)檢出,并出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線,Ct 值<30.0。

d)以上應(yīng)同時(shí)滿足,否則本次實(shí)驗(yàn)無(wú)效。

【注意事項(xiàng)】

1)所有操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行;檢驗(yàn)過(guò)程中,參照《GB/T 27403 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品分子生物學(xué)檢測(cè)》的規(guī)定進(jìn)行。

2)試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,混勻并短暫離心;

3)反應(yīng)液應(yīng)避光保存;

4)反應(yīng)中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;

5)使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)工作服;

6)樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行,以免交叉污染;

7)實(shí)驗(yàn)完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺(tái)和移液器;

8)試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對(duì)待,并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全   通則》進(jìn)行處理。

【參考文獻(xiàn)】

[1]商務(wù)部. SB/T 10923-2012 肉及肉制品中動(dòng)物源性成分的測(cè)定實(shí)時(shí)熒光 PCR 法[S]. 北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2012.

[2]王琰. 兔源性食品的PCR-mtDNA 鑒別[J]. 山東師范大學(xué), 2013.

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