小鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞
| 參考價 | ￥2600-￥6000/件 |
- 公司名稱 上海一研生物科技有限公司
- 品牌其他品牌
- 型號
- 所在地上海市
- 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
- 更新時間2024/12/7 9:47:12
- 訪問次數(shù) 764
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | EY-XY3780 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 生長特性 | 貼壁生長 |
| 細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | 組織來源 | 肺動脈 |
| 種屬來源 | 小鼠 |
收貨處理取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)
傳代密度細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4.待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 貨號 | EY-XY3780 |
英文名稱 | Pulmonary Arterial Endothelial Cells | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質(zhì)量檢測：血管假性血友病因子（vWF）免疫熒光染色為陽性，純度高于 90%，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等
產(chǎn)品規(guī)格：5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基：小鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
換液頻率：每2-3天換液一次
消化液：0.25%
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨，1周左右
運(yùn)輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞（包郵）
供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
小鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，小鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自肺大動脈組織；肺動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞是一種多功能細(xì)胞，尤其在肺的非呼吸功能方面更具特殊意義。當(dāng)其受損，肺血管通透性升高導(dǎo)致肺水腫，在成年人呼吸窘迫綜合癥發(fā)生機(jī)制中具有重要意義。但是處于體內(nèi)多因素共同作用的復(fù)雜環(huán)境中，對肺血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能和代謝以及病變發(fā)生機(jī)制很難作深入研究。原代肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)系統(tǒng)有助于在特定的體外條件下研究肺血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能。 |
1.準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。
3.處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30~60分鐘。
4.剪切：用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊，以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的液，然后一并倒入三角燒瓶中，結(jié)扎瓶口或塞以膠塞。
5.消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6.分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500~1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7.計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細(xì)胞來說，pH要求在7.2~7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。
8.培養(yǎng)：置于36.5℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶蓋需擰松半圈。
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