小鼠抗卵清蛋白lgG抗體(OVA lgG) ELISA試劑盒

過敏性疾病影響著近1/4的人口,其中3%-5%為食物過敏,被世界衛(wèi)生組織列為21世紀(jì)重點(diǎn)防治的三大疾病之一.2005年7月19日,美國國會(huì)通過一項(xiàng)"食品過敏源標(biāo)簽和消費(fèi)者保護(hù)法(FALCPA)"法案,要求食品生產(chǎn)商清楚地標(biāo)明該食品是否含有8種見的食品過敏原.而在檢驗(yàn)檢疫系統(tǒng)對(duì)進(jìn)出口的食品進(jìn)行常見的8大類過敏原(蛋,奶,大豆,花生,小麥,樹果,魚和貝類)檢測(cè),缺乏相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)和方法.本文致力于研究雞蛋和小麥過敏原的檢測(cè)方法,并為制定相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)提供理論依據(jù). 卵清蛋白是雞蛋的主要蛋白質(zhì),也是雞蛋的主要過敏原之一.本文制備了抗卵清蛋白單克隆抗體,建立了常見過敏原雞蛋卵清蛋白的ELISA檢測(cè)方法.以PBS溶解高純度卵清蛋白,免疫8周齡的BALB/c小鼠3次,直至效價(jià)達(dá)到10-5之后,再加強(qiáng)免疫1次,三天后取小鼠脾細(xì)胞與SP2/0骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)PEG融合,經(jīng)間接ELISA和有限稀釋法篩選,獲得了6株分泌抗卵清蛋白單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株,分別是OVA-1C6,OVA-2F9,OVA-2D8,OVA-2D2,OVA-3H6,OVA-3G9

小鼠抗卵清蛋白lgG抗體(OVA lgG) 

免疫耐受現(xiàn)象普遍存在于人類和高等動(dòng)物,有生理性和病理性兩種表現(xiàn)形式.根據(jù)免疫耐受形成機(jī)制不同,把免疫耐受分成中樞免疫耐受和外周免疫耐受.與臨床疾病密切相關(guān)的免疫耐受更多的涉及到外周免疫耐受的形成,維持及打破機(jī)制,因而外周免疫耐受是當(dāng)今免疫耐受研究領(lǐng)域的重點(diǎn).研究免疫耐受不僅對(duì)于弄清楚其形成機(jī)理,豐富免疫學(xué)理論有著重要的理論意義,同時(shí)研究結(jié)果也對(duì)治療與免疫耐受密切相關(guān)的疾病以及防止移植排斥反應(yīng)發(fā)生等有著重要的指導(dǎo)價(jià)值. 在外周免疫耐受研究領(lǐng)域,免疫耐受轉(zhuǎn)移的研究頗受關(guān)注.免疫耐受轉(zhuǎn)移的研究對(duì)于闡明參與免疫耐受的免疫細(xì)胞,免疫分子及其作用機(jī)理有重要的理論意義,尤其對(duì)于臨床用特異性手段和制劑防止移植排斥反應(yīng)發(fā)生有重要的應(yīng)用價(jià)值.經(jīng)過近年來大量研究,人們已經(jīng)在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)現(xiàn)了用細(xì)胞尤其是調(diào)節(jié)性T細(xì)胞轉(zhuǎn)移免疫耐受的目的.但在分子水平(非基因分子)能否實(shí)現(xiàn)免疫耐受的轉(zhuǎn)移,至今未見報(bào)道.本研究就這一問題進(jìn)行了初步探討. 本研究首先通過口服,注射兩種不同途徑建立卵清蛋白(ovalbumin, OVA)免疫耐受Balb/c小鼠模型,通過淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)以及ELISA,檢測(cè)OVA特異性T細(xì)胞克隆增殖效果以及抗OVA抗體效價(jià),以此評(píng)估免疫耐受效果,確定本實(shí)驗(yàn)室OVA免疫耐受模型鼠的建立方法;制備OVA免疫耐受Balb/c小鼠,摘取脾臟