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關(guān)鍵詞：自身免疫性疾病，系統(tǒng)性紅斑狼瘡（Systemic lupus erythematosus, SLE），類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid Arthritis, RA) ，銀屑?。≒soriasis），白血病（leukemia），PBMC

隨著生物技術(shù)的飛速發(fā)展，人體免疫系統(tǒng)在疾病治療、藥物發(fā)展中的作用越來越明顯。外周血單個(gè)核細(xì)胞（Peripheral Blood Mononuclear Cells，PBMC）作為免疫系統(tǒng)的重要組成部分，其在自身免疫性疾病及白血病等疾病的發(fā)病機(jī)制中扮演著關(guān)鍵角色。

一、外周血單個(gè)核細(xì)胞簡(jiǎn)介

外周血單個(gè)核細(xì)胞（Peripheral Blood Mononuclear Cells，PBMC）是外周血中具有單個(gè)核的細(xì)胞的混合群體，主要包括淋巴細(xì)胞（T細(xì)胞、B細(xì)胞和NK細(xì)胞等）、單核細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞。PBMC通過血液循環(huán)分布到全身各組織器官中，參與機(jī)體的免疫應(yīng)答和免疫調(diào)節(jié)。

PBMC中大部分是淋巴細(xì)胞，包括T細(xì)胞、B細(xì)胞和NK細(xì)胞等。其中T淋巴細(xì)胞在胸腺中發(fā)育成熟，執(zhí)行人體的細(xì)胞免疫功能，在免疫監(jiān)視中發(fā)揮重要作用；B淋巴細(xì)胞執(zhí)行體液免疫功能，受抗原刺激后能發(fā)育為漿細(xì)胞分泌抗體；NK細(xì)胞即自然殺傷細(xì)胞，是非特異性免疫細(xì)胞，也在免疫監(jiān)視中發(fā)揮著重要作用。單核細(xì)胞屬于白細(xì)胞，是一種髓系免疫細(xì)胞，可分化為巨噬細(xì)胞或樹突狀細(xì)胞，參與先天免疫和抗原呈遞。樹突狀細(xì)胞也是免疫系統(tǒng)中的一種重要細(xì)胞，主要存在于淋巴組織和血液中，其主要功能是通過吞噬、處理和呈遞抗原，啟動(dòng)和調(diào)控免疫應(yīng)答。

由此可見，PBMC中各細(xì)胞亞群“各司其職”，共同構(gòu)成了人體的免疫屏障。作為免疫系統(tǒng)的重要組成部分，PBMC數(shù)量和功能的變化不僅可以反映機(jī)體的免疫狀態(tài)，而且與多種疾病的發(fā)生和發(fā)展有關(guān)。比如自身免疫性疾病是一類由于機(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)自身組織發(fā)生免疫反應(yīng)而導(dǎo)致的疾病，而PBMC中的不同細(xì)胞類型在這一過程中發(fā)揮著不同的作用。另外，白血病的發(fā)生和發(fā)展不僅與癌細(xì)胞本身有關(guān)，還與周圍的免疫微環(huán)境密切相關(guān)。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，PBMC在免疫微環(huán)境中的作用不容忽視，它們可以通過分泌各種細(xì)胞因子和趨化因子來影響白血病細(xì)胞的行為。因此，在自身免疫性疾病及白血病研究中，PBMC是重要的原材料，通過研究疾病狀態(tài)下PBMC中不同免疫細(xì)胞的功能狀態(tài)和數(shù)量改變，可以更好地理解自身免疫性疾病和白血病的發(fā)病機(jī)制，并為疾病的診斷、監(jiān)測(cè)和治療提供新的思路和方法。

二、自身免疫性疾病與PBMC的研究

 自身免疫性疾病是指機(jī)體對(duì)自身抗原發(fā)生免疫反應(yīng)而導(dǎo)致自身組織損害所引起的疾病，常見的有系統(tǒng)性紅斑狼瘡(Systemic Lupus Erythematosus, SLE)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid Arthritis, RA)和銀屑?。≒soriasis）等。

自身免疫性疾病的發(fā)生與免疫系統(tǒng)的異常激活有關(guān)。正常情況下，免疫系統(tǒng)能夠區(qū)分自身和非自身的抗原，但在自身免疫性疾病中，這種識(shí)別機(jī)制出現(xiàn)故障，導(dǎo)致免疫系統(tǒng)錯(cuò)誤地攻擊自身組織，而PBMC中的不同細(xì)胞類型則在這一過程中發(fā)揮著不同的作用。

【系統(tǒng)性紅斑狼瘡】

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（Systemic lupus erythematosus, SLE）是一種慢性自身免疫性疾病，以炎癥和免疫介導(dǎo)的多器官系統(tǒng)損傷為特征，包括皮膚黏膜系統(tǒng)、肌肉骨骼系統(tǒng)、血液系統(tǒng)和腎臟系統(tǒng)。全-世界約有340萬人被診斷為系統(tǒng)性紅斑狼瘡。

流行病學(xué)：中國(guó)大陸地區(qū)SLE患病率約為30~70個(gè)/10萬，男女患病比為1:10~12，好發(fā)于育齡期女性，多為15~40歲。

臨床表現(xiàn)：具有高度異質(zhì)性，系統(tǒng)受累表現(xiàn)多樣，病程和疾病嚴(yán)重程度不一。全身癥狀包括發(fā)熱、疲乏和體重下降；特異性狼瘡皮膚損害的典型表現(xiàn)為面頰部蝶形紅斑，亦可表現(xiàn)為亞急性皮膚型狼瘡和慢性皮膚型狼瘡；關(guān)節(jié)受累表現(xiàn)為對(duì)稱分布的非侵蝕性關(guān)節(jié)痛和關(guān)節(jié)炎，通常累及雙手小關(guān)節(jié)、腕關(guān)節(jié)和膝關(guān)節(jié)；此外，神經(jīng)系統(tǒng)、心、肺，消化系統(tǒng)等均可被累及。

發(fā)病機(jī)制：系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）的發(fā)病機(jī)制是多方面的，涉及遺傳、環(huán)境、激素水平和免疫系統(tǒng)的異常。PBMC中不同的細(xì)胞參與SLE的發(fā)病機(jī)制（圖1）

圖1 系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)病機(jī)制（來源：Immunopathogenesis of systemic lupus erythematosus: An update）

·樹突狀細(xì)胞（DCs）識(shí)別和內(nèi)化自身抗原，如核酸、免疫復(fù)合物、凋亡細(xì)胞碎片（K）。

·自體抗原呈遞給自身反應(yīng)性T細(xì)胞，導(dǎo)致其活化和增殖（L）。

·人漿細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞（pDCs）在調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答中起著至關(guān)重要的作用，并且在SLE的發(fā)病機(jī)制中起著至關(guān)重要的作用(M)。

·巨噬細(xì)胞通過各種機(jī)制參與SLE的發(fā)病機(jī)制(N)。

·B細(xì)胞功能異常，包括B細(xì)胞受體信號(hào)的改變、B細(xì)胞耐受機(jī)制的缺陷、B細(xì)胞凋亡受損和B細(xì)胞亞群的失調(diào)，都是SLE的發(fā)病機(jī)制(P)。

·CD4+ T細(xì)胞與自身反應(yīng)性B細(xì)胞相互作用，激活并分化為產(chǎn)生抗體的細(xì)胞(R)

·Tregs的功能和數(shù)量改變有助于免疫耐受的破壞，表現(xiàn)為抑制能力降低、生存受損和對(duì)細(xì)胞因子的反應(yīng)性改變(S)。

【類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎】

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid Arthritis, RA) 是一種慢性自身免疫性疾病，會(huì)導(dǎo)致關(guān)節(jié)炎癥和疼痛，影響身體多個(gè)系統(tǒng)，給患者帶來了極大的痛苦和生活不便。

流行病學(xué)：我國(guó)RA的患病率為0.42%，患者總數(shù)約500萬，男女比約為1∶4。多數(shù)患者為女性，且疾病的發(fā)病年齡多在20～55歲之間。

臨床表現(xiàn)：滑膜炎，并逐漸出現(xiàn)關(guān)節(jié)軟骨和骨破壞，最終導(dǎo)致關(guān)節(jié)畸形和功能喪失，可并發(fā)肺部疾病、心血管疾病、惡性腫瘤、骨折及抑郁癥等。

發(fā)病機(jī)制：目前RA具體的發(fā)病機(jī)制目前尚未完-全清晰，一般認(rèn)為是遺傳、環(huán)境、免疫系統(tǒng)等多種因素相互作用的結(jié)果。遺傳易感性和環(huán)境因素可能導(dǎo)致自我耐受破壞，引起系統(tǒng)性自身免疫反應(yīng)，從而導(dǎo)致軟骨和骨骼的破壞。PBMC中的T細(xì)胞和B細(xì)胞參與RA的發(fā)病機(jī)制（圖2）：

圖2 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎發(fā)病機(jī)制（來源：Update on the Pathomechanism, Diagnosis,and Treatment Options for Rheumatoid Arthritis）

RA患者中T細(xì)胞過度活化，分泌大量的炎癥因子，如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-1（IL-1）和白細(xì)胞介素-6（IL-6）等，導(dǎo)致關(guān)節(jié)滑膜的炎癥反應(yīng)。B細(xì)胞則產(chǎn)生針對(duì)自身組織的抗體，如類風(fēng)濕因子（RF）和抗環(huán)瓜氨酸多肽抗體（ACPA）。這些抗體與自身抗原形成免疫復(fù)合物，沉積在關(guān)節(jié)滑膜中，進(jìn)一步激活補(bǔ)體系統(tǒng)，引發(fā)炎癥和組織損傷。隨著炎癥的持續(xù)和加重，關(guān)節(jié)滑膜逐漸增厚，形成血管翳，侵蝕軟骨和骨組織，導(dǎo)致關(guān)節(jié)畸形和功能障礙。

【銀屑病】

銀屑?。≒soriasis）俗稱“牛皮癬”，是一種由環(huán)境因素刺激、多基因遺傳控制、免疫介導(dǎo)的慢性、復(fù)發(fā)性、炎癥性、系統(tǒng)性疾病，無傳染性，需終身治療，嚴(yán)重影響患者的身心健康和生活質(zhì)量。

流行病學(xué)：2008年中國(guó)6省市銀屑病流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果為0.47%，歐美國(guó)家的患病率為2% ~ 4%，可發(fā)生于任何年齡，約2/3的患者在40歲以前發(fā)病。大部分患者冬重夏輕，部分患者無明顯季節(jié)性。

臨床表現(xiàn)：典型臨床表現(xiàn)為局限或廣泛分布的鱗屑性紅斑或斑塊，可伴有瘙癢、疼痛等不適癥狀，最常累及頭皮、肘膝、小腿、臀部等部位，也可波及指（趾）甲。

發(fā)病機(jī)制：銀屑病的確切病因與發(fā)病機(jī)制尚未完-全闡明。發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜,通常是遺傳背景、環(huán)境誘因、免疫應(yīng)答異常等因素相互作用，最終導(dǎo)致角質(zhì)形成細(xì)胞異常增殖和/或關(guān)節(jié)滑膜細(xì)胞與軟骨細(xì)胞的炎癥反應(yīng)。PBMC在銀屑病的發(fā)病機(jī)制中有重要作用（圖3）。

圖3 銀屑病發(fā)病機(jī)制（來源：Inflammation and Psoriasis: A Comprehensive Review）

在銀屑病發(fā)病機(jī)制中重要的細(xì)胞是樹突狀細(xì)胞（DC)、Th17、Th1和角質(zhì)形成細(xì)胞。DC被各種刺激激活過度產(chǎn)生和分泌TNF-α和IL-23也包括IL-12。IL-23誘導(dǎo)幼稚T細(xì)胞分化為Th17?；罨腡h17細(xì)胞過度產(chǎn)生IL-17和IL-22。TNF-a 和 IL-17 激活角質(zhì)形成細(xì)胞，促進(jìn)表皮增生，募集炎癥細(xì)胞（如中性粒細(xì)胞），并誘導(dǎo)抗菌肽 （AMP） 的產(chǎn)生。DC產(chǎn)生的IL-12也誘導(dǎo)Th1，Th1產(chǎn)生細(xì)胞因子，包括IFN-γ。這種不規(guī)則的免疫反應(yīng)隨著TNF-α激活樹突狀細(xì)胞而持續(xù)。

此外，有相關(guān)研究顯示[4]，銀屑病患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞和Tregs細(xì)胞的頻率與正常人相當(dāng)，而Th17細(xì)胞、Tc1細(xì)胞和Tc17細(xì)胞的頻率在銀屑病患者中升高。銀屑病患者外周血NKT細(xì)胞和CD69+iNKT細(xì)胞頻率明顯降低。這些研究結(jié)果提示PBMC中這些細(xì)胞亞群可能在銀屑病的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮著重要作用。

三、白血病與PBMC的研究

除了和自身免疫性疾病息息相關(guān)外，PBMC作為外周血中重要的細(xì)胞群，在血液系統(tǒng)相關(guān)疾病中也有重要的作用，比如白血病。白血?。╨eukemia）是一種源于造血干細(xì)胞的惡性克隆性疾病，其特征是白血病細(xì)胞在骨髓和其他造血組織中的異常增殖，這導(dǎo)致正常造血功能受到抑制并可能浸潤(rùn)到其他器官。根據(jù)細(xì)胞分化程度和病程，白血病可分為急性和慢性，以及淋巴細(xì)胞和非淋巴細(xì)胞白血病。常見類型包括急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL）、急性髓系白血?。ˋML）、慢性髓系白血?。–ML） 和慢性淋巴細(xì)胞白血?。–LL）。

流行病學(xué)：我國(guó)AML的發(fā)病率約為1.62/10萬，而ALL則約為0.69/10萬。成人以AML多見，兒童以ALL多見。2022年9月，首-個(gè)針對(duì)中國(guó)兒童和青少年癌癥發(fā)病率和衛(wèi)生服務(wù)可及性現(xiàn)狀的研究在《Lancet》發(fā)表，研究稱，2018~2020年，在兒童所有惡性腫瘤中，白血病的發(fā)病率排-名第-一，發(fā)病率為42.33/百萬；在青少年所有惡性腫瘤中，白血病發(fā)病率排-名第-二，發(fā)病率為30.08/百萬。

臨床表現(xiàn)：貧血、出血、發(fā)熱、疲乏、體重減輕、面色蒼白、瘀斑、淋巴結(jié)和肝脾腫大、骨骼和關(guān)節(jié)腫痛、呼吸困難、眩暈、心悸和反復(fù)感染。

發(fā)病機(jī)制：白血病的發(fā)病機(jī)制涉及多個(gè)方面，包括遺傳因素、物理因素、化學(xué)因素、病毒感染以及免疫功能異常等。白血病患者PBMC中的淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的功能狀態(tài)、數(shù)量比例等可能會(huì)發(fā)生改變。研究人員對(duì)AML患者和正常人外周血樣本中各類免疫細(xì)胞占比進(jìn)行統(tǒng)計(jì)（圖4與圖5），結(jié)果顯示AML 患者中占比較高的免疫細(xì)胞類型是單核細(xì)胞（紫色），且淋巴細(xì)胞比例顯著下降。

圖4 AML患者外周血各類免疫細(xì)胞占比

圖5 正常人外周血各類免疫細(xì)胞占比（來源：基于單細(xì)胞測(cè)序的急性髓系白血病免疫細(xì)胞異質(zhì)性研究）

綜上所述，外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）在自身免疫性疾病（如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和銀屑病等）及白血病等疾病的發(fā)病機(jī)制中扮演著重要的角色，這也使得PBMC成為研究這些疾病的重要的原材料。通過研究疾病狀態(tài)下PBMC中不同免疫細(xì)胞的功能狀態(tài)和數(shù)量改變，有助于深入了解自身免疫性疾病及白血病的發(fā)生和發(fā)展，并為該類疾病的診斷、靶向治療和預(yù)后評(píng)估提供理論依據(jù)。

四、IPHASE相關(guān)產(chǎn)品

鑒于此，IPHASE作為體外研究生物試劑引-領(lǐng)者，憑借先進(jìn)的設(shè)備，專業(yè)的技術(shù)人員和多年研發(fā)的經(jīng)驗(yàn)，繼推出健康人、猴、犬、大鼠、小鼠、豬、兔、貓等不同種屬的PBMC后，又開發(fā)出系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病及白血病等病人的PBMC，可為該類疾病的研究提供重要的生物學(xué)材料。

【人PBMC產(chǎn)品】

 健康人PBMC、系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人PBMC、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎病人PBMC、銀屑病病人PBMC、白血病病人PBMC

【動(dòng)物PBMC產(chǎn)品】

猴PBMC、犬PBMC、大鼠PBMC、小鼠PBMC、小型豬PBMC、兔PBMC、貓PBMC

IPHASE/匯智和源憑借多年的研發(fā)經(jīng)驗(yàn)，推出了多領(lǐng)域、多種類的高-端科研試劑，為藥物早期研發(fā)提供篩選工具，為生命科學(xué)領(lǐng)域的探索提供新材料、新方法和新手段，為食品、藥品、化學(xué)品等的遺傳毒性研究提供便捷產(chǎn)品，望廣大科研工作者咨詢。

參考資料：

[1] Laurent Arnaud , Fran?ois Chasset , Thierry Martin. Immunopathogenesis of systemic lupus erythematosus: An update. Autoimmun Rev. 2024, 23(10):103648.

[2] Yen-Ju Lin , Martina Anzaghe , Stefan Schülke. Update on the Pathomechanism, Diagnosis, and Treatment Options for Rheumatoid Arthritis. Cells. 2020, 9(4):880.

[3] Alessandra-M?d?lina Man , Meda Sandra Or?san , Oana-Alina Hoteiuc, etc. Inflammation and Psoriasis: A Comprehensive Review.Int J Mol Sci. 2023,24(22):16095.

[4] Yifan Hu , Youdong Chen , Zeyu Che,etc. Dysregulated Peripheral Invariant Natural Killer T Cells in Plaque Psoriasis Patients.Front Cell Dev Biol. 2022, 9:799560.

[5] 李天欣. 基于單細(xì)胞測(cè)序的急性髓系白血病免疫細(xì)胞異質(zhì)性研究[D]. 哈爾濱工業(yè)大學(xué). 2020.

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• PBMC丨PBMC細(xì)胞丨外周血單個(gè)核細(xì)胞

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