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描述

Accutase 是包含蛋白水解酶和膠原酶活性的一種細(xì)胞消化液，不含任何動物和細(xì)菌來源組分。作為YI酶-EDTA 消化液的替換產(chǎn)品，用于從常規(guī)組織培養(yǎng)器皿、粘附包被培養(yǎng)器皿和聚合物上消化細(xì)胞。Accutase 比哺乳動物源的YI酶和膠原酶更加有效，因其所含活性成分濃度更低，對細(xì)胞傷害更小且更溫和，但能維持相同效力。Accutase在以下應(yīng)用的細(xì)胞消化表現(xiàn)極其優(yōu)秀，包括：連續(xù)性細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞表面標(biāo)記的分析、病毒生長實驗、細(xì)胞饑餓誘導(dǎo)的靜止分析、癌基因轉(zhuǎn)染的細(xì)胞轉(zhuǎn)化實驗、神經(jīng)嵴細(xì)胞遷移實驗、細(xì)胞增殖、細(xì)胞趨觸和腫瘤細(xì)胞遷移實驗。

本品為即用型的無菌溶液，溶于DPBS（含0.5mM EDTA 和3mg/L 酚紅），經(jīng)證實有效消化成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、神經(jīng)元、腫瘤細(xì)胞系、胚胎干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞和神經(jīng)干細(xì)胞。

使用方法

（1）于4℃或冰水浴融化Accutase【勿于37℃融化】；

（2）吸掉培養(yǎng)基，用不含鈣鎂的1X DPBS 清洗細(xì)胞一次；

（3）加入適量的Accutase 消化液覆蓋細(xì)胞【典型情況按照細(xì)胞匯合度，加入2.5-5ml 到T25 培養(yǎng)瓶足以】；

（4）37℃或室溫條件允許細(xì)胞消化5-10min，或直至細(xì)胞*消化?！鞠^程中經(jīng)常觀察，判斷細(xì)胞粘附在固相表面的同時是否變圓，并不僅僅是發(fā)生收縮或不再呈突觸狀。使用Accutase 消化細(xì)胞高達(dá)1h，不會造成細(xì)胞傷害】

（5） 一旦細(xì)胞變成球狀，輕拍培養(yǎng)瓶或皿以讓粘附細(xì)胞*脫落。

（6）細(xì)胞計數(shù)，之后用新鮮培養(yǎng)液重懸繼續(xù)培養(yǎng)，或者收集細(xì)胞用作其他用途?！静恍枇碜銮逑春兔富罱K止步驟】