12645ES60 ssDNA Assay Kit
參考價 | ¥ 1315 |
訂貨量 | ≥1件 |
- 公司名稱 翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 品牌 Yeasen/翌圣生物
- 型號 12645ES60
- 產(chǎn)地 上海
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2023/7/21 0:01:03
- 訪問次數(shù) 345
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號 | 12645ES60 |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品描述
ssDNA Assay Kit 是一種簡便、靈敏、精確的單鏈 DNA(ssDNA)熒光定量檢測試劑盒,在 1~200 ng 區(qū)間具有良好的線性關(guān)系。本試劑盒包含熒光檢測試劑、緩沖液及相關(guān)的 ssDNA 標(biāo)準(zhǔn)品,使用前先將熒光檢測試劑用緩沖液稀釋成工作液,然后加入待測 ssDNA 樣品,即可使用熒光酶標(biāo)儀或 Qubit熒光儀進(jìn)行讀數(shù)。試劑盒對單鏈 DNA 的選擇度并不高于雙鏈DNA,但它對常規(guī)的污染物如蛋白質(zhì)、鹽類物質(zhì)、洗滌劑等具有較好的耐受性。
產(chǎn)品組分
編號 | 組分名稱 | 濃度 | 12645ES60 | 12645ES76 |
12645-A | ssDNA Reagent | 200× in DMSO | 250 μL | 1.25 mL |
12645-B | ssDNA Buffer | Not applicable | 50 mL | 250ml |
12645-C | ssDNA Standard 1 | 0 ng/μL in TE buffer | 1 mL | 5×1 mL |
12645-D | ssDNA Standard 2 | 20 ng/μL in TE buffer | 1 mL | 5×1 mL |
運輸和保存
冰袋運輸,2-8℃避光保存,有效期1年,請注意避免反復(fù)凍融。
注意事項
特別注意:ssDNA Reagent在2-8℃儲存條件下為結(jié)冰狀態(tài),使用時提前放置室溫解凍,務(wù)必確認(rèn)溶解,充分混勻后再使用;若有沉淀物,可將該試劑至于 37℃水浴鍋中溫育, 并輕柔混勻直到沉淀物溶解;
試劑盒對單鏈 DNA 的選擇度并不高于雙鏈DNA,待檢樣品應(yīng)避免雙鏈DNA污染;
檢測試劑ssDNA Buffer略起泡,使用時輕柔震蕩或顛倒混勻,避免劇烈震蕩;
熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅;
對于檢測試劑和ssDNA標(biāo)準(zhǔn)品,每次使用前輕柔震蕩或上下顛倒數(shù)次后瞬時離心數(shù)秒(請勿渦旋振蕩);
為保證定量結(jié)果的精確,請使用校準(zhǔn)后的移液器操作,樣品濃度較低時請增大待測樣品投入體積;
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作;
本產(chǎn)品僅用作科研用途!
實驗步驟
使用Qubit熒光儀進(jìn)行ssDNA定量檢測分析
實驗準(zhǔn)備
使用前,將試劑盒中的各組分恢復(fù)至室溫(室溫放置約半小時),檢查ssDNA Reagent(組分A)是否有沉淀,若有沉淀物,可將該試劑至于37℃水浴鍋中溫育,并輕柔混勻直至沉淀物溶解;
準(zhǔn)備足夠量0.5 mL PCR薄壁管并標(biāo)注。請勿在PCR管側(cè)壁標(biāo)注,以免影響熒光信號采集。推薦使用本公司Qubit專用檢測管(貨號83509ES)
配制檢測工作液在避光塑料容器中,使用ssDNA Buffer按比例將適量ssDNA Reagent稀釋至1×(例:取1 μL ssDNA Reagent,加入199 μL ssDNA Buffer),上下顛倒混勻。工作液現(xiàn)用現(xiàn)配,每次配制檢測工作液時要使用潔凈的容器;
配制待檢樣品
配制待檢標(biāo)準(zhǔn)品1和標(biāo)準(zhǔn)品2:取190 μL檢測工作液至標(biāo)準(zhǔn)品PCR管中,分別加入10 μL ssDNA Standard 1和ssDNA Standard 2至相應(yīng)標(biāo)記的標(biāo)準(zhǔn)品PCR管中,輕柔渦旋振蕩2-3 sec,盡量避免氣泡產(chǎn)生,瞬時離心數(shù)秒;
配制待檢樣品:取180-199 μL檢測工作液至樣本PCR管中,分別加入20-1 μL待檢樣本,使PCR管中每個樣本終體積為200 μL,輕輕渦旋振蕩2-3 sec,盡量避免氣泡產(chǎn)生;
檢測
將所有待檢PCR管置于室溫避光孵育2 min;瞬離收集管壁上液體。
按照Qubit熒光儀的操作說明,選擇ssDNA檢測程序,使用待檢標(biāo)準(zhǔn)品校正熒光曲線后進(jìn)行待檢樣品的濃度測定。
附表1
污染物對ssDNA定量檢測試劑盒檢測結(jié)果的影響
污染物 | 樣品檢測時濃度 | 10 µL樣品中的濃度 | 檢測結(jié)果 |
Proteins | |||
牛血清白蛋白 | 50 mg/mL | 1 mg/mL | OK |
Salts | |||
氯化鈉 | 2.5 mM | 50 mM | OK |
氯化鎂 | 0.1 mM | 2 mM | OK |
醋酸鈉 | 1 mM | 20 mM | OK |
醋酸銨 | 1 mM | 20 mM | OK |
Organic Solvents | |||
乙醇 | 0.5% | 10% | OK |
氯仿 | 0.1% | 2% | OK |
benfen | 0.01% | 0.2% | OK |
Detergents | |||
Triton X-100 | 0.005% | 0.1% | OK |
HB230412