Mouse Flt-3L ELISA Kit

Mouse Flt-3L ELISA Kit即小鼠 Fms 樣酪an酸激酶 3 配體（Flt-3L）酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒。

檢測(cè)原理

• 包被：將針對(duì)小鼠 Flt-3L 的特異性捕獲抗體預(yù)包被在酶標(biāo)板的孔壁上，形成固相抗體。

• 抗原抗體結(jié)合：加入待檢測(cè)的小鼠樣本，樣本中的 Flt-3L 會(huì)與固相化的捕獲抗體特異性結(jié)合。

• 形成夾心結(jié)構(gòu)：再加入生wu素標(biāo)記的檢測(cè)抗體，它能夠與已結(jié)合在捕獲抗體上的 Flt-3L 特異性結(jié)合，從而形成 “捕獲抗體 - Flt-3L - 生wu素化檢測(cè)抗體” 的夾心復(fù)合物。

• 酶結(jié)合：隨后加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的鏈霉親和素，鏈霉親和素與生wu素具有高度親和力，會(huì)特異性結(jié)合到生wu素化的檢測(cè)抗體上。

• 顯色與檢測(cè)：加入底物溶液，如四甲基聯(lián)苯胺（TMB），在 HRP 的催化作用下，TMB 發(fā)生顯色反應(yīng)，顏色由無(wú)色變?yōu)樗{(lán)色，顏色的深淺與樣本中 Flt-3L 的濃度成正比。最后加入終止液終止反應(yīng)，使用酶標(biāo)儀在特定波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度值，通過與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比，計(jì)算出樣本中 Flt-3L 的含量。

試劑盒組成

• 預(yù)包被板：一般為 96 孔或 48 孔聚苯乙烯板，表面已包被好捕獲抗體，為 Flt-3L 的結(jié)合提供固相載體。

• 標(biāo)準(zhǔn)品：一系列已知濃度的 Flt-3L 蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液，用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，通常濃度范圍覆蓋了試劑盒的檢測(cè)范圍。

• 檢測(cè)抗體：生wu素標(biāo)記的特異性抗體，可與 Flt-3L 特異性結(jié)合，用于檢測(cè)已與捕獲抗體結(jié)合的 Flt-3L。

• 酶結(jié)合物：通常是 HRP 標(biāo)記的鏈霉親和素，用于與生wu素化的檢測(cè)抗體結(jié)合，催化底物顯色反應(yīng)。

• 底物溶液：常用 TMB 溶液，在 HRP 的作用下發(fā)生顯色反應(yīng)，產(chǎn)生可檢測(cè)的信號(hào)。

• 終止液：如硫酸溶液，用于終止顯色反應(yīng)，使顏色穩(wěn)定以便于酶標(biāo)儀讀數(shù)。

• 洗滌緩沖液：用于洗滌酶標(biāo)板，去除未結(jié)合的物質(zhì)，減少非特異性信號(hào)。

• 稀釋液：用于稀釋樣本、標(biāo)準(zhǔn)品和檢測(cè)抗體等，使其達(dá)到合適的工作濃度。

適用樣本類型

• 血清：采集小鼠血液后自然凝固，離心后得到的上清液，可反映小鼠體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)中 Flt-3L 的水平。

• 血漿：使用抗凝劑采集小鼠血液，離心后獲得的上清液。不同抗凝劑可能對(duì)檢測(cè)結(jié)果有影響，需按試劑盒要求選擇。

• 細(xì)胞培養(yǎng)上清：培養(yǎng)小鼠細(xì)胞后收集的培養(yǎng)液，可用于檢測(cè)細(xì)胞分泌到細(xì)胞外的 Flt-3L。

• 組織勻漿：將小鼠組織經(jīng)過研磨等處理制成勻漿，離心后的上清液，可用于檢測(cè)組織中 Flt-3L 的表達(dá)情況。

性能指標(biāo)

• 靈敏度：一般可達(dá)到較低的檢測(cè)限，如某些試劑盒的靈敏度可達(dá)幾 pg/ml，能夠檢測(cè)到樣本中極低濃度的 Flt-3L。

• 檢測(cè)范圍：通常有一個(gè)較寬的檢測(cè)區(qū)間，例如 10 - 1000 pg/ml，以滿足不同樣本中 Flt-3L 含量的檢測(cè)需求。

• 精密度：包括板內(nèi)精密度和板間精密度，以變異系數(shù)（CV%）表示。優(yōu)質(zhì)的試劑盒板內(nèi) CV% 通常小于 10%，板間 CV% 小于 15%，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性和穩(wěn)定性。

• 特異性：試劑盒中的抗體對(duì)小鼠 Flt-3L 具有高度特異性，與其他類似蛋白或物質(zhì)的交叉反應(yīng)極低，確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確反映 Flt-3L 的含量。

應(yīng)用領(lǐng)域

• 血液學(xué)研究：在研究小鼠造血系統(tǒng)疾病如白血病、再生障礙性貧血等時(shí)，通過檢測(cè) Flt-3L 的水平，可了解造血微環(huán)境的變化以及造血干細(xì)胞的增殖分化狀態(tài)，為疾病的診斷和治療提供依據(jù)。

• 免疫學(xué)研究：在研究免疫細(xì)胞的發(fā)育和免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)時(shí)，F(xiàn)lt-3L 與樹突狀細(xì)胞等免疫細(xì)胞的發(fā)育和功能密切相關(guān)。使用該試劑盒檢測(cè) Flt-3L 含量，有助于深入了解免疫調(diào)節(jié)機(jī)制以及免疫相關(guān)疾病的發(fā)病機(jī)制。

• 腫瘤研究：在小鼠腫瘤模型中，F(xiàn)lt-3L 的表達(dá)與腫瘤的生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移和免疫逃逸等過程有關(guān)。檢測(cè)腫瘤組織或血清中的 Flt-3L 水平，可為腫瘤的治療和預(yù)后評(píng)估提供參考。