人波形蛋白VIM試劑盒

人波形蛋白VIM試劑盒主要采用 ELISA、化學(xué)發(fā)光等方法，涵蓋抗體、標(biāo)準(zhǔn)品等試劑。適用血清等樣本，性能指標(biāo)佳，多品牌可選，廣泛用于腫瘤等疾病研究 。

檢測原理

1. 酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）法：最為常見。以雙抗體夾心 ELISA 為例，先將針對人 VIM 的特異性捕獲抗體包被在酶標(biāo)板孔壁。加入樣本后，樣本中的 VIM 與固相化捕獲抗體結(jié)合。再加入酶標(biāo)記（如辣根過氧化物酶 HRP）的檢測抗體，其與已結(jié)合的 VIM 形成 “捕獲抗體 - VIM - 酶標(biāo)檢測抗體” 夾心復(fù)合物。洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)后，加入底物（如四甲基聯(lián)苯胺 TMB）。在酶催化下，底物顯色，顏色深淺與樣本中 VIM 含量成正比，通過酶標(biāo)儀測吸光度并與標(biāo)準(zhǔn)曲線對比定量。

2. 化學(xué)發(fā)光免疫分析法：利用化學(xué)發(fā)光物質(zhì)（如吖啶酯、魯米諾等）標(biāo)記抗體。類似 ELISA，形成抗體 - 抗原 - 標(biāo)記抗體復(fù)合物。當(dāng)加入觸發(fā)發(fā)光的試劑后，標(biāo)記物發(fā)光，發(fā)光強(qiáng)度與 VIM 含量相關(guān)，通過發(fā)光檢測儀測量光信號(hào)實(shí)現(xiàn)定量，該法靈敏度高，檢測線性范圍寬。

3. 免疫比濁法：基于抗原抗體結(jié)合形成免疫復(fù)合物，使反應(yīng)液濁度改變。將抗人 VIM 抗體與樣本混合，VIM 與抗體結(jié)合形成不溶性復(fù)合物，溶液濁度增加，在特定波長下測吸光度變化，其與 VIM 濃度呈函數(shù)關(guān)系，從而計(jì)算樣本中 VIM 含量，操作相對簡便快速。

試劑盒組成

1. 抗體相關(guān)試劑：包含預(yù)包被的捕獲抗體（ELISA 法）或標(biāo)記抗體（化學(xué)發(fā)光法、免疫比濁法部分情況），以及配套的檢測抗體，均對人 VIM 有高度特異性和親和力。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品：一系列已知準(zhǔn)確濃度的人 VIM 蛋白溶液，用于構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線，為樣本定量提供參照。

3. 底物與顯色 / 發(fā)光試劑：ELISA 法中有 TMB 底物及終止液（如硫酸）；化學(xué)發(fā)光法配備相應(yīng)發(fā)光觸發(fā)試劑和底物；免疫比濁法無顯色相關(guān)，但可能有調(diào)節(jié)反應(yīng)環(huán)境、增強(qiáng)濁度變化的試劑。

4. 緩沖液與稀釋液：洗滌緩沖液用于洗板去除未結(jié)合物質(zhì)；樣本xi釋液用于調(diào)整樣本濃度至合適檢測范圍，還有用于稀釋抗體、標(biāo)準(zhǔn)品等的稀釋液。

5. 輔助材料：如酶標(biāo)板（ELISA、化學(xué)發(fā)光法）、反應(yīng)杯（免疫比濁法）、封板膜、說明書、操作指南等，指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)操作。

適用樣本類型

1. 血清：采集靜脈血自然凝固后離心所得上清，含循環(huán)系統(tǒng)中的 VIM，反映整體健康狀態(tài)及疾病相關(guān)變化，是常用樣本，采集方便，但可能含干擾物質(zhì)需注意處理。

2. 血漿：用抗凝劑（如 EDTA、肝素）采集血液離心獲得，與血清類似，但抗凝劑可能影響檢測，需按試劑盒要求選擇合適抗凝劑及處理方式。

3. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：培養(yǎng)人體細(xì)胞后收集的培養(yǎng)液，可檢測細(xì)胞分泌到胞外的 VIM，用于研究細(xì)胞功能及細(xì)胞間相互作用時(shí) VIM 的變化，需控制細(xì)胞培養(yǎng)條件一致性。

4. 組織勻漿：將人體組織經(jīng)研磨、勻漿處理后離心所得上清，能檢測組織內(nèi) VIM 含量，了解其在特定組織中的表達(dá)分布，組織取材要注意部位、大小及保存運(yùn)輸條件。

性能指標(biāo)

1. 靈敏度：指試劑盒能可靠檢測到的zui低 VIM 濃度。優(yōu)質(zhì)試劑盒靈敏度可達(dá)低至 pg/ml 級(jí)別，如某些 ELISA 試劑盒靈敏度為 5 pg/ml，利于檢測微量 VIM 變化，在疾病早期診斷、細(xì)胞生理研究中意義重大。

2. 檢測范圍：即能準(zhǔn)確測量 VIM 濃度的區(qū)間。常見范圍從幾十 pg/ml 到數(shù)千 pg/ml，如 50 - 2000 pg/ml，需覆蓋不同樣本中 VIM 可能的濃度范圍，確保各類樣本可準(zhǔn)確檢測。

3. 精密度：包括批內(nèi)精密度（同一批次試劑盒對同一樣本多次檢測結(jié)果的一致性）和批間精密度（不同批次試劑盒對同一樣本檢測結(jié)果的一致性），常用變異系數(shù)（CV%）表示。一般批內(nèi) CV% 應(yīng)小于 10%，批間 CV% 小于 15%，精密度高保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠、重復(fù)性好。

4. 特異性：試劑盒只對人 VIM 產(chǎn)生特異性反應(yīng)，與其他類似蛋白交叉反應(yīng)極低。理想情況下交叉反應(yīng)率小于 5%，確保檢測結(jié)果真實(shí)反映樣本中 VIM 含量，不受其他物質(zhì)干擾。