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多參數(shù) THP-1 細胞分化及細胞因子分泌表型分析試驗評價抗炎化合物
檢測樣品:細胞
檢測項目:抗炎化合物
方案概述:巨噬細胞起源于血液中的單核細胞,這些單核細胞離開血液循環(huán),分化成不同的組織。巨噬細胞參與細菌和受損細胞的檢測和吞噬。此外,巨噬細胞通過釋放細胞因子引發(fā)炎癥,細胞因子激活血管細胞,促進細胞因子粘附血管并遷移到組織中。分化的THP-1細胞已被廣泛用于體外巨噬細胞模型研究巨噬細胞參與炎癥反應(yīng)。
巨噬細胞起源于血液中的單核細胞,這些單核細胞離開血液循環(huán),分化成不同的組織。巨噬細胞參與細菌和受損細胞的檢測和吞噬。此外,巨噬細胞通過釋放細胞因子引發(fā)炎癥,細胞因子激活血管細胞,促進細胞因子粘附血管并遷移到組織中。分化的 THP-1 細胞已被廣泛用于體外巨噬細胞模型研究巨噬細胞參與炎癥反應(yīng)。人單核細胞系 THP-1 可以通過佛波醇 12-十四酸酯 13-乙酸酯 (PMA) 分化成巨噬細胞,并通過 LPS 活化?;罨?THP-1 細胞改變形態(tài),分泌炎性細胞因子。監(jiān)測細胞因子的表達水平是炎癥細胞模型的重要生理指 標(biāo)。我們提出了多參數(shù)細胞分析的結(jié)果,使用表型成像考察巨噬細胞形成和低體積ELISA 分析細胞因子的分泌,以評估藥理學(xué)化合物對炎癥反應(yīng)的影響。PMA 和 LPS刺激 THP-1 細胞 48 小時。PMA 和 LPS 激活 THP-1 細胞后,IL-8、IL-1b 和 TNF-a升高。為了評估抗炎化合物,細胞在激活前分別接受激酶抑制劑 SB202190 和 PDTC以及抗生素莫西沙星的處理。然后,通過定量細胞因子分泌量來測定這些抗炎化合物對炎癥反應(yīng)的抑制作用。利用表型成像觀察了巨噬細胞形成的影響。與報道的作用機制一致,化合物 SB202190、PDTC 和莫西沙星的細胞因子表達呈濃度依賴性下降。
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