產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

核酸雜交是指用一種標(biāo)記的核酸探針與印跡膜上的核酸進(jìn)行雜交，由此檢測(cè)印跡膜上是否存在與探針同源的核酸分子。當(dāng)探針是 Oligo 分子時(shí)，需要使用專(zhuān)門(mén)的核酸雜交液，本產(chǎn)品就是為此開(kāi)發(fā)的 Oligo 探針專(zhuān)用雜交液。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.即開(kāi)即用，使用方便。

2.既可以用于 DNA Oligo 探針雜交，也可以用于 RNA Oligo 探針雜交。

3.本產(chǎn)品足夠 5 平方厘米印跡膜的 10 次核酸雜交。

4.高效核酸雜交液（Oligo 探針專(zhuān)用）只可用于科研。

產(chǎn)品參數(shù)：

成分規(guī)格包裝

高效核酸雜液（Oligo 探針專(zhuān)用）10 mL10 mL 本色瓶

使用手冊(cè)1 份無(wú)

運(yùn)輸及保存

低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

自備試劑

印跡膜，Oligo 探針，6×SSC，2×SSC，0.1×SSC

使用方法：

一、雜交溫度的確定

1.Oligo 探針的最佳雜交溫度一般比Tm 低5℃。計(jì)算Tm 的公式是Tm=GC數(shù)量×4℃+AT 數(shù)量×2℃。但由于 Oligo 較短，更容易受各種因素影響

（如錯(cuò)配率、修飾堿基比例等），所以最佳溫度可能還需要適度摸索和優(yōu)化。Oligo 探針可以在室溫洗膜。

二、預(yù)雜交

2.將轉(zhuǎn)膜所得的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6×SSC 溶液中，使其充分濕潤(rùn)。

3.將濕潤(rùn)的印跡膜置于一塑料雜交袋中（塑料袋最好預(yù)先封口，再剪掉一  角，留一個(gè)小口），按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 本產(chǎn)品的比例沿小口加入本產(chǎn)品，然后用塑料封口機(jī)將口封牢。

4.將此塑料袋浸沒(méi)入溫度設(shè)定在最佳雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中，  保溫 1-2 小時(shí)，延長(zhǎng)到 12-16 小時(shí)亦可。注意保溫過(guò)程中塑料袋應(yīng)在不停的搖動(dòng)狀態(tài)中，使本產(chǎn)品與印跡膜充分接觸。

三、雜交

5.將 Oligo 探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中（先用剪刀剪一小口，加入 Oligo 探針后用熱封機(jī)封口）。Oligo 探針的加入量視探針標(biāo)記效率而定，一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測(cè)基因組中的單拷貝基因，Oligo 探針的加入量應(yīng)加大，而對(duì)于檢測(cè)克隆的基因片段，則 Oligo探針的量可減少。如果是放射性 Oligo 探針，應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中，以避免雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。

6.在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫，時(shí)間一般為 6-12 小時(shí)。四、洗膜

7.雜交完畢，取出塑料袋，剪去一角，倒出所有的含 Oligo 探針的雜交液。

此含 Oligo 探針的雜交液可以多次使用。

8.剪開(kāi)雜交袋，用鑷子取出印跡膜，浸沒(méi)于大量的 2×SSC（含 0.5 % SDS）溶液中，室溫下振蕩漂洗 15 分鐘。洗膜時(shí)一定不要使印跡膜干燥。

9.重復(fù)上步操作一次。

10.將印跡膜轉(zhuǎn)移至 0.1×SSC（含 0.1% SDS）溶液中，在計(jì)算好的洗膜溫度下振蕩漂洗 30 分鐘至 1 小時(shí)。

11.重復(fù)上步操作一次。

12.將印跡膜轉(zhuǎn)移到濾紙上，吸去表面液體后印跡膜即可用于后續(xù)檢測(cè)。

選擇我們的高效核酸雜交液（Oligo 探針專(zhuān)用），就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測(cè)方案，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航！