活細(xì)菌/死細(xì)菌染色試劑盒
- 公司名稱 翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 品牌 Yeasen/翌圣生物
- 型號
- 產(chǎn)地 翌圣生物
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/2/7 13:55:19
- 訪問次數(shù) 6196
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企業(yè)簡介
翌圣生物科技（上海）股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白質(zhì)改造和酶進(jìn)化技術(shù)為驅(qū)動，聚焦生命科學(xué)產(chǎn)業(yè)鏈上游核心原料，從事分子、蛋白和細(xì)胞三大品類生物試劑的研發(fā)、生產(chǎn)與銷售的高新技術(shù)企業(yè)，通過打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細(xì)胞的技術(shù)開發(fā)路徑，成為國內(nèi)少數(shù)同時覆蓋三大品類生物試劑、兼?zhèn)浜诵募夹g(shù)自主研發(fā)能力和規(guī)?；a(chǎn)能力的高新技術(shù)企業(yè)，產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究領(lǐng)域、診斷與檢測領(lǐng)域和生物醫(yī)藥領(lǐng)域。
主營業(yè)務(wù)
公司憑借在蛋白質(zhì)改造和酶進(jìn)化領(lǐng)域的技術(shù)優(yōu)勢和深耕生物試劑行業(yè)多年積累的豐富經(jīng)驗，構(gòu)建了品質(zhì)優(yōu)良、類型齊全、種類豐富的產(chǎn)品管線。自公司成立以來，公司研發(fā)、生產(chǎn)和銷售的生物試劑超過3000種，涵蓋分子、蛋白、細(xì)胞三大品類的生物試劑，能夠滿足客戶多種類型生物試劑的一體化采購需求。公司核心產(chǎn)品覆蓋qPCR系列、NGS系列、逆轉(zhuǎn)錄系列、核酸提取與純化系列、PCR系列、分子克隆系列、體外轉(zhuǎn)錄系列、抗體、蛋白純化系列、蛋白分析系列、重組蛋白、細(xì)胞分析系列、細(xì)胞培養(yǎng)系列、細(xì)胞轉(zhuǎn)染系列、報告基因檢測系列等多個品類的生物試劑，廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究、診斷檢測和生物醫(yī)藥等領(lǐng)域。
發(fā)展歷程
榮譽資質(zhì)
翌圣生物通過申請商標(biāo)和軟件著作權(quán)的方式保障核心技術(shù)和市場競爭力，不斷加強(qiáng)公司品牌建設(shè)。截至2022年3月31日，公司已經(jīng)獲得授權(quán)18項（其中發(fā)明14項、實用新型1項、外觀設(shè)計3項）和45項與生物試劑相關(guān)的軟件著作權(quán)，擁有經(jīng)國家知識產(chǎn)權(quán)局商標(biāo)局核準(zhǔn)的注冊商標(biāo)權(quán)37項以及4項境外注冊商標(biāo)，是國家高新技術(shù)企業(yè)和上海市專精特新企業(yè)。
創(chuàng)新平臺
經(jīng)過多年的產(chǎn)品研發(fā)技術(shù)經(jīng)驗的沉淀以及持續(xù)的研發(fā)創(chuàng)新，翌圣生物積極開展“產(chǎn)學(xué)研”合作，與擁有生物催化與酶領(lǐng)域國家重點實驗室的湖北大學(xué)、擁有教育部工業(yè)生物領(lǐng)域重點研究基地的江南大學(xué)展開合作，優(yōu)化生物試劑關(guān)鍵原料的生產(chǎn)和表達(dá)工藝。翌圣生物以基因工程技術(shù)、生物信息技術(shù)、細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)、免疫學(xué)技術(shù)、生化分析技術(shù)等生命科學(xué)領(lǐng)域的共性生物技術(shù)為基礎(chǔ)，建立了六大核心技術(shù)平臺——雙向分子酶理性設(shè)計與定向進(jìn)化平臺、密度發(fā)酵與超潔凈純化平臺、分子診斷試劑關(guān)鍵原料研發(fā)平臺、高通量測序建庫試劑創(chuàng)新研發(fā)平臺、高性能單克隆抗體研發(fā)平臺和mRNA醫(yī)藥應(yīng)用研發(fā)平臺，目前已經(jīng)自主研發(fā)出20項核心技術(shù)，打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細(xì)胞的技術(shù)開發(fā)路徑，覆蓋技術(shù)研發(fā)、產(chǎn)品升級、規(guī)模生產(chǎn)和質(zhì)量控制等生物試劑研發(fā)和生產(chǎn)的各關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
工業(yè)化生產(chǎn)
翌圣生物擁有按照準(zhǔn)GMP 標(biāo)準(zhǔn)建設(shè)運營的工業(yè)化生產(chǎn)基地，配有噸級發(fā)酵線、工業(yè)級 AKTA 純化線和全自動包裝線。同時，公司通過了ISO 13485:2016質(zhì)量管理體系認(rèn)證，從原料控制、生產(chǎn)管理、質(zhì)檢管控、倉儲運輸?shù)葘ιa(chǎn)線進(jìn)行360度管理監(jiān)督，保證產(chǎn)品過程的可控制性及可追溯性，竭盡全力為您提供可靠的產(chǎn)品。
客戶服務(wù)
翌圣生物憑借優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定的產(chǎn)品質(zhì)量、高效及時的響應(yīng)能力、快速穩(wěn)定的交付能力和周到完備的售后服務(wù)獲得了眾多科研用戶和工業(yè)用戶的認(rèn)可，為檢測公司、治療公司、工具類公司和科學(xué)研究實驗室提供應(yīng)用于科學(xué)研究、體外診斷、基因測序、生物醫(yī)藥等的生物試劑。與中國科學(xué)院、清華大學(xué)、北京大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)、浙江大學(xué)等頂尖科研院所和華大基因、恒瑞醫(yī)藥、藥明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工業(yè)客戶建立了穩(wěn)定、緊密的合作關(guān)系，公司產(chǎn)品被多次使用在Nature、Science、Cell等國際頂級期刊論文發(fā)表中。
公司企業(yè)文化
幫助客戶創(chuàng)造價值，讓世界更健康更快樂
◎ 成為生命科學(xué)工具領(lǐng)域全球Top⑩
◎ 具備驅(qū)動產(chǎn)業(yè)變革的技術(shù)創(chuàng)新能力
◎ 擁有一支持續(xù)學(xué)習(xí)型的翌圣鐵軍
翌圣生物始終秉承“幫助客戶創(chuàng)造價值，讓世界更健康更快樂”的使命，專注于技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)品升級，不斷拓展核心技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域，為客戶提供更為的產(chǎn)品與服務(wù)，助力我國打造自主可控的生物試劑產(chǎn)業(yè)鏈。同時，翌圣生物將進(jìn)一步推進(jìn)國際化戰(zhàn)略，繼續(xù)布局和拓展海外市場，為全球生物試劑產(chǎn)業(yè)發(fā)展貢獻(xiàn)力量。
分子生物學(xué)試劑，細(xì)胞生物學(xué)試劑，免疫學(xué)試劑，蛋白組學(xué)試劑等
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100 T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 40274ES60 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格 |
Live & Dead Bacterial Staining Kit 活細(xì)菌/死細(xì)菌染色試劑盒 | 40274ES60 | 100 T | 3683.00 |
產(chǎn)品描述
活細(xì)菌/死細(xì)菌染色試劑盒內(nèi)含兩種熒光染料DMAO和EthD-III，可分別將活細(xì)菌和死細(xì)菌染上綠色和紅色。其中DMAO是一種綠色核酸熒光染料，可染色活細(xì)菌和死細(xì)菌。EthD-III是一種紅色核酸熒光染料，僅染色細(xì)胞膜受損的死細(xì)菌。將DMAO和EthD-III混合使用染色時具有完整細(xì)胞膜的細(xì)菌呈現(xiàn)綠色，而具有受損細(xì)胞膜的細(xì)菌呈現(xiàn)綠色和紅色。結(jié)果可以通過熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀來分析，適用于大多數(shù)細(xì)菌類型。
細(xì)菌活力的常見標(biāo)準(zhǔn)是細(xì)菌在合適的營養(yǎng)培養(yǎng)基中繁殖的能力，稱為生長測定。該試劑盒通常與在液體或固體培養(yǎng)基中的生長測定結(jié)果有著很好的一致性。在某些條件下，膜損傷的細(xì)菌可能會在營養(yǎng)培養(yǎng)基中恢復(fù)并繁殖，而這種細(xì)菌在該測定中可能會被認(rèn)為死亡。相反，一些具有完整膜的細(xì)菌可能無法在營養(yǎng)培養(yǎng)基中繁殖，但這些細(xì)菌在該測定中可能被認(rèn)為是活的。因此，如果發(fā)現(xiàn)該檢測和細(xì)菌生長測定之間有相當(dāng)大的差異，應(yīng)該考慮上述的可能性。
光譜特性DMAO：Ex/Em=503/530nm（withNDA）； EthD-III：Ex/Em=530/620nm（withNDA）
產(chǎn)品組分
編號 | 組分名稱 | 產(chǎn)品編號/規(guī)格 |
40274ES60（100T） | ||
40274-A | DMAO | 100 μL |
40274-B | EthD-III | 200 μL |
運輸與保存方法
冰袋（wet ice）運輸。儲存于4 oC，至少可以儲存6個月。
注意事項
操作時請采取防護(hù)措施，穿防///護(hù)服、戴一次性手套等。
使用方法
活、死細(xì)菌樣品對照制備（可選）
1. 在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)4 mL的細(xì)菌至晚期對數(shù)期。
2. 在EP管中準(zhǔn)備兩份1mL的細(xì)菌液，并在5,000-10,000g條件下離心10-15 min。
3. 去除上清液，在其中一支EP管中加入0.3mL的0.85% NaCl重懸細(xì)菌，在另一管中加入1 mL的0.85% NaCl重懸細(xì)菌。
4. 在含有0.3 mL的0.85% NaCl的管中加入0.7 mL異丙醇，充分混合（終濃度為70% 的異丙醇）用以制備死細(xì)菌樣品。
5. 將兩種樣品在室溫下孵育1 h，每15 min混合一次。
6. 兩種樣品在5,000-10,000g條件下離心10-15 min。
7. 去除上清，在兩種樣品中加入1 mL的0.85% NaCl重懸細(xì)菌，并如步驟6再次離心。
8. 使用分光光度計測定兩種菌懸液在670 nm處的吸光值（OD670）。
9. 將兩種菌懸液（活的和死亡的）密度調(diào)整到108個細(xì)菌/ mL（OD670≈0.3），然后用0.85% 的NaCl以1：100稀釋，使終密度為106個細(xì)菌/ mL。
10. 如下所示混合兩種菌懸液以獲得所需的活細(xì)胞：死細(xì)胞比率。
表1. 活、死菌懸液按一定體積混合以達(dá)到所需的活細(xì)胞、死細(xì)胞比例
活細(xì)胞：死細(xì)胞 | 活菌懸液體積 (mL) | 死菌懸液體積(mL) |
0:100 | 0 | 1.0 |
10:90 | 0.1 | 0.9 |
20:80 | 0.2 | 0.8 |
30:70 | 0.3 | 0.7 |
40:60 | 0.4 | 0.6 |
50:50 | 0.5 | 0.5 |
60:40 | 0.6 | 0.4 |
70:30 | 0.7 | 0.3 |
80:20 | 0.8 | 0.2 |
90:10 | 0.9 | 0.1 |
100:0 | 1.0 | 0 |
熒光顯微鏡的染色方法
1. 將1體積的DMAO和2體積的EthD-III在微量離心管中混合，充分混合后加入8體積的0.85% NaCl溶液以得到100×染料溶液。
2. 每100 μL菌懸液，加1 μL的100×染料溶液。
3. 充分混合，室溫下在黑暗中孵育15 min。
4. 取5 μL染色后的菌懸液滴在帶有18 mm方形蓋玻片的載玻片上。
5. 在熒光顯微鏡下觀察?；罴?xì)菌和死細(xì)菌的熒光可以在任何標(biāo)準(zhǔn)的FITC長效過濾器下同時觀察到?；蛘撸畹模ňG色熒光）和死的（紅色熒光）細(xì)菌可以分別用FITC和Cy3（或TexasRed）通道觀察。
注意：
1) 在對細(xì)菌染色之前，必須注意除去生長介質(zhì)的殘留。核酸和其他培養(yǎng)基組分可以以某種方式結(jié)合DMAO和EthD-III染料，導(dǎo)致不可接受的染色變化。簡單的洗滌步驟通常足以從細(xì)菌懸浮液中除去干擾介質(zhì)組分。不建議使用磷酸鹽緩沖液，因為它們會降低染色效率。
2) 在開始正式實驗前應(yīng)調(diào)節(jié)染料濃度來使DMAO標(biāo)記活細(xì)菌、使EthD-III標(biāo)記死細(xì)菌進(jìn)行區(qū)分。///佳濃度可能因細(xì)菌菌株的不同而異。一般///好使用能夠提供充足信號的///低染料濃度。以下條件針對大腸桿菌活/死細(xì)胞染色進(jìn)行了優(yōu)化。
細(xì)胞流式的染色方法
實驗開始前，請閱讀熒光顯微鏡染色步驟下的注意事項。
1. 根據(jù)表1，在EP管中加入11種不同比例的活細(xì)菌和死細(xì)菌。11種樣品中每種的體積1 mL。
2. 將12 μL的DMAO儲備溶液與24 μL的EthD-III儲備液在微量離心管中混合。11個樣品中的每個加入3 μL的混合染料，通過上下吹打幾次*混合。（注意：需要準(zhǔn)備另外的對照細(xì)菌樣品用于單獨的DMAO和單獨的EthD-III染色）
3. 室溫下在黑暗中孵育15 min。
4. 使用流式細(xì)胞儀分析每個樣品，使用DMAO陽性細(xì)胞的FITC通道和EthD-III陽性細(xì)胞的PI或PE通道。
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
Calcein-AM/PI 活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒 Calcein-AM/PI Double Stain Kit | 40747ES76 | 500T | 853.00 |
40747ES80 | 1000T | 1453.00 | |
Hoechst 33342/PI 雙染試劑盒 Hoechst 33342/PI Double Stain Kit | 40744ES60 | 1KIT（100 T) | 219.00 |
HB201229
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