廣東環(huán)凱生物科技有限公司
新冠疫情下環(huán)境微生物的監(jiān)控
檢測(cè)樣品:空氣
檢測(cè)項(xiàng)目:空氣沉降菌 空氣浮游菌
方案概述:關(guān)于開展空氣微生物氣溶膠采樣研究較多,根據(jù)不同原理制造的采樣器廣泛用于各領(lǐng)域,在這些類型采樣器中,以安德森空氣微生物采樣器采樣效率更高,所采粒子數(shù)較多。在分級(jí)采集不同粒度氣溶膠的時(shí)候,經(jīng)常采用安德森采樣器,一般情況下,我們要直接對(duì)空氣中的病毒進(jìn)行采樣和檢測(cè)還相對(duì)比較困難,但是,我們通過對(duì)空氣中常規(guī)微生物進(jìn)行采樣和檢測(cè),可以反應(yīng)出整體環(huán)境的潔凈度,從而評(píng)估我們環(huán)境的整體受污染程度和消毒效果。
新冠疫情下,許多人對(duì)環(huán)境中的病毒以及傳播方式忐忑不安,尤其是報(bào)道了空氣氣溶膠對(duì)新冠病毒傳播的影響,并且也對(duì)環(huán)境和空間消毒后的效果心存疑慮。目前,關(guān)于開展空氣微生物氣溶膠采樣研究較多,根據(jù)不同原理制造的采樣器廣泛用于各領(lǐng)域。如:?jiǎn)渭?jí)或多級(jí)撞擊式采樣器、離心式采樣器、氣旋式采樣器、液體沖擊式采樣器、過濾式采樣器等,在這些類型采樣器中,以安德森空氣微生物采樣器采樣效率更高,所采粒子數(shù)較多。在分級(jí)采集不同粒度氣溶膠的時(shí)候,經(jīng)常采用安德森采樣器。早在2010年,中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院病原學(xué)研究所就進(jìn)行過用安德森空氣生物采樣器采集病毒氣溶膠的研究。
當(dāng)然,一般情況下,我們要直接對(duì)空氣中的病毒進(jìn)行采樣和檢測(cè)還相對(duì)比較困難,但是,我們通過對(duì)空氣中常規(guī)微生物進(jìn)行采樣和檢測(cè),可以反應(yīng)出整體環(huán)境的潔凈度,從而評(píng)估我們環(huán)境的整體受污染程度和消毒效果。
1.空氣沉降菌:
通過自然沉降原理收集在空氣中的活微生物粒子,通過專用的培養(yǎng)基,在適宜的生長條件下繁殖到可見的菌落數(shù)。沉降菌的采樣屬于被動(dòng)式采樣,反映終落在地面或物體表面的灰塵中攜帶的微生物。
檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn):GB/T 18204.3-2013公共場(chǎng)所衛(wèi)生檢驗(yàn)方法 第3部分:空氣微生物
GB/T 16294-2010 醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū))沉降菌的測(cè)試方法
檢測(cè)方法:常用的檢驗(yàn)方法是沉降平板法,即測(cè)定在一定時(shí)間內(nèi)從空氣中降落到單位面積地面上的微生物個(gè)數(shù)。
操作步驟:將融化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基(霉菌監(jiān)測(cè)用沙氏培養(yǎng)基)倒入90mm無菌培養(yǎng)皿中制成平板(或購買商品化沉降皿),按標(biāo)準(zhǔn)要求布設(shè)在監(jiān)測(cè)點(diǎn)上(監(jiān)測(cè)點(diǎn)按標(biāo)準(zhǔn)選擇和布局),打開皿蓋暴露在監(jiān)測(cè)環(huán)境中5~30min(動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)不大于4小時(shí)),讓空氣中的微生物降落在平板表面,蓋好皿蓋,然后倒置放入培養(yǎng)箱中,培養(yǎng)48h后計(jì)菌落數(shù)(SDA培養(yǎng)5天)。
環(huán)凱牌三層無菌包裝沉降皿
2.空氣浮游菌
用計(jì)數(shù)濃度法,即通過收集懸游在空氣中的生物性粒子,通過專用的培養(yǎng)基,在適宜的生長條件下繁殖到可見的菌落數(shù)。浮游菌的采樣屬主動(dòng)采樣,反映潔凈區(qū)內(nèi)空氣中生物粒子的濃度。
檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn):《GB/T16293-2010醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū))浮游菌的測(cè)試方法》
檢測(cè)方法:常用撞擊式浮游微生物采樣器,使空氣通過狹縫或小孔產(chǎn)生高速氣流,從而將懸浮在空氣中的微生物(浮游菌)采集到專門的平板培養(yǎng)基上,經(jīng)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)后得到進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。
2.1單級(jí)浮游微生物采樣器
基于安德森撞擊原理(撞擊法),采集口風(fēng)速與潔凈室內(nèi)風(fēng)速基本一致的等速采樣理論設(shè)計(jì),直接采樣,空氣浮游微生物高速通過微孔被撞擊在培養(yǎng)皿內(nèi)的瓊脂表面,撞擊速度20m/s,相當(dāng)于安德森撞擊6級(jí),保證大于1微米的顆粒全被捕獲收集。
采樣步驟:將浮游微生物采樣器放置在監(jiān)測(cè)點(diǎn)上,卸下多孔采樣頭和保護(hù)蓋,用75%酒精對(duì)多孔采樣頭和保護(hù)蓋、培養(yǎng)皿座及外表進(jìn)行擦拭消毒,然后將預(yù)先制作好裝有TSA或SDA培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿(或購買商品化平板)放置于培養(yǎng)皿座上,并將培養(yǎng)皿調(diào)整至水平,裝好多孔采樣頭,設(shè)定采樣參數(shù),開機(jī)進(jìn)行采樣。采樣結(jié)束后,打開多孔采樣頭,取出培養(yǎng)皿,蓋回原培養(yǎng)皿蓋,貼上標(biāo)簽或?qū)懮暇幪?hào),置于已到達(dá)設(shè)定溫度的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),進(jìn)行倒置培養(yǎng)。
環(huán)凱牌浮游微生物采樣器
2.2 六級(jí)浮游微生物采樣器
整套儀器由六級(jí)采樣撞擊器 、采樣控制主機(jī) 、六級(jí)采樣撞擊器專用三角架組成。六級(jí)采樣撞擊器是由六個(gè)帶有經(jīng)硬質(zhì)氧化的鋁質(zhì)多孔撞擊采樣圓盤組成的 ,多孔撞擊采樣圓盤上可放置已有采樣介質(zhì)的無菌平皿 ,所有多孔撞擊采樣圓盤由三個(gè)彈簧掛鉤把多孔撞擊采樣圓盤緊密地連接在一起。同級(jí)多孔撞擊采樣圓盤上環(huán)形排列著400個(gè)孔徑相同的精準(zhǔn)微孔 ,不同級(jí)撞擊采樣圓盤的孔徑不同 。當(dāng)含有微生物粒子的空氣進(jìn)入采樣口后 ,采樣主機(jī)氣體采樣流量恒定 ,而氣體通過每一級(jí)采樣圓盤不同孔徑的篩孔時(shí) , 不同大小的微生物粒子按空氣動(dòng)力學(xué)特性分別以不同的速度撞擊在相應(yīng)的采樣介質(zhì)表面上。一級(jí)-第二級(jí)類似人體上呼吸道捕獲的粒子 ,第三級(jí)-第六級(jí)類似下呼吸道捕獲的粒子 ,這就在相當(dāng)程度上模擬了這些粒子在呼吸道的穿透作用和沉著部位。
采樣步驟:
1) 將六級(jí)采樣撞擊器用75%酒精進(jìn)行擦拭滅菌(或置于高壓蒸汽滅菌器121℃滅菌30分鐘),并妥善保管撞擊器備用。
2) 將撞擊器三角架支開并鎖緊,把三角架頂部調(diào)至水平,撞擊器放在三角架的云臺(tái)上,主機(jī)放在桌上或地上,用橡膠管連接撞擊器出氣口→主機(jī)進(jìn)氣口。
3) 順序在撞擊器中放入采樣平皿,一手打開平皿蓋,另一手迅速蓋上采樣頭(撞擊盤),然后按住撞擊器上部,掛上三個(gè)彈簧掛鉤。放入和取出采樣平皿時(shí),必須戴口罩,以防口鼻排出微生物污染平皿。
4) 打開電源開關(guān),設(shè)定相關(guān)參數(shù),將撞擊器置于監(jiān)測(cè)點(diǎn),打開撞擊器進(jìn)氣口上蓋,離開采樣點(diǎn)2米之外,即可啟動(dòng)采樣。
5) 采樣完成后,松開拉鉤彈簧,逐層打開多孔采樣頭(撞擊盤),取出培養(yǎng)皿,蓋回原培養(yǎng)皿蓋,貼上標(biāo)簽或?qū)懮暇幪?hào),置于已到達(dá)設(shè)定溫度的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),進(jìn)行倒置培養(yǎng)。
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