諾博萊德 總蛋白提取試劑盒（蛋白組實驗、質(zhì)譜適用）

總蛋白提取試劑盒(蛋白組實驗適用)常備現(xiàn)貨

產(chǎn)品貨號：P4901

產(chǎn)品名稱：總蛋白提取試劑盒（蛋白組實驗、質(zhì)譜適用）

產(chǎn)品規(guī)格：50T/100T

產(chǎn)品簡介：

中文名稱：總蛋白提取試劑盒（蛋白組實驗、質(zhì)譜適用）

規(guī)格：100T ; 50T

儲存條件：2-8℃，1 year

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準

NobleRyder P4901總蛋白提取試劑盒(蛋白組實驗、質(zhì)譜適用)適用于從各種原代或傳代動物細胞和各種實體組織，如腦、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結(jié)締組織等動物組織中提取總蛋白。提取過程簡單方便，可在1小時內(nèi)完成。本試劑盒含有的du特配方能夠有效溶解細胞膜組份，包括細胞質(zhì)膜、核膜和各種細胞器膜。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。本試劑盒的蛋白提取組份中不含有不可透析除去的去垢劑組份，不含SDS、TritonX-100、chaps等可能影響質(zhì)譜實驗的組份，最后得到的蛋白質(zhì)樣品經(jīng)過透析或者脫鹽處理后將不含有去垢劑、高濃度鹽等影響，基本可以滿足下游任意的蛋白質(zhì)組學相關(guān)實驗研究。本產(chǎn)品的蛋白酶抑制劑混合物中不含AEBSF，可以避免由于AEBSF導致的質(zhì)譜峰漂移，因此使用本產(chǎn)品提取的蛋白樣品可以用于質(zhì)譜(MassSpectrometry,MS)檢測和分析，蛋白質(zhì)組學(proteomics)等相關(guān)研究。本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構(gòu)象的活性蛋白。

適用樣本：動物細胞/組織

使用前請注意：

1. 蛋白提取液A2、蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。

2. 蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，

變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。

3. 試劑拆封后請盡快使用完！

產(chǎn)品介紹：

蛋白提取試劑盒（蛋白質(zhì)組學實驗適用）適用于從各種原代或傳代動物細胞和各種實體組織，如腦、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結(jié)締組織等動物組織中提取總蛋白。提取過程簡單方便，可在1小時內(nèi)完成。

本試劑盒含有的du特配方能夠有效溶解細胞膜組份，包括細胞質(zhì)膜、核膜和各種細胞器膜。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。

本試劑盒的蛋白提取組份中不含有不可透析除去的去垢劑組份，不含SDS、TritonX-100、chaps等可能影響質(zhì)譜實驗的組份，最后得到的蛋白質(zhì)樣品經(jīng)過透析或者脫鹽處理后將不含有去垢劑、高濃度鹽等影響，基本可以滿足下游任意的蛋白質(zhì)組學相關(guān)實驗研究。

本產(chǎn)品的蛋白酶抑制劑混合物中不含AEBSF，可以避免由于AEBSF導致的質(zhì)譜峰漂移，

因此使用本產(chǎn)品提取的蛋白樣品可以用于質(zhì)譜（Mass Spectrometry, MS）檢測和分析，蛋白質(zhì)

組學（proteomics）等相關(guān)研究。

本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構(gòu)象的活性蛋白。

自備試劑和儀器：

離心機、振蕩器、渦旋混勻器、移液器、冰箱、冰盒，PBS緩沖液、蛋白定量試劑盒，

離心管、吸頭、一次性手套。

產(chǎn)品特點：

1. 使用方便，從細胞，組織中提取蛋白不需經(jīng)過研磨、反復凍融、超聲破碎等前處理。

2. 將蛋白提取的時間縮短至30min-1h。

3. 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。

4. 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。

5. 總蛋白提取液含多種有效成分，可以充分釋放胞漿蛋白、核蛋白，又可結(jié)合釋出的蛋白

防止沉淀。

6. 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含5種

獨立的蛋白酶抑制劑Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括絲an酸蛋白酶、半胱an酸蛋白酶、天冬an酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

操作步驟：

一、使用注意事項

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得優(yōu)良實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗 并che底清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。

7. 實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。

8. 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。

9. 如果試劑盒不能短時間內(nèi)用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。

二、細胞樣本蛋白提取

1. 提取液制備：

將試劑A1和試劑A2混合，配成蛋白提取液A，充分混勻備用。

每500μL蛋白提取液A中加入2μL蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。

2. 收集細胞，在4℃，2000×g 條件下離心5-10min，小心吸取培養(yǎng)基，盡可能吸干。

3. 用冷PBS洗滌細胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。

4. 每5×106

-1×107個細胞（大約50mg細胞/50μL細胞壓積）中加入500μL冷的總蛋白提取液，

吹打混勻后，在4℃條件下振蕩20-30min，至細胞充分裂解，無明顯細胞沉淀。

5. 在4℃，12000×g條件下離心15min。

6. 將上清吸入另一預冷的干凈離心管，即可得到細胞總蛋白。

7. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛴糜谙掠螌嶒灐?/span>

8. 將蛋白樣品透析處理或者脫鹽柱脫鹽處理后用于下游實驗。

三、組織樣本總蛋白提取

1. 提取液準備：

將試劑A1和試劑A2混合，配成蛋白提取液A，充分混勻備用。

每500μL蛋白提取液A中加入2μL蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。

2. 取50-100mg組織樣本，用PBS洗干凈，然后用手shu剪dao盡可能剪碎，加入500μL總蛋白提

取液A，用組織勻漿器/勻漿機勻漿至無明顯肉眼可見固體。

3. 將組織勻漿吸入一預冷的干凈離心管中，在4℃條件下振蕩20-30min。

4. 在4℃，12000×g條件下離心15min。

5. 將上清吸入另一預冷的干凈離心管，即得到組織總蛋白。

6. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灐?/span>

7. 將蛋白樣品透析處理或者脫鹽柱脫鹽處理后用于下游實驗。

常見問題分析：

1. 蛋白濃度低?

處理部分樣本時可能沒有裂解wan全，導致蛋白濃度低。只要適當延長試劑A的處理時間

即可。最好在持續(xù)振蕩的條件下處理，沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。

2. 用什么方法定量蛋白?

建議用BCA法。

3. 提取的蛋白具有活性嗎?

本試劑盒不含有離子型去垢劑組份，不破壞蛋白的結(jié)構(gòu)，沒有對蛋白質(zhì)之間原有的相互

作用的破壞，蛋白均保持其天然構(gòu)象和活性。

注意事項：

1. 本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。

2. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并

che底清除殘留清潔劑。

3. 實驗完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。

4. 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

5. 如果試劑不小心接觸皮膚或眼睛，應立即用水沖洗。

總蛋白提取試劑盒(蛋白組實驗適用)常備現(xiàn)貨

產(chǎn)品訂購信息：

P4901  總蛋白提取試劑盒（蛋白組實驗、質(zhì)譜適用）  50T/100T