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Prominence nano 納升液相色譜儀

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廣州領拓(L-Victor)成立于2009年, 是一家致力于材料測試儀器儀表領域,并提供失效分析和可靠性分析整體解決方案的企業(yè)。公司秉承著“以誠信為準,以質量為勝,以客戶*”的經營理念,為客戶提供材料失效分析測試方案、材料物性測試分析方案、材料微觀檢測分析方案、材料測試領域品牌產品設備、材料測試領域的經驗知識共享與交流,以及售前技術咨詢、售中合理化方案和售后標準化服務等一整套完善的服務支持,從而大限度的滿足用戶的需求。

領拓代理的產品有:美國Buehler,美國Wilson,德國Leica,Carbolite*Gero,德國Eltra,德國Retsch,德國Microtrac MRB,加拿大Creaform,德國Memmert,韓國EM科特,荷蘭TQC等品牌,擁有50年以上的生產及應用經驗。

領拓擁有設備齊全的實驗室和強大的應用團隊,應用工程師均為材料科班出身,兼具豐富的實踐經驗,必能為您提供應用解決方案。領拓展示出豐富的技術經驗和可靠的商業(yè)信用,一直在業(yè)界內享有很高的美譽。

領拓業(yè)務立足于華南,發(fā)展到西南,影響著全國。客戶包括事業(yè)單位、科研院校及眾多領域企業(yè),客戶群體涉及的行業(yè)包括鋼鐵、汽車、五金、PCB、電子、塑膠、玻璃、晶體、航天航空、新能源、制藥、電廠等等。

領譽同行,拓展未來——領拓將持續(xù)以雄厚的實力,重信用、守合同、保質量的決心,向廣大客戶提供優(yōu)質的服務和完備的解決方案。
(地址:中國廣州市番禺大道北555號天安科技園總部6號樓)






儀器和消耗品

基本性能

納升流速傳感器可保證精確的納升溶劑傳輸

LC-20AD nano采用了新的RFC技術,可對每一個泵進行獨立的流速控制,在納升流速下保證好的流量精度。RFC系統(tǒng)是由高精度的納升流速感應器控制,確保在任何時間精準的流速測量。同時,流量傳感器配置了精確的溫度控制機制,以減少不確定的環(huán)境因素對溶劑輸送的影響。LC-20AD nano在梯度分析能保證很好的流速穩(wěn)定性,在300nL/min時候保留時間重復性的RSD小于0.2%。

RFC系統(tǒng)的原理

泵內配置了一個流速傳感器,可持續(xù)監(jiān)測泵輸出的納升流速。為了保證流速在設定的范圍內,采用反饋控制模式,傳感器的監(jiān)測到真實流速后可以自動調整分流比例,從而保證流速的準確性。另外,分流后的流動相在混合前就經過回流管路回到溶劑瓶,不會浪費溶液。

低溶劑消耗

RFC系統(tǒng)可確保每個泵輸出的溶劑分流后又回到流動相瓶中。就算在高壓梯度分析中,兩種溶劑在分離后并不會像廢棄物一樣排出,從而降低溶劑消耗并減少對環(huán)境的影響。

FCV納升閥,低死體積


FCV nano

FCV納升閥體積為25nL,在納升范圍內幾乎不會展寬。在納升LC使用捕集柱進樣和二維系統(tǒng)中,F(xiàn)CV 納升閥是的。FCV 納升閥通過使用強化的定子和聚醚醚酮的轉子,可以大大降低樣品的吸附,同時獲得很好的耐用性。


高靈敏度分析


SIL-20AC

SIL-20AC的直接進樣功能與FCV納升閥的低擴射性能相結合可實現(xiàn)微量體積樣品的進樣分析。FCV納升閥后連接的捕集柱可以對進樣的樣品進行捕集濃縮,從而實現(xiàn)高靈敏度分析。而且,SIL-20AC被為交叉污染的自動進樣器,這些特征都可以滿足高靈敏度MS分析的要求。

輔助控制軟件

2維LC的輔助控制軟件

輔助控制軟件可對2維LC進行便捷設置,在軟件圖形界面上可輕松對2維HPLC的進行復雜梯度編程,設定流速等,然后生成方法文件并下載至儀器中進行控制,而圖形化的流路圖和梯度曲線代表當前狀態(tài)。簡便的設置可避免單獨使用LC控制軟件帶來的一系列的操作問題。

Prominence nano 2D系統(tǒng)在線的結合了離子交換和反向色譜模式(如下圖所示),每種色譜模式都獨立運行,兩種模式的結合可進行的分離。Prominence nano 2D系統(tǒng)可與配備Nano ESI源的LCMS系統(tǒng)聯(lián)用進行濕法蛋白組學分析,也可以與點靶儀和MALDI-TOF質譜聯(lián)用進行干法蛋白組學分析。

易操作的一維體系



1D 納升LC系統(tǒng)對于確認SDS PAGE分離前的蛋白質十分有效,1D系統(tǒng)只需要非常簡單的操作就可以實現(xiàn)。當然,輔助控制軟件在1D和2D系統(tǒng)中使用都是十分方便的。


Nano-Assist一維LC設置圖

應用

高保留時間重復性

蛋白質組分析需要比較不同樣本的色譜峰差異,而樣本中又存在許多特征相似的多肽,對保留時間的重復性要求非常高。Prominence nano系統(tǒng)的高重復性可保證蛋白質組分析的高精數(shù)據(jù),配置了RFC系統(tǒng)的LC-20AD nano可以在流速為300 nL/min獲得RSD不超過0.2% 的保留時間重復性。


牛血清白蛋白(BSA)酶解樣品的重復性

2維 LC的高分辨率


牛血清白蛋白(BSA)酶解樣品的重復性

在蛋白質組學分析時,單一的1D反相分離不足以提供足夠的色譜峰容量;所以,為了實現(xiàn)復雜樣品的分離,需要進行2D分離以保證足夠的峰容量。Prominence nano系統(tǒng)可以進行2D分析,結合陽離子交換和反相模式,為蛋白質組學分析提供所需的核心技術。下圖為200fmol酵母蛋白質的分析圖,1D分離中的未分離組分在2D中繼續(xù)分離成幾個組分,2D分離的峰容量大大大于1D所獲得的效果。

分析條件

1維

PolysulfoethylA (50mmL.×1mmI.D.)

流動相

甲酸銨緩沖液
濃度STEP梯度

流速

 40 nL/min

捕集柱

(5 mmL.×300 ?m I.D.)
L-column (micro)

捕集時長

5分鐘

脫鹽溶劑

水/蟻酸=100/0.1

脫鹽流速

L/min

脫鹽時長

5分鐘

2維

PicoFrit (100 mmL.×75 ?m I.D.)

流動相

梯度洗脫
A)水/乙腈/蟻酸=98/2/0.1(v/v)  B) 水/乙腈/蟻酸=5/95/0.1(v/v)

流速

600nL/min

溫度

溫度

檢測

LCMS-IT-TOF

樣本

酵母蛋白中的蛋白
(相當于200 fmol的)

* 分別利用1維和2維中不同類型的柱體進行其他組合的分離模式也是可行的。在這種情況下,分離或檢測方法由于使用的移動相分離模式或類型之間的相互作用,可能會有一些限制。

連接MALDI-TOFMS使用

Prominence nano系統(tǒng)不僅僅可以通過nano ESI接口連接LCMS使用,還可連接到配有自動點靶儀的MALDI-TOFMS儀器。為了準確分析MALDI靶的每個色譜峰,需要LC能夠在1nL到1µL范圍之內精確控制流速,Prominence nano系統(tǒng)的滿足了此需要。


酶解BSA樣品的UV色譜圖(500fmol)

分析條件

檢測器

UV220 nm

MonoCap for Fast-flow 快速MonoCap
 (250 mmL. × 100 µm I.D.)

流動相

1、水/乙腈/蟻酸=98/2/0.1(v/v)  B) 水/乙腈/蟻酸=5/95/0.1(v/v)
2、梯度洗脫

流速

1 µL/min

溫度

環(huán)境溫度

捕捉柱

ODS (1 mmL. × 0.5 mm I.D.)

點靶間隔

12 秒的點斷
每點液體:200nL(不包括基質)

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