東曹（上海）生物科技有限公司
新型FcR親和色譜柱在細(xì)胞株篩選中的應(yīng)用
檢測(cè)樣品：生物制品
檢測(cè)項(xiàng)目：含量檢測(cè)
方案概述：在單克隆抗體藥物的初期研發(fā)階段中，需要對(duì)細(xì)胞株進(jìn)行篩選，選出能產(chǎn)生滴度較高、ADCC活性較高的細(xì)胞株。東曹公司推出的新型親和色譜柱FcR-IIIA-NPR能夠基于抗體糖鏈結(jié)構(gòu)的差異，對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)液中的抗體進(jìn)行HPLC分析，將繁瑣的抗體生物學(xué)活性測(cè)定法化繁為簡(jiǎn)，獲得重復(fù)性良好的分析結(jié)果。
在單克隆抗體藥物的初期研發(fā)階段中，通過(guò)對(duì)細(xì)胞株（cell line）實(shí)施篩選，選出能產(chǎn)生滴度較高、ADCC活性較高的細(xì)胞株。此時(shí)常會(huì)用到的幾種評(píng)估方法是，通過(guò)生物檢定法測(cè)定ADCC活性；通過(guò)表面等離子共振法（SPR）測(cè)定人體IgG受體（FcγRIIIa等）的親和力；通過(guò)LC/MS分析抗體酶切下來(lái)的糖鏈結(jié)構(gòu)等，但是這些方法都需要花費(fèi)大量的時(shí)間和人力。能夠把這些復(fù)雜的評(píng)估分析法由繁化簡(jiǎn)，并快速完成分析的HPLC色譜柱就是TSKgel FcR-IIIA-NPR。
使用TSKgel FcR-IIIA-NPR，可以直接分離抗體，無(wú)需對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)液進(jìn)行前處理。抗體主要可以分離出3個(gè)洗脫峰。已有研究表明，抗體糖鏈末端的半乳糖數(shù)量越多，在此色譜柱中的保留能力越強(qiáng)，而保留能力越強(qiáng)的洗脫峰，其ADCC活性就越高1)-3)。
使用TSKgel FcR-IIIA-NPR，可以直接分離抗體，無(wú)需對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)液進(jìn)行前處理。抗體主要可以分離出3個(gè)洗脫峰。已有研究表明，抗體糖鏈末端的半乳糖數(shù)量越多，在此色譜柱中的保留能力越強(qiáng)，而保留能力越強(qiáng)的洗脫峰，其ADCC活性就越高1)-3)。
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