NobleRyder BC8843 Na+k+——ATP酶活性檢測試劑盒 Na+K+——ATPase Activity Assay Kit

產(chǎn)品貨號：BC8843

產(chǎn)品名稱：Na+k+——ATP酶活性檢測試劑盒 Na+K+——ATPase Activity Assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格：100T/48S

Na+k+—ATP酶活性檢測試劑盒 抗逆

產(chǎn)品簡介：

中文名稱：Na+k+ ——ATP酶活性檢測試劑盒

英文名稱：Na+K+——ATPase Activity Assay Kit

別名：Na+k+――ATP酶試劑盒 Na+k+ ――ATP酶測試盒

規(guī)格：100T/48S

檢測方法：微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader

儲存條件：Store at -20℃，6 months

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準

NobleRyder BC8843 Na+k+——ATP酶活性檢測試劑盒 Na+K+——ATPase Activity Assay Kit

Na+K+- ATP酶廣泛分布于植物、動物、微生物和細胞中，可催化ATP水解生成ADP和無機磷。

Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及無機磷，通過測定無機磷的量來確定ATP酶活性。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。

操作步驟：

一、樣本處理(可適當調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻)

1、細菌、細胞或組織樣本的制備：

細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清;按照每500萬細菌或細胞加入1mL試劑一，超聲波破碎細菌或細胞(功率200w，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次)：8000g4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

組織：稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一進行冰浴勻漿。8000g4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清(漿)樣本：直接檢測。

二、測定步驟

1、可見分光光度計或酶標儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至660nm，可見分光光度計需用蒸餾水調(diào)零。

三、Na+K+-ATP酶活計算

1、血清(漿)Na*K*-ATPase活力的計算：

larbio

定義：規(guī)定每小時每毫升血清(漿)中Na⁺K⁺- ATP酶分解ATP產(chǎn)生lμmoL無機磷的量為一個酶活力單位。

Na⁺K⁺-ATP酶活力(U/mL)=C標x(A測定-A對照)+(A標準-A空白)xV 總+V 樣+TxF

=7.5x(A測定-A對照)+(A標準-A空白)xF

2、組織、細菌或細胞中Na*K*-ATPase活力的計算：

(1)按蛋白濃度計算：

定義：規(guī)定每小時每毫克組織蛋白中Na⁺K⁺-ATP酶分解ATP產(chǎn)生lμmoL無機磷的量為一個酶活力單位。

Na⁺K⁺-ATP酶活力(U/mg prot)=C標x(A測定-A對照)÷(A標準-A空白) xV總÷ (CprxV樣) ÷TxF

=7.5x(A測定-A對照)÷(A標準-A空白)+CprxF

(2)按樣本質(zhì)量計算：

定義：規(guī)定每小時每克組織中Na⁺K⁺-ATP酶分解 ATP產(chǎn)生lμmoL無機磷的量為一個酶活力單位。

Na⁺K⁺-ATP酶活力(U/g質(zhì)量)=C標x(A 測定-A對照)+(A標準-A空白)xV總+(V樣+V 樣總xW)÷TxF

-7.5x(A測定-A對照)÷(A標準-A空白)÷WxF

(3)按細菌或細胞數(shù)量計算：

定義：規(guī)定每小時每1萬個細菌或細胞中Na⁺K⁺-ATP酶分解ATP產(chǎn)生lμmoL無機磷的量為一個酶活力單位。

Na⁺K⁺-ATP酶活力(U/104cell)=C標x(A測定-A對照)÷(A標準-A空白)xV 總÷(V 樣÷V 樣總xN)÷TxF

=7.5x(A測定-A對照)+(A標準-A空白)xF

C標：標準管濃度，0.5μmol/mL：V總：酶促反應(yīng)總體積，0.25mL;V樣：加入樣本體積，0.1mL：V樣總：加入試劑一體積，1mL;T：反應(yīng)時間，1/6小時：Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL：W：樣本質(zhì)量，g;N：細菌或細胞總數(shù)，以萬計：F：樣本稀釋倍數(shù)。

注意事項：

1、由于每一個樣都必須做對照，本試劑盒100管保證測48份Na*K*-ATP酶。

2、此法具有微量、靈敏、快速的特點。所以對測定所用試管要求嚴格無磷。

Na+k+—ATP酶活性檢測試劑盒 抗逆 

產(chǎn)品訂購信息：

BC8843 Na+k+——ATP酶活性檢測試劑盒 Na+K+——ATPase Activity Assay Kit 100T/48S