14321ES 超潔凈高穩(wěn)定性Taq DNA聚合酶
參考價(jià) | ¥2325.00 |
- 公司名稱(chēng) 翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 品牌Yeasen/翌圣生物
- 型號(hào)14321ES
- 所在地上海市
- 廠商性質(zhì)生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間2025/3/10 8:52:28
- 訪問(wèn)次數(shù) 16
1000 U | 2325.00元 | 99 件可售 |
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本產(chǎn)品是一款采用公司自主研制的雙抗體進(jìn)行雙封閉的熱啟動(dòng)DNA聚合酶,不僅封閉了Taq DNA聚合酶5'→3'聚合酶活性,同時(shí)也封閉了5'→3'核酸外切酶活性。在預(yù)變性溫度下加熱30 sec封閉抗體即可失活,釋放出 DNA 聚合酶活性和核酸外切酶活性。雙封閉特性不僅能有效防止錯(cuò)配或引物二聚體引起的非特異性擴(kuò)增,又能有效抑制探針降解產(chǎn)生的熒光信號(hào)下降,雙重保障使體外檢測(cè)試劑在運(yùn)輸或室溫使用過(guò)程中更加穩(wěn)定。
此外,該產(chǎn)品經(jīng)過(guò)翌圣生物 UCF.ME®超低殘留工藝處理,產(chǎn)品中核酸酶、宿主gDNA等殘留極低,搭配優(yōu)化的緩沖體系(如 Cat#16716ES),可有效減少混樣、體系升溫階段以及長(zhǎng)期儲(chǔ)存過(guò)程中引物探針互搭引起的非特異性擴(kuò)增,支持引物探針提前預(yù)混的熒光定量PCR體系的開(kāi)發(fā)。
產(chǎn)品信息
貨號(hào) | 14321ES76 / 14321ES80 / 14321ES92 / 14321ES93 |
規(guī)格 | 1000 U / 10000 U / 25000 U / 100000 U |
組分信息
組分編號(hào) | 組分名稱(chēng) | 14321ES76 (1000 U) | 14321ES80 (10000 U) | 14321ES92 (25000 U) | 14321ES93 (100000 U) |
14321 | UCF.ME® Advanced Hotstart Taq (20 U/μL) | 50 μL | 500 μL | 1.25 mL | 5 mL |
儲(chǔ)存條件
-25~-15℃保存,有效期2年。
使用說(shuō)明
反應(yīng)體系(以25 μL和50 μL為例)
貨號(hào) | 組分名稱(chēng) | 體積(μL) | 體積(μL) |
16716-A | 5× PCR Buffer | 5 | 10 |
16716-B | MgCl2(250 mM) | 0.35 | 0.7 |
16716-C | dNTP Mix(25 mM each) | 0.25 | 0.5 |
14321 | UCF.ME® Advanced Hotstart Taq (20 U/μL) | 0.15 | 0.3 |
/ | Primer(10 μM) | 0.4 | 0.8 |
/ | Probe Mix (10 μM) | 0.2 | 0.4 |
/ | 模板 DNA | 1-20 | 1-30 |
/ | RNase Free H2O | to 25μL | to 50 μL |
【注】使用前務(wù)必充分混勻,避免劇烈震蕩產(chǎn)生過(guò)多氣泡。
a). dNTP濃度:建議dNTP終濃度為0.2 - 0.5 mM,如有特殊需求,可用25 mM each dNTP Mix以0.05 - 0.1 mM為間隔上下摸索dNTP的最佳使用濃度。
b). MgCl2濃度: 建議Mg 2+終濃度為1.5 - 5 mM,如有特殊需求,可用250 mM MgCl2以0.2 - 0.5 mM為間隔上下摸索Mg 2+的最佳使用濃度。
c). 引物濃度:Primer Mix 中包含多對(duì)引物,通常每條引物終濃度可以根據(jù)情況在 0.1-1.0 μM 間進(jìn)行調(diào)整。
d). 探針濃度:Probe Mix中包含多條不同熒光信號(hào)的探針,每條探針的濃度可根據(jù)具體情況在50-300 nM間調(diào)整。
e). 模板稀釋?zhuān)?/span>qPCR靈敏度高,建議將模板進(jìn)行稀釋使用,控制Ct值在20-35之間適宜。
f). 反應(yīng)體系:推薦使用25 μL或50 μL,以保證目的基因擴(kuò)增的有效性和重復(fù)性。
g). 體系配制:請(qǐng)于超凈工作臺(tái)內(nèi)配制,并使用無(wú)核酸酶殘留的槍頭、反應(yīng)管;推薦使用帶濾芯的槍頭;避免交叉污染和氣溶膠污染。
參考擴(kuò)增程序
2.1 標(biāo)準(zhǔn)程序
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 95℃ | 5 min | 1 |
變性 退火/延伸 | 95℃ |
| 45 |
60℃a | 30 secb |
【注】a. 擴(kuò)增反應(yīng):擴(kuò)增反應(yīng)溫度根據(jù)設(shè)計(jì)的引物Tm值進(jìn)行調(diào)整。
b. 熒光信號(hào)采集:不同的qPCR檢測(cè)儀器所需的熒光信號(hào)采集時(shí)間不同,請(qǐng)根據(jù)最短時(shí)間限制進(jìn)行設(shè)置。
2.2 快速程序
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 95℃ | 30 sec | 1 |
變性 退火/延伸 | 95℃ |
| 45 |
60℃ | 20 secc |
【注】c. 快速程序:實(shí)際使用的qPCR檢測(cè)儀器是否支持快速擴(kuò)增,請(qǐng)進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)確認(rèn)。
適用機(jī)型
ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™,ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex;
Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™;
Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™;
Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000;
Roche Applied Science LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96;
Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler®; Illumina Eco qPCR; SLAN 96S, 96P.
注意事項(xiàng)
1. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)使用RNase free耗材。
2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。