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EG15508S LightNing® AscI內(nèi)切酶

具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

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公司簡介拼圖(1).jpg


蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2008年,位于蘇州園區(qū)生物納米園(BiobayA5301室。公司管理團(tuán)隊專注于科學(xué)儀器行業(yè)十三年,擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊與完善的售后服務(wù)體系,目前已為300余家實(shí)驗(yàn)室提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù),涵蓋各大高校、醫(yī)療機(jī)構(gòu)、檢測中心、科研機(jī)構(gòu)、制藥企業(yè)等13個群體。代理的實(shí)驗(yàn)室儀器主要包括振蕩培養(yǎng)箱,PCR儀,移液器,生物反應(yīng)器,發(fā)酵罐,移液器,超低溫冰箱,醫(yī)用冰箱,液氮罐,高壓滅菌器,超純水機(jī),天平,離心機(jī)等。廠商企業(yè)授權(quán)包括知楚儀器、朗基、中科美菱,梅特勒,樂楓,搏旅、NEST、天根、奧盛在內(nèi)等多家等。在提供產(chǎn)品的同時也為您提供生物實(shí)驗(yàn)室常用的耗材試劑,以及實(shí)驗(yàn)室整體搬遷、第三方檢測、計量與校準(zhǔn),二手儀器調(diào)劑等服務(wù)。完整的實(shí)驗(yàn)室一站式體驗(yàn)使您的選擇更加方便、快捷、靈活。

阿爾法性價比:一級代理;一手貨源;進(jìn)口品質(zhì),國產(chǎn)價格;

阿爾法交貨期:自有倉庫,標(biāo)準(zhǔn)品有庫存,常規(guī)試劑耗材備有現(xiàn)貨;

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阿爾法質(zhì)保期:終身質(zhì)保,免費(fèi)更換配件

阿爾法生物,助力生命科學(xué)研究!讓你的實(shí)驗(yàn),順利進(jìn)行沒有后顧之憂!


實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,儀器,生物反應(yīng)器,發(fā)酵罐,不銹鋼生物反應(yīng)器,實(shí)驗(yàn)耗材,純水機(jī),離心機(jī),顯微鏡,電子天平

產(chǎn)地類別 國產(chǎn) 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥

LightNing® AscI內(nèi)切酶組成

 

組分

規(guī)格

LightNing® AscI

50 μl

10× CutOne® Buffer

1 ml

10× CutOne® Color Buffer

1 ml

 

特性和用法

LightNing® AscI內(nèi)切酶,可在5~15 min內(nèi)完成反應(yīng)


u建議反應(yīng)條件

1× CutOne®緩沖液;

37℃溫育;

參照DNA 快速酶切流程”配制反應(yīng)體系。

u失活條件

80℃溫育20 min。

u甲基化敏感性

對于被 CpG 甲基化的 DNA,剪切可能受阻。

u存儲條件

-20

 

相關(guān)問答

Q:為什么在CutOne® Buffer中加入HSA

A:一些酶在反應(yīng)過程中需要HSA的參與,我們在CutOne® Buffer中添加了HSA,避免反應(yīng)中額外添加組分,使得酶切反應(yīng)更加便捷。

 

Q:HSA的添加對于雷霆系列限制性內(nèi)切酶的功能會產(chǎn)生什么樣的影響?

A:在我們的測試中未曾發(fā)現(xiàn)HSA對于雷霆系列限制性內(nèi)切酶的功能有任何影響。在有些情況下,對于部分的酶切反應(yīng)有促進(jìn)作用。

 

Q:我需要嚴(yán)格遵守5~15 min的酶切時間嗎?能夠延長反應(yīng)時間嗎?

A:雷霆系列限制性內(nèi)切酶經(jīng)過改造可以將酶切時間縮短至5~15 min。同樣也消除了限制性內(nèi)切酶的星活性(長時間反應(yīng)造成的非特異性消化),在說明書中告知的星活性出現(xiàn)的時間范圍內(nèi)可以適當(dāng)延長反應(yīng)時間。

 

Q:我什么時候應(yīng)當(dāng)考慮星活性對于酶切反應(yīng)的影響?

A:如果額外的酶切條帶對于實(shí)驗(yàn)結(jié)果會產(chǎn)生影響時我們應(yīng)當(dāng)考慮星活性對于酶切反應(yīng)的影響。例如:進(jìn)行基因型、突變型分析或克隆時我們應(yīng)當(dāng)避免星活性的產(chǎn)生。避免星活性的有效方法:適當(dāng)擴(kuò)大反應(yīng)體積(較小的反應(yīng)體積容易造成甘油體積達(dá)到或超過總反應(yīng)體積的5%);不進(jìn)行超長時間孵育(過夜消化極易產(chǎn)生星活性)。

 

Q:有哪些關(guān)鍵因素會導(dǎo)致星活性?

A:長時間孵育、過量的酶、高甘油含量(通常高于5%)、較小的反應(yīng)體系等因素都會導(dǎo)致星活性的產(chǎn)生。

 

 

Q:未經(jīng)純化的PCR產(chǎn)物直接酶切要怎樣設(shè)定體系?

A:反應(yīng)體系推薦由這些內(nèi)容組成:10 μl PCR產(chǎn)物、2 μl 10×CutOneTM Buffer、1~2 μl相應(yīng)的限制性內(nèi)切酶、ddH2O補(bǔ)齊到30 μl。酶的用量根據(jù)PCR產(chǎn)物的濃度而定,只加入2 μl反應(yīng)緩沖液的原因是PCR反應(yīng)中存在對應(yīng)的鹽離子和金屬離子,適當(dāng)減少反應(yīng)緩沖液的用量以保證最終反應(yīng)體系中的環(huán)境適宜限制性內(nèi)切酶發(fā)揮功能。

 

Q:限制性內(nèi)切酶簡并性識別位點(diǎn)一定是回文的嗎?

A:大多數(shù)二型限制性內(nèi)切酶的識別序列是回文的,而且是特定的堿基序列。然而有些限制性內(nèi)切酶具有簡并性識別位點(diǎn),也就是說識別位點(diǎn)中有一個或以上的堿基對是非特異的(例如:BsrfI識別5RCCGGY, R=A/G, Y=C/T)。對于這樣的具有簡并性識別位點(diǎn)的限制性內(nèi)切酶,只要是符合要求的序列皆能被識別并且被正確地切割(例如5ACCGGC, 5ACCGGT, 5GCCGGC, 5GCCGGT,其中兩個并不是回文的,仍然能被BsrFI識別并且切割)。



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