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動(dòng)物組織勻漿制備實(shí)驗(yàn)

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組織勻漿制備

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伊萊博生物科技(上海)有限公司,公司總部位于上海長(zhǎng)江軟件園。2024年1月與上海大學(xué)醫(yī)學(xué)院成立聯(lián)合研究中心,主要以生命科學(xué)研究為基礎(chǔ),專(zhuān)注于研究成果轉(zhuǎn)化及技術(shù)服務(wù)創(chuàng)新,建立了包含腫瘤生物學(xué)、病理學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、生物化學(xué)與分子生物學(xué)以及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)等學(xué)科的研究服務(wù)體系,為醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的發(fā)展做出了重要貢獻(xiàn)。


目前已建成并投入使用的實(shí)驗(yàn)室面積近2800平方米,包含基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)平臺(tái)、組學(xué)實(shí)驗(yàn)平臺(tái)以及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)平臺(tái),基本能夠滿(mǎn)足科研課題研究的全流程。


伊萊博生物擁有專(zhuān)業(yè)的技術(shù)支持和實(shí)驗(yàn)操作人員團(tuán)隊(duì),核心成員來(lái)自中科院、復(fù)旦、交大、同濟(jì)等國(guó)內(nèi)重點(diǎn)高校及科研機(jī)構(gòu),能夠提供前沿的、完善的實(shí)驗(yàn)技術(shù)咨詢(xún)與服務(wù)。


為了響應(yīng)國(guó)家大力發(fā)展基礎(chǔ)研究的號(hào)召,推動(dòng)實(shí)驗(yàn)科學(xué)領(lǐng)域的進(jìn)步,伊萊博生物充分利用積累多年的科研資源優(yōu)勢(shì),為廣大科研工作者提供實(shí)驗(yàn)技術(shù)培訓(xùn)服務(wù),從理論和實(shí)操兩個(gè)部分,培養(yǎng)其科研思維以及解決問(wèn)題的能力,為今后的科研工作奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。








免疫學(xué);ELISA試劑盒,抗體,生化試劑,相關(guān)試劑。原代細(xì)胞,傳代細(xì)胞,及培養(yǎng)試劑

應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

1、取組織塊(0.2g 1g)少可到2~5mg,在冰冷的生理鹽水中漂洗,除去血液,濾紙拭干,稱(chēng)
重,放入5或10m1的小燒杯內(nèi)
2、用移液管量取預(yù)冷的勻漿介質(zhì)或者用0. 86%冷生理鹽水,勻漿1 )質(zhì)或生理鹽水的體積總量應(yīng)該是組織塊重量的9倍,用移液管或移液器取總量的2/3的勻漿^質(zhì)或生理鹽水于燒杯中,用眼科小剪盡快剪碎組織塊(天然時(shí)操作要在冰水浴中進(jìn)行,將盛有組織的小燒杯放入冰水中)。

3、勻漿的方式有多種:手工勻漿、機(jī)器勻漿、超聲勻漿、反復(fù)凍融。
手工勻漿:將剪碎的組織倒入玻璃勻漿管中,再將剩余的1/3勻漿介質(zhì)或生理鹽水沖洗殘留在燒杯中的碎組織塊,一起倒入勻漿管中進(jìn)行勻漿,左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手將搗桿垂直插入套管中,上下轉(zhuǎn)動(dòng)研磨數(shù)十次(6~8分鐘) ,充分研碎,使組織勻漿化。
機(jī)器勻漿:用組織搗碎機(jī)10000~ 15000r /min上下研磨制成10%組織勻漿,也可用內(nèi)切式組織勻漿
機(jī)制備(勻漿時(shí)間10秒/次,間隙30秒,連續(xù)3~5次,在冰水中進(jìn)行) ,皮膚、肌肉組織等可延長(zhǎng)勻漿時(shí)間。
超聲粉碎:用超聲粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎,可用Soniprep150型超聲 波發(fā)生器以振幅14微米超聲處理30秒
使細(xì)胞破碎,也可用國(guó)產(chǎn)超聲波發(fā)生儀,用40安培,5秒/次,間隙10秒反復(fù)3~5次。反復(fù)凍融:培養(yǎng)或者分離的細(xì)胞可以用以上的方法勻漿,也可以反復(fù)凍溶3次左右(即讓細(xì)胞加適量的低滲液或者雙蒸水放低溫冰箱中結(jié)冰,溶解,再結(jié)冰,再溶解,反復(fù)3次左右) ,但有部分酶活力會(huì)受影響。取少量組織勻漿做涂片(直接涂片、染色均可),顯微鏡下觀察細(xì)胞是否磨破,若沒(méi)有破則可以延長(zhǎng)勻漿時(shí)間或增加凍融次數(shù)。
4、將制備好的10%勻漿用普通離心機(jī)或低溫低速離心機(jī)3000r /min左右離心10~15分鐘,若檢測(cè)
ATP酶,則只需要1000轉(zhuǎn)/分,離心5分鐘,將離心好的勻漿留下,上清棄下面沉淀。





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