供貨周期 | 一周 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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【產(chǎn)品名稱】
革蘭染色液
【包裝規(guī)格】
單瓶(桶)包裝規(guī)格為:20ml、50ml、100ml、250ml、500ml、1L、5L
每盒(箱)包裝規(guī)格為:4×20ml/盒、4×50ml/盒、4×100ml/盒、4×250ml/盒、4×500ml/盒、4×1L/箱、4×5L/箱
【預(yù)期用途】
用于細(xì)菌或真菌的涂片染色
【檢驗(yàn)原理】
革蘭染色法,由丹麥病理學(xué)家Christain Gram于1884年創(chuàng)立,是細(xì)菌學(xué)中很重要的鑒別染色法。通過此法染色,可將細(xì)菌鑒別為革蘭陽性菌(G+)和革蘭陰性菌(G-)兩大類。細(xì)菌的不同顯色反應(yīng)是由于細(xì)胞壁對乙醇的通透性和抗脫色能力的差異,主要是肽聚糖層厚度和結(jié)構(gòu)決定的。經(jīng)結(jié)晶紫染色的細(xì)胞用碘液處理后形成不溶性復(fù)合物,乙醇能使它溶解,所以染色的前二步結(jié)果是一樣的,但在G+細(xì)胞中,乙醇還能使厚的肽聚糖層脫水,導(dǎo)致孔隙變小,由于結(jié)晶紫和碘的復(fù)合物分子太大,不能通過細(xì)胞壁,保持著紫色。在Gˉ細(xì)胞中,乙醇處理不但破壞了胞壁外膜,還可能損傷肽聚糖層和細(xì)胞質(zhì)膜,于是被乙醇溶解的結(jié)晶紫和碘的復(fù)合物從細(xì)胞中滲漏出來,當(dāng)再用襯托的染色液復(fù)染時(shí),顯現(xiàn)紅色。紅色染料雖然也能進(jìn)入已染成紫色的G+細(xì)胞,但被紫色蓋沒,紅色顯示不出來。
【主要組成成分】
試劑組成 | 主要成分 |
結(jié)晶紫染色液 | / |
碘溶液 | / |
脫色液 | / |
沙黃染色液或復(fù)紅染色液 | / |
【儲(chǔ)存條件及有效期】
0℃-35℃儲(chǔ)存,原包裝未開封染色液的有效期為24個(gè)月,在有效期內(nèi)的已開封染色液在開封后6個(gè)月內(nèi)使用完,每次用后應(yīng)及時(shí)擰緊瓶蓋,以免揮發(fā)或變質(zhì)。
【樣本要求】
涂片時(shí)必須注意細(xì)心操作,涂片薄而均勻。制備的涂片應(yīng)自然干燥,采用加熱固定時(shí),固定溫度不宜過高,以背面接觸手背不燙為準(zhǔn),否則可能使細(xì)菌形態(tài)改變影響觀察結(jié)果。
【檢驗(yàn)方法】
1.涂片:取待檢細(xì)菌,于載玻片中部涂成薄層或在載玻片上滴如少許無菌水,取菌與水混合均勻,涂成一薄層;
2.干燥、固定:涂片后在室溫下自然干燥,也可在酒精燈上略加溫,使之迅速干燥,也可以用甲醇或乙醇固定;
3.初染:滴加結(jié)品紫染色液染色0.5~1.5分鐘,水洗,甩干;
4.媒染:滿加碘溶液覆蓋載玻片0.5~1.5分鐘,水洗,甩干;
5.脫色:滴加脫色液搖動(dòng)10~30秒,直至流下的脫色液不出現(xiàn)紫色時(shí)為止,立即用水沖去脫色液,甩干;
6.復(fù)染:滴加沙黃染色液或復(fù)紅染色液染色20~60s,水洗;
7.濾紙吸干或在空氣晾干,鏡檢。
【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
革蘭氏陽性菌呈藍(lán)色至紫色,革蘭氏陰性菌呈紅色。