美谷分子儀器(上海)有限公司
使用雙發(fā)射熒光染料監(jiān)測(cè)癌細(xì)胞系的線粒體膜電位
檢測(cè)樣品:癌細(xì)胞系
檢測(cè)項(xiàng)目:線粒體膜電位
方案概述:從研究疾病到評(píng)估藥物和環(huán)境化合物誘導(dǎo)的毒性反應(yīng),基于細(xì)胞的測(cè)定法通常聚焦于線粒體,旨在監(jiān)測(cè)細(xì)胞健康。線粒體功能是整個(gè)細(xì)胞健康的關(guān)鍵指標(biāo),線粒體功能障礙與多種疾病(包括帕金森氏病,阿爾茨海默氏病,心力衰竭,局部缺血性疾病和癌癥)的關(guān)聯(lián)密切相關(guān)。
從研究疾病到評(píng)估藥物和環(huán)境化合物誘導(dǎo)的毒性反應(yīng),基于細(xì)胞的測(cè)定法通常聚焦于線粒體,旨在監(jiān)測(cè)細(xì)胞健康。線粒體功能是整個(gè)細(xì)胞健康的關(guān)鍵指標(biāo),線粒體功能障礙與多種疾病 ( 包括帕金森氏病,阿爾茨海默氏病,心力衰竭,局部缺血性疾病和癌癥 ) 的關(guān)聯(lián)密切相關(guān)。 1 此外,罕見疾病的發(fā)病機(jī)制可能由編碼線粒體蛋白的基因或線粒體 DNA 中的突變驅(qū)動(dòng)。 1 在整個(gè)藥物開發(fā)和測(cè)試過程中,評(píng)估線粒體功能是至關(guān)重要的?;謴?fù)線粒體功能的療法的發(fā)展和靶向癌癥線粒體功能障礙的化療藥物的發(fā)展就是例證。 3 此外,線粒體功能的評(píng)估是臨床前藥物安全性評(píng)估中至關(guān)重要的一步,因?yàn)榫€粒體功能障礙可能由藥物觸發(fā),進(jìn)而對(duì)細(xì)胞和組織健康產(chǎn)生不利影響。測(cè)量線粒體膜電位 (MMP) 以監(jiān)測(cè)線粒體代謝活性的變化是一種評(píng)估線粒體功能的靈敏且有效的方法。線粒體膜電位是檢測(cè)凋亡過程中線粒體去極化,檢測(cè)多藥耐藥細(xì)胞以及評(píng)估各種毒性篩選中線粒體功能的重要工具。 1-2 MMP 的評(píng)估通常使用親脂性陽離子熒光染料進(jìn)行。 根據(jù)線粒體膜電位的狀態(tài),MITO-ID膜電位染料的熒光會(huì)發(fā)生變化。具體來說,細(xì)胞質(zhì)中它以單體形成存 在,發(fā)出綠 色熒 光 (FITC, 530 nM);在活性線粒體中,它在線粒體基質(zhì)中聚集而發(fā)出橙色熒光 (TRITC,570 nM)。當(dāng) MMP 被破壞時(shí),MITO-ID 染料退出去極化線粒體,而以單體形式存在,可以觀測(cè)到橙色熒光降低到消失。
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