BO6073 土壤羥胺還原酶試劑盒 土壤系列
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號(hào) BO6073
- 產(chǎn)地 北京
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/4/4 16:51:03
- 訪問(wèn)次數(shù) 17
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/48S |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | BO6073 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
| 主要用途 | 土壤羥胺還原酶能將土壤中氮代謝過(guò)程中形成的中間產(chǎn)物羥胺還原為氨 |
土壤羥胺還原酶（hydroxylamine reductase,HR）試劑盒說(shuō)明書(shū)
微量法 100T/48S
土壤羥胺還原酶試劑盒 土壤系列
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義：
土壤羥胺還原酶能將土壤中氮代謝過(guò)程中形成的中間產(chǎn)物羥胺還原為氨，土壤中的還原態(tài)化合物可作為氫的供體，其強(qiáng)弱影響到土壤氮代謝過(guò)程中氮素的氨揮發(fā)損失，間接影響氮肥的利用效率。
測(cè)定原理：
硫酸鐵銨中的Fe3+可將羥胺氧化為氮?dú)猓陨肀贿€原為 Fe2+，F(xiàn)e2+在弱酸條件下與鄰菲羅琳形成橙紅色配合物，在 510nm 處有吸收峰，羥胺還原酶作用于羥胺，使配合物形成量減少，510nm 處吸光值的減少可反映羥胺還原酶的活性。
試劑組成和配制：
產(chǎn)品名稱 | BO6073-100T/48S | Storage |
試劑一：液體 | 4ml | 4℃ |
試劑二：粉劑 | 1 瓶 | 4℃ |
試劑三：液體 | 12ml | 4℃ |
試劑四：液體 | 8ml | 4℃ |
試劑五：液體 | 4ml | 4℃ |
試劑六：液體 | 2ml | 4℃避光 |
試劑七：液體 | 2ml | 4℃避光 |
說(shuō)明書(shū) | 一份 | |
試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前加 4ml 蒸餾水充分溶解。
自備儀器和用品：
天平、常溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、震蕩儀、氮吹儀。
樣品處理：
新鮮土樣自然風(fēng)干或 37 度烘箱風(fēng)干，過(guò) 30~50 目篩。
測(cè)定操作表：
空白管 | 對(duì)照管 | 測(cè)定管 |
風(fēng)干土樣（g） | 0.02 | 0.02 | |||
試劑一（μl） | 40 | 40 | |||
蒸餾水（μl） | 40 | ||||
試劑二（μl） | 40 | 40 | 40 | ||
混勻后，用N2 氣流排除管中空氣，立即密封，于 30℃反應(yīng) 1h | |||||
試劑四（μl） | 80 | 80 | 80 | ||
充分震蕩 10min，8000rpm，25℃，離心 10min | |||||
上清液（μl） | 20 | 20 | 20 | ||
試劑五（μl） | 40 | 40 | 40 | ||
試劑六（μl） | 20 | 20 | 20 | ||
試劑七（μl） | 20 | 20 | 20 | ||
蒸餾水（μl） | 100 | 100 | 100 | ||
充分混勻，25℃靜置顯色 10min，用蒸餾水調(diào)零，于微量石英比色皿/96 孔板測(cè)定 510nm 各管吸光值，分別記為A 空白管、A 標(biāo)準(zhǔn)管、A 對(duì)照管、A 測(cè)定管，△A＝A 空白管－ （A 測(cè)定管－A 對(duì)照管）。 | |||||
計(jì)算公式：
使用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.185x -0.1828，R2 = 0.9992
酶活定義：每克土壤每天轉(zhuǎn)化 1μg 羥胺為一個(gè)酶活力單位。
HR 活性（μg/d /g 土樣）=（△A+ 0.1828）÷ 0.185×V 反總÷W÷T
= 36.32×（△A+0.1828）÷W
使用 96 孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.0925x -0.1828，R2 = 0.9992
酶活定義：每克土壤每天轉(zhuǎn)化 1μg 羥胺為一個(gè)酶活力單位。
HR 活性（μg/d /g 土樣）=（△A+ 0.1828）÷ 0.0925×V 反總÷W÷T
=72.64×（△A+0.1828）÷W
V 反總：加入提取液體積，0.28ml；W：樣本質(zhì)量，g；T：1/24h
注意事項(xiàng)：
土壤表層溶解氧濃度較大，取樣應(yīng)取表層 5cm 以下的土壤，否則酶活性較低或者測(cè)定不到。
試劑三盡量不要敞口放置，取完立即加蓋擰緊。
反應(yīng)體系最好能用氮吹儀排除溶解氧，若無(wú)此裝置，則加入試劑三后立即密封，于 30℃反應(yīng) 1h。
土壤羥胺還原酶試劑盒 土壤系列
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