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在 AdvanceBio SEC 聚集體分析之后進(jìn)行 Protein A 親和 IgG 捕獲--采用 Agilent 1290 Infinity 二維液相色譜解決方案

"This Application Note describes the quantification of aggregates in biotherapeutic 本應(yīng)用簡報(bào)介紹了使用 Agilent 1290 Infinity 二維液相色譜解決方案對(duì)生物治 療樣品中聚集體的定量分析。Protein A 親和捕獲在第一維中進(jìn)行，而體積排 阻色譜在第二維中進(jìn)行。多中心切割用于將樣品從第一維轉(zhuǎn)移到第二維。這 項(xiàng)技術(shù)能夠在一次分析中完成整個(gè)表征，無需進(jìn)行餾分收集和多次進(jìn)樣。

摘要 

本應(yīng)用簡報(bào)介紹了使用 Agilent 1290 Infinity 二維液相色譜解決方案對(duì)生物治 療樣品中聚集體的定量分析。Protein A 親和捕獲在第一維中進(jìn)行，而體積排 阻色譜在第二維中進(jìn)行。多中心切割用于將樣品從第一維轉(zhuǎn)移到第二維。這 項(xiàng)技術(shù)能夠在一次分析中完成整個(gè)表征，無需進(jìn)行餾分收集和多次進(jìn)樣。

結(jié)論 

Agilent 1290 Infinity 二維液相色譜解決 方案為在一個(gè)方法中測定 mAb 滴度 和聚集體提供了一種通用而高效的方 法，無需進(jìn)行餾分收集和多重進(jìn)樣。 Agilent Bio-Monolith Protein A 親和色譜 柱作為二維液相色譜工作流程的第一 維，有助于在滴度測定中實(shí)現(xiàn) mAb 的 分析級(jí)純化，并可在聚集體分析前作 為初始純化步驟。Agilent AdvanceBio  SEC 300 Å 色譜柱對(duì)聚集體與單體的分 離表現(xiàn)出優(yōu)異的分離度，可在二維液 相色譜工作流程中作為第二維實(shí)現(xiàn)準(zhǔn) 確的評(píng)估。

參考文獻(xiàn) 

1. Vanhoenacker, G. 等，使用 Agilent  1290 Infinity 二維液相色譜解決方案 分析單克隆抗體酶解物，安捷倫科 技公司應(yīng)用簡報(bào)，出版號(hào) 5991-2880CHCN，2013 2. Lohaus, C. 等，用 Agilent BioMonolith Protein A 親和 HPLC 色譜 柱快速測定人多克隆 IgG，安捷倫 科技公司應(yīng)用簡報(bào)，出版號(hào) 5989-9733CHCN，2008 3. Duong, P. T. 采用 Agilent Bio-Monolith  Protein A 親和色譜柱監(jiān)測細(xì)胞培養(yǎng) 液中的單克隆抗體滴度，安捷倫科 技公司應(yīng)用簡報(bào)，出版號(hào) 5991-2990CHCN，2014