人單核細(xì)胞誘導(dǎo)DC培養(yǎng)基
- 公司名稱 江蘇樂賽生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2022/7/18 16:06:53
- 訪問次數(shù) 434
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1 kit |
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貨號(hào) | CS-20003-100 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 |
人單核細(xì)胞誘導(dǎo)DC培養(yǎng)基是為在體外培養(yǎng)和誘導(dǎo)人單核細(xì)胞向成熟CD1c+cDC2樹突狀細(xì)胞(DC)亞群分化發(fā)育而專門設(shè)計(jì)的一款含血清培養(yǎng)基套裝。該培養(yǎng)試劑盒可在7天內(nèi)誘導(dǎo)人cDC2(CD11c+ HLA-DR+ CD1c+CD14-)亞群產(chǎn)生,是研究人cDC2分化發(fā)育和功能、以及產(chǎn)生人DC疫苗的重要培養(yǎng)系統(tǒng)。人單核細(xì)胞誘導(dǎo)DC培養(yǎng)基
產(chǎn)品特點(diǎn)
針對(duì)人單核細(xì)胞向成熟CD1c+cDC2樹突狀細(xì)胞(DC)亞群分化發(fā)育而設(shè)計(jì),
產(chǎn)品成分
產(chǎn)品名稱 | Catlog# | 規(guī)格 | 儲(chǔ)存條件 |
人單核細(xì)胞誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒 | CS-20003-100 | 1 kit | |
人單核細(xì)胞誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | CS-20003-B | 100ml | 4℃ |
人單核細(xì)胞誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞分化補(bǔ)充因子 | CS-20003-DES | 0.5ml | -20℃ |
人單核細(xì)胞誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞成熟補(bǔ)充因子 | CS-20003-MTS | 0.5ml | -20℃ |
預(yù)篩選樹突狀細(xì)胞專用胎牛血清 | CS-DCF-10 | 10ml | -20℃ |
其他本試劑盒未提供但需用的重要試劑
人CD14+單核細(xì)胞磁珠分選試劑
*培養(yǎng)基配制
(在無菌生物安全柜中,開展以下操作)
1.在4度冰箱解凍補(bǔ)充因子和胎牛血清,混勻后使用。
注:解凍后的補(bǔ)充因子和血清可放置于4 oC冰箱,在1個(gè)月內(nèi)使用;或者分裝至合適體積后,保存于-20℃冰箱,不可反復(fù)凍融!2.分化培養(yǎng)基配制:將1體積的分化補(bǔ)充因子和10體積的血清加入到89體積的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,充分混勻,得到人cDC2樹突狀細(xì)胞分化培養(yǎng)基。如取100ul補(bǔ)充因子和1ml血清加入至8.9ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基,以此類推。
成熟培養(yǎng)基配制:將1體積的成熟補(bǔ)充因子和10體積的血清加入到89體積的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,充分混勻,得到人cDC2樹突狀細(xì)胞成熟培養(yǎng)基。
注:配好的*培養(yǎng)基請(qǐng)于4℃保存,且于1個(gè)月內(nèi)使用完畢。使用說明
(請(qǐng)?jiān)敿?xì)閱讀使用說明后再開始相關(guān)實(shí)驗(yàn))
1.使用磁珠分選人外周血單個(gè)核細(xì)胞中單核細(xì)胞(參考所使用試劑盒的說明書),計(jì)數(shù)。
注:健康供體每1ml外周血中約含有1-3*10^5單核細(xì)胞。2.D0:使用分化培養(yǎng)基重懸單核細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞密度至1*10^6/ml,按照如下表格所示將細(xì)胞鋪于培養(yǎng)板:
培養(yǎng)板 | *培養(yǎng)基體積 | 單核細(xì)胞數(shù)/孔 |
24孔板 | 1.0ml | 1.0*10^6 |
6孔板 | 4.0ml | 4.0*10^6 |
3.將培養(yǎng)板置于細(xì)胞培養(yǎng)箱,37℃,5%CO2,靜置培養(yǎng)。
4.D3:半量換液。小心貼培養(yǎng)板側(cè)壁用槍尖吸走1/2體積舊培養(yǎng)基,補(bǔ)充加入新鮮分化培養(yǎng)基至初始培養(yǎng)體積(步驟2表格)。
注:*培養(yǎng)基請(qǐng)恢復(fù)至室溫后使用,減少對(duì)細(xì)胞的刺激。5.D5:誘導(dǎo)成熟。小心貼培養(yǎng)板側(cè)壁用槍尖吸走1/2體積舊培養(yǎng)基,補(bǔ)充加入新鮮成熟培養(yǎng)基至初始培養(yǎng)體積(步驟2表格)。
6.D7:輕輕吹打細(xì)胞,收集懸浮細(xì)胞,即為分化成熟的人CD1c+cDC2,可進(jìn)行后續(xù)操作和分析。
注:如需研究特定刺激對(duì)DC的影響,可提前加入相應(yīng)刺激,待D7收集細(xì)胞進(jìn)行分析。數(shù)據(jù)展示
圖:人單核細(xì)胞誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞培養(yǎng)鑒定。磁珠分選的人單核細(xì)胞按照上述說明培養(yǎng),至第6天時(shí),加入100ng/ml LPS刺激,第7天收集懸浮細(xì)胞進(jìn)行流式染色分析。