一、服務簡介

      支原體是細胞污染物中比較常見的一種，細胞受支原體污染程度較輕時，不會表現出明顯的癥狀，但一旦這種潛伏的污染爆發(fā)時，細胞培養(yǎng)液會變渾濁。原代細胞和傳代細胞都可能遭受支原體污染，根據國外不同實驗室的調查結果顯示，有15%-80%的細胞系被支原體污染，傳代細胞的污染率高于原代細胞。

      細胞系是生物醫(yī)學研究中重要的工具，在細胞質量控制相關的問題中，細胞系交叉污染和微生物支原體污染是其中常見的質量問題。交叉污染分為種屬間的交叉污染、種內不同細胞系的交叉污染。2002年(Drexler et al., 2002)對440個白血病-淋巴細胞系進行分析后發(fā)現，只有64%的細胞身份正確且支原體陰性，在交叉污染的細胞系中有50%為支原體陽性，23%的真實細胞系也有支原體陽性。

      目前行業(yè)基本都是對細胞或細胞制品進行質控是否有支原體污染，而對具體污染的什么種類支原體很少做探究。從質量管理體系的角度來說，如果能夠進一步弄清楚污染的支原體種類，有利于支原體污染溯源，通過分析污染來源及可能途徑，進一步完善質量體系，加強管控，降低支原體污染的發(fā)生概率。

      我公司CELL STR ID®支原體分型檢測體系,在充分分析各類支原體的16SDNA序列基礎上,設計了針對支原體的特異引物探針，同時通過不同支原體的特異片段長度差異進行區(qū)分。為了實現這一目的，利用多重熒光PCR和毛細管電泳技術，實現對支原體的高靈敏度檢測及不同種類的支原體進行有效區(qū)分。

二、服務內容

（一）服務流程

（二）服務特點

      1．采用多重熒光PCR支原體擴增試劑盒進行多重擴增；擴增產物經ABI3130XL基因分析儀進行檢測。

      2．靈敏度高。可以鑒別細胞樣本中含有的少量支原體污染，檢測線為皮克級：30pg/μL。

      3．檢測結果不僅可以是否有無支原體污染，同時可知其中8種支原體是那種支原體污染；隨著科研技術的發(fā)展，根據需要單獨列出的支原體會有所增加。

      4．鑒定報告中文版或中英版（自選），以及圖譜（見支原體分型檢測圖譜）。

（三）注意事項

      1．樣品寄送：用戶提供DNA或細胞 樣本，加冰袋運輸；同時請注明細胞數量或DNA含量，DNA 含量大于50ng/μl，體積大于20μl。如提供細胞，請?zhí)峁㏄BS細胞懸浮液，離心沉淀，去上清液，可常溫特快專遞運輸（京外客戶推薦方法）；細胞數量≥10⁶個。

      2．正常檢測周期5-7個工作日，加急2-3個工作日。

（四）結果交付

      檢測結果以電子版的形式發(fā)放到訂單或合同上面預留的郵箱，書面報告可根據需要隨時提供，寄送到貴單位。

三、支原體分型檢測圖譜及參考文獻 

參考文獻：

4.1、Mycoplasma contamination of cell cultures: Incidence, sources, effects,detection, elimination, prevention。Cytotechnology 39: 75–90, 2002

4.2  Advances in PCR-based detection of mycoplasmas contaminating cell cultures. PCR Methods         Appl 4: 199–208     Rawadi G and Dussurget O (1995)