BI6052 β-木糖苷酶測(cè)定試劑盒 糖代謝系列
- 公司名稱(chēng) 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號(hào) BI6052
- 產(chǎn)地
- 廠(chǎng)商性質(zhì) 經(jīng)銷(xiāo)商
- 更新時(shí)間 2025/4/11 15:28:45
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/24S |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | BI6052 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
| 主要用途 | 應(yīng)用于微生物發(fā)酵；作為生物漂白劑應(yīng)用于造紙工業(yè) |
β-木糖苷酶（β- xylosidase）測(cè)定試劑盒說(shuō)明書(shū)
分光光度法 50 管/24 樣
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義：
β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、細(xì)菌和真菌等生物體，是催化木聚糖類(lèi)半纖維素降解的關(guān)鍵酶，產(chǎn)物木糖可作為碳源應(yīng)用于微生物發(fā)酵。另外，β-木糖苷酶還可以作為生物漂白劑應(yīng)用于造紙工業(yè)，比傳統(tǒng)的漂白法環(huán)保，具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。
測(cè)定原理：
β-木糖苷酶催化對(duì)硝基ben酚-β-D-木糖苷產(chǎn)生對(duì)硝基ben酚，對(duì)硝基ben酚在 405nm 處有特征吸收峰，測(cè)定405nm 光吸收增加速率，可計(jì)算β-木糖苷酶活性。
β-木糖苷酶測(cè)定試劑盒 糖代謝系列
組成：
產(chǎn)品名稱(chēng) | BI6052-50T/24S | Storage |
提取液：液體 | 50ml | 4℃ |
試劑一：液體 | 2ml | 4℃避光 |
試劑二：粉劑 | 20ml | 4℃ |
試劑三：原液 | 20ml | 4℃ |
說(shuō)明書(shū) | 一份 | |
自備儀器和用品：
天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 ml 玻璃比色皿和蒸餾水。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)
粗酶液提?。?/span>
1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱(chēng)取約 0.1g 組織，加入 1ml 提取液）進(jìn)行冰浴勻漿，然后 10000g，4℃，離心 20min，取上清待測(cè)。
2. 細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104 個(gè)）：提取液體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)胞加入 1ml 提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時(shí)間 3min）；然后 10000g， 4℃，離心 10min，取上清置于冰上待測(cè)。
3. 液體：直接檢測(cè)。
測(cè)定操作表：
對(duì)照管 | 測(cè)定管 |
酶液（μl） | 200 | 200 | ||
試劑一（μl） | 50 | |||
試劑二（μl） | 400 | 350 | ||
混勻，45℃水浴 20min | ||||
試劑三（μl） | 400 | 400 | ||
混勻，靜置 5min，蒸餾水調(diào)零，405nm 處測(cè)定吸光值A(chǔ)，計(jì)算ΔA=A 測(cè)定管-A 對(duì)照管。 每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。 | ||||
β-木糖苷酶活性計(jì)算公式：
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)：y=13.226x+0.0011，R2=0.9998；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μmol/ml），y 為吸光值ΔA。
1、按蛋白濃度計(jì)算
酶活定義：45℃，pH7.4 時(shí)每毫克蛋白 1min 內(nèi)催化產(chǎn)生 1 nmol 對(duì)硝基ben酚為一個(gè)酶活單位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/ mg prot）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V 反總÷（V 樣×Cpr）÷T×1000
= 11.34×(ΔA -0.0011)÷ Cpr
2、按樣本質(zhì)量計(jì)算：
酶活定義：45℃，pH7.4 時(shí)每克樣品 1min 內(nèi)催化產(chǎn)生 1 nmol 對(duì)硝基ben酚為一個(gè)酶活單位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/g 鮮重）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V 反總÷（V 樣÷V 樣總×W）÷T×1000= 11.34×(ΔA-0.0011)÷W
3. 按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算：
酶活定義：45℃，pH7.4 時(shí)每 104 個(gè)細(xì)胞 1min 內(nèi)催化產(chǎn)生 1 nmol 對(duì)硝基ben酚為一個(gè)酶活單位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/104cell）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V 反總÷V 樣×V 樣總÷細(xì)胞數(shù)量（萬(wàn)個(gè)）
÷T×1000=11.34×(ΔA-0.0011) ÷ 細(xì)胞數(shù)量（萬(wàn)個(gè)）
（4）按液體體積計(jì)算
酶活定義：45℃，pH7.4 時(shí)每毫升液體 1min 內(nèi)催化產(chǎn)生 1 nmol 對(duì)硝基ben酚為一個(gè)酶活單位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/ ml）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V 反總÷V 樣÷T×1000
=11.34×(ΔA-0.0011)
V 樣總：加入提取液體積，1ml； V 反總：反應(yīng)總體積，0.6ml；V 樣：反應(yīng)中樣品體積，0.2ml；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/ml；W：樣品質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，20min；1000:1μmol/ml=1000nmol/ml
ΔA 控制在 0.01-2 范圍內(nèi)，若ΔA 大于 2，可適當(dāng)減小樣本量。標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)線(xiàn)性范圍為：0.01μmol/ml-0.5μmol/ml。
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