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色譜柱污染色譜柱污染會(huì)引起保留時(shí)間漂移。HPLC色譜柱是非常有效的吸附性過濾器，它可以過濾并吸附流動(dòng)相攜帶的任何物質(zhì)。污染源可能是：流動(dòng)相本身，流動(dòng)相容器，連接管，泵，進(jìn)樣器和儀器密封墊，以及樣品等。

樣品中如果存在色譜柱上保留很強(qiáng)的組分，就可能使保留時(shí)間漂移。通常樣品中的強(qiáng)保留組分具有較高的分子量，在此情況下，保留時(shí)間漂移的同時(shí)或其后會(huì)有反壓的增加?？梢酝ㄟ^使用固相提取等樣品前處理方法來去除樣品基質(zhì)的影響。

避免色譜柱污染簡(jiǎn)單的方法是防患于未然。相比之下，找到問題的所在并設(shè)計(jì)有效的清洗步驟以去除污染物要困難的多。通常使用在給定色譜條件下的強(qiáng)溶劑，但并非所有污染物都可以在流動(dòng)相中溶解。使用保護(hù)柱是個(gè)非常有效的方法。反沖色譜柱僅是不得已時(shí)采用的辦法。

4色譜柱平衡如果我們觀察到保留時(shí)間漂移，首先應(yīng)考慮色譜柱是否已用流動(dòng)相*平衡。通常平衡需要10~20個(gè)柱體積的流動(dòng)相。但如果在流動(dòng)相中加入少量添加劑則需要相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間來平衡色譜柱。需要柱子的充分平衡，然后才能對(duì)HPLC進(jìn)行檢定。

5流動(dòng)相有機(jī)溶劑HPLC分析總要求使用HPLC純的試劑，關(guān)鍵是兩點(diǎn)：純度高，紫外吸收小。純度高，是希望沒有雜質(zhì)干擾HPLC分析，不會(huì)有金屬離子損害純度為99.99%以上的高純度硅膠基質(zhì)?？梢酝ㄟ^重蒸分析純?nèi)軇驗(yàn)V膜過濾，并定期把前置的過濾頭取下，放稀里清洗，再用純水洗至中性。

流動(dòng)相有機(jī)溶劑可能影響HPLC的檢測(cè)限。6柱壓柱壓過高是HPLC分析中常碰到的問題。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的問題。溶劑或樣品含有顆粒雜質(zhì)，這些雜質(zhì)將篩板堵塞引起壓力上升，應(yīng)更換柱子入口篩板，泵內(nèi)有空氣，解決的辦法是泵內(nèi)空氣，對(duì)溶劑進(jìn)行脫氣處理，比例閥失效，應(yīng)更換比例閥，泵密封墊損壞，應(yīng)更換密封墊，系統(tǒng)檢漏，則找出漏點(diǎn)，密封即可。

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