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abs510003 Human IL-6 ELISA Kit

參考價(jià)2000.00
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
規(guī)格
96T2000.00元999 盒可售

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愛必信(上海)生物科技有限公司是一家從事生物學(xué)試劑及耗材的高新技術(shù)企業(yè)。公司秉承“為生命科學(xué)創(chuàng)造便利!為客戶創(chuàng)造價(jià)值!為員工創(chuàng)造幸福人生!”的發(fā)展理念,擁有專業(yè)的產(chǎn)品研發(fā)質(zhì)檢團(tuán)隊(duì)、市場(chǎng)營銷團(tuán)隊(duì)及*倉儲(chǔ)物流等管理團(tuán)隊(duì)。榮獲2021年度上海市“專精特新”企業(yè)稱號(hào)。

自營品牌Absin®,主要經(jīng)營產(chǎn)品有:生化試劑(常用生化試劑、生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用試劑、熒光染料、激動(dòng)劑/抑制劑,植物提取物)、細(xì)胞生物學(xué)(細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品、血清、基質(zhì)膠、添加劑、檢測(cè)試劑盒)、免疫學(xué)產(chǎn)品、分子生物學(xué)產(chǎn)品、實(shí)驗(yàn)室儀器/耗材、產(chǎn)品定制和檢測(cè)服務(wù)。

Absin還提供一些特色產(chǎn)品:霍亂毒素B亞單位(CTB)、 雞胚提取物(CEE)、 牛腦垂體提取物、 呼吸爆發(fā)試劑盒、 多色免疫組化試劑盒、 mRNA原料等在業(yè)界深受客戶喜歡。

Absin秉承踏實(shí),務(wù)實(shí),求精和不斷創(chuàng)新的精神為中國科學(xué)家提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品,努力打造屬于中國自己的生物試劑品牌,為廣大科學(xué)家提供更全面更豐富更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

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生化試劑,分子生物學(xué)試劑,血清,細(xì)胞培養(yǎng)試劑,化學(xué)試劑,免疫學(xué)試劑,耗材,儀器,定制服務(wù)

CAS - 純度 -
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 96T
貨號(hào) abs510003 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè),綜合
主要用途 -

別名:

B cell stimulatory factor-2, B-cell differentiation factor, BSF-2, BSF2CTL differentiation factor, CDF, HGFHSFIFNB2Hybridoma growth factor, IFN-beta-2, IL6, IL-6, IL-6B-cell stimulatory factor 2, Interferon beta-2, interleukin 6 (interferon, beta 2), interleukin BSF-2, interleukin-6, MGI-2A,人白介素6Elisa試劑盒


檢驗(yàn)原理:

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。特異性抗人IL-6抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和生wu素化的檢測(cè)抗體,經(jīng)過孵育,樣本中存在的IL-6與固相抗體和檢測(cè)抗體結(jié)合,形成免疫復(fù)合物。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物,避光顯色。加入終止液終止反應(yīng),在450nm波長(參考校正波長540nm或570nm)測(cè)定吸光度值。


反應(yīng)種屬:Human


檢測(cè)范圍:9.38pg/mL-600pg/mL


注意事項(xiàng):

1. 請(qǐng)?jiān)谠噭┖杏行趦?nèi)使用。
2. 不同試劑盒及不同批號(hào)試劑盒的組分不能混用。
3. 樣本值若大于標(biāo)準(zhǔn)曲線的最高值,應(yīng)將樣本用稀釋劑(1×)稀釋后重新檢測(cè);若細(xì)胞培養(yǎng)上清液樣本需分布稀釋,除最后一步用稀釋劑(1×)稀釋外,其它中間稀釋可采用細(xì)胞培養(yǎng)基。
4. 檢測(cè)結(jié)果的不同可由多種因素引起,包括實(shí)驗(yàn)人員的操作、移液器的使用方式、洗板技術(shù)、反應(yīng)時(shí)間或溫度、試劑盒的儲(chǔ)存等。
5. 試劑盒中的終止液是酸性溶液,使用時(shí)請(qǐng)做好眼鏡、手、面部及衣服的防護(hù)。
6. 僅供科研使用,不可用于體外診斷。


使用方法:


需自備試驗(yàn)器材
1. 酶標(biāo)儀(可測(cè)量450nm檢測(cè)波長的吸收值及540nm或570nm校正波長的吸收值)
2. 高精度加液器及一次性吸頭
3. 蒸餾水或去離子水
4. 洗瓶(噴瓶)、多通道洗板器或自動(dòng)洗板機(jī)
5. 500mL量筒


一、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備


1. 樣品搜集及儲(chǔ)存
①細(xì)胞培養(yǎng)上清:顆粒物應(yīng)通過離心去除;立刻檢測(cè)樣本。樣本收集后若不及時(shí)檢測(cè),建議按一次使用量分裝,凍存于-20℃冰箱內(nèi),避免反復(fù)凍融。樣本可能需要用稀釋劑(1×)稀釋。
②血清:使用血清分離管(SST)收集樣本,樣品室溫放置30分鐘。離心15分鐘,轉(zhuǎn)速為1000g。立即取出血清,并立即檢測(cè)。樣本收集后若不及時(shí)檢測(cè),建議按一次使用量分裝,凍存于≤-20℃冰箱內(nèi),避免反復(fù)凍融。樣本可能需要用稀釋劑(1×)稀釋。
③血漿:使用EDTA、肝素或檸檬酸作為抗凝血?jiǎng)┦占獫{,在收集后30分鐘內(nèi)離心15分鐘,轉(zhuǎn)速為1000g,并立即檢測(cè)。樣本收集后若不及時(shí)檢測(cè),建議按一次使用量分裝,凍存于≤-20℃冰箱內(nèi),避免反復(fù)凍融。樣本可能需要用稀釋劑(1×)稀釋。


2. 試劑配制使用前請(qǐng)將所有試劑和樣本放置于室溫,靜置15min。建議所有的實(shí)驗(yàn)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做復(fù)孔檢測(cè)
①1×洗滌液配制:試劑盒中的濃縮洗滌液為20×母液,使用前需使用蒸餾水稀釋為1×工作液。

例:取10mL濃縮洗滌液+190mL蒸餾水定容至200mL,實(shí)際操作時(shí)可先計(jì)算使用量,再進(jìn)行配制。
②1×稀釋用緩沖液配制:試劑盒中的濃縮稀釋用緩沖液為10×母液,使用前需使用蒸餾水稀釋至1×工作液。

例:取3mL濃縮稀釋用緩沖液+27mL蒸餾水定容至30mL。實(shí)際操作時(shí)可先依據(jù)樣本稀釋倍數(shù),計(jì)算所需的稀釋用緩沖液用量,再進(jìn)行配制。
③檢測(cè)抗體:將干粉離心至管底,使用110uL稀釋用緩沖液(1×)溶解,室溫靜置5分鐘后得到100×母液;使用前需稀釋為1×工作液。按照每孔用量100uL計(jì)算所需體積。

例:使用了10個(gè)孔,則取10uL的100倍工作濃度的檢測(cè)抗體,使用稀釋用緩沖液(1×)定容至1mL,得到1mL的1×工作濃度的檢測(cè)抗體。
④SA-HRP:SA-HRP為40×母液,使用前需使用稀釋緩沖液(1×)稀釋配制成1×工作液,每孔所需量為100uL。

例:使用了10個(gè)孔,則取25uL的40×母液+975uL稀釋用緩沖液(1×)定容至1mL,得到1mL的1×工作濃度的檢測(cè)抗體。
⑤顯色劑:按每孔100uL,計(jì)算當(dāng)次試驗(yàn)所需要用量,取出相應(yīng)體積的顯色劑,避光;取出的顯色劑僅供當(dāng)日使用。
⑥標(biāo)準(zhǔn)品:凍干標(biāo)準(zhǔn)品用稀釋用緩沖液(1×)重溶,重溶體積1000uL,得到濃度為600pg/mL標(biāo)準(zhǔn)品母液。輕輕震搖至少5分鐘,其充分溶解。每個(gè)稀釋管中加入300uL稀釋用緩沖液(1×)。將標(biāo)準(zhǔn)品母液參照下圖做系列稀釋,每管須充分混勻后再移液到下一管。沒有稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品母液可用作標(biāo)準(zhǔn)曲線最高點(diǎn)(600pg/mL),稀釋用緩沖液(1×)可用作標(biāo)準(zhǔn)曲線零點(diǎn)(0pg/mL)。


二、操作步驟
1. 準(zhǔn)備好所有需要的試劑和標(biāo)準(zhǔn)品;
2. 從已平衡至室溫的密封袋中取出微孔板,未用的板條請(qǐng)放回鋁箔袋內(nèi),重新封口;
3. 向微孔板中加入300uL洗滌液,靜置浸泡30秒,棄掉洗液在吸水紙上將微孔板拍干,請(qǐng)立即使用不要讓微孔板干燥;
4. 分別將不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品,實(shí)驗(yàn)樣本或者質(zhì)控品加入相應(yīng)孔中,每孔100uL。用封板膠紙封住反應(yīng)孔,室溫孵育2小時(shí);
5. 將板內(nèi)液體吸去,使用洗瓶、多通道洗板器或自動(dòng)洗板機(jī)洗板。每孔加洗滌液300uL,然后將板內(nèi)洗滌液吸去。重復(fù)操作3次。每次洗板盡量吸去殘留液體會(huì)有助于得到好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。最后一次洗板結(jié)束,請(qǐng)將板內(nèi)所有液體吸干或?qū)宓怪?,在吸水紙拍干所有殘留液體;
6. 在每個(gè)微孔內(nèi)加入100uL檢測(cè)抗體。用封板膠紙封住反應(yīng)孔,室溫孵育2小時(shí);
7. 重復(fù)第5步洗板操作;
8. 在每個(gè)微孔內(nèi)加入100uLSA-HRP,室溫孵育20分鐘。注意避光;
9. 重復(fù)第5步洗板操作;
10. 在每個(gè)微孔內(nèi)加入100uL顯色液,室溫孵育5-30分鐘,注意避光;
11. 在每個(gè)微孔內(nèi)加入50uL終止液,孔內(nèi)溶液顏色會(huì)從藍(lán)色變?yōu)辄S色。如果溶液顏色變?yōu)榫G色或者顏色變化不一致,請(qǐng)輕拍微孔板,使溶液混合均勻;
12. 加入終止液后30分鐘內(nèi),使用酶標(biāo)儀測(cè)量450nm的吸光度值,設(shè)定570nm或630nm作為校正波長。如果沒有使用雙波長校正,結(jié)果準(zhǔn)確度可能會(huì)受影響;
13. 計(jì)算結(jié)果:將每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的校正吸光度值(OD450-OD540或OD570)、復(fù)孔讀數(shù)取平均值,然后減去平均零標(biāo)準(zhǔn)品OD值。使用計(jì)算機(jī)軟件作四參數(shù)邏輯(4-PL)曲線擬合創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。另一種方法是,可以通過繪制標(biāo)準(zhǔn)品濃度做對(duì)數(shù)與相應(yīng)OD值對(duì)數(shù)生成曲線,并通過回歸分析確定最佳擬合線。這個(gè)過程可生成一個(gè)足夠使用但不太精確的數(shù)據(jù)擬合。若樣本經(jīng)過稀釋,計(jì)算濃度時(shí)應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。

Human IL-6 ELISA Kit

注:提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)僅供參考,應(yīng)根據(jù)同次試驗(yàn)所繪標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本含量。





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