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凝膠成像系統(tǒng)七大作用
閱讀：5114 發(fā)布時(shí)間：2019-10-12
凝膠成像系統(tǒng)七大作用：
1、圖象攝取
凝膠成像系統(tǒng)采用數(shù)碼攝影將攝取的圖象直接輸入計(jì)算機(jī)系統(tǒng)。在暗箱中的紫外燈照射下，通過(guò)調(diào)節(jié)變焦光圈、變焦倍數(shù)及焦距使樣品清晰及大小適當(dāng)。圖象攝取獲得以后，通過(guò)圖象處理軟件軟件中圖象處理菜單的“亮度”和“優(yōu)化”項(xiàng)進(jìn)行亮度調(diào)整和圖象優(yōu)化，以降低圖象本底噪聲。
凝膠成像系統(tǒng)經(jīng)過(guò)這樣處理以后能得到清晰的凝膠圖片，同時(shí)在圖象中加入文字信息進(jìn)行適當(dāng)注釋?zhuān)脽崦舸蛴C(jī)或現(xiàn)在常用的高品質(zhì)照片級(jí)噴墨打印機(jī)打印以后，可以得到符合文章發(fā)表要求的照片打印。
2、分子量定量
對(duì)于一般常用的DNA膠片，利用凝膠成像系統(tǒng)的圖象處理軟件中分子量定量功能，通過(guò)對(duì)膠上DNAMarker條帶的已知分子量注釋?zhuān)詣?dòng)生成擬合曲線，并以它衡量得到未知條帶的分子量。通過(guò)這種方法所得到的結(jié)果較肉眼觀察估計(jì)要準(zhǔn)確很多。
3、密度定量
一般常用的測(cè)定DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)濃度的方法是紫外吸收法，但它只能測(cè)定樣品中的總核苷酸濃度，而不能區(qū)分各個(gè)長(zhǎng)度片段的濃度。但利用凝膠成像系統(tǒng)和圖象處理軟件軟件，對(duì)于DNA膠片上某一已知其DNA含量的標(biāo)準(zhǔn)條帶，在調(diào)節(jié)閥值和積分框并進(jìn)行密度標(biāo)定以后，可以方便的單擊其他未知條帶根據(jù)其光密度值得到其DNA含量。
凝膠成像系統(tǒng)比紫外吸收法方便，可以測(cè)出不同長(zhǎng)度的片段的含量，而所得結(jié)果對(duì)于分子生物學(xué)操作要求的準(zhǔn)確度是足夠的。值得指出的是，凝膠成像系統(tǒng)也適用于對(duì)PAGE蛋白膠條帶的濃度測(cè)定。
4、密度掃描
在分子生物學(xué)和生物工程研究中，常用到的是對(duì)蛋白表達(dá)產(chǎn)物占整個(gè)菌體蛋白的百分含量的計(jì)算。傳統(tǒng)的方法是利用的密度掃描，但利用生物分析軟件結(jié)合現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)配備的掃描儀或者直接用白光照射的凝膠成像系統(tǒng)就能完成此項(xiàng)工作。
選擇凝膠成像系統(tǒng)的密度掃描命令，可以將代表某一微生物菌株的泳道圖象用虛線框住以后，即可得到對(duì)此區(qū)域的縱向掃描曲線圖。一般選擇自動(dòng)積分選項(xiàng)可以自動(dòng)計(jì)算出對(duì)應(yīng)于各個(gè)膠帶的每個(gè)峰面積相對(duì)于整個(gè)曲線所占的百分比，也可以選手動(dòng)積分，人工選擇積分區(qū)域，對(duì)于某些條帶較弱，本底較高的圖譜可以進(jìn)行基線調(diào)整，在誤差的允許范圍內(nèi)得到更佳的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
5、PCR定量
PCR定量主要是指，當(dāng)做PCR實(shí)驗(yàn)時(shí)如果擴(kuò)增出來(lái)的條帶不是一條時(shí)，利用此命令可以計(jì)算出各個(gè)條帶占總體的相對(duì)百分?jǐn)?shù)，凝膠成像系統(tǒng)這個(gè)功能與密度掃描類(lèi)似，但實(shí)際在原理上并不相同。PCR定量并不對(duì)選擇區(qū)域生成縱向掃描曲線圖并積分，而是對(duì)選定的幾條帶進(jìn)行相對(duì)密度定量并計(jì)算其占總和的百分?jǐn)?shù)。
凝膠成像系統(tǒng)在分子生物學(xué)和生物工程研究中幾乎每天都要遇到的研究工作中所具有的功能，由于結(jié)合生物處理軟件可以覆蓋現(xiàn)代生物科學(xué)日常研究的各個(gè)領(lǐng)域并能夠取代某些實(shí)驗(yàn)設(shè)備，凝膠成像系統(tǒng)應(yīng)該是現(xiàn)代分子生物學(xué)和其他生物科學(xué)實(shí)驗(yàn)室的常備儀器，不僅如此，它也能用于醫(yī)學(xué)臨床檢驗(yàn)。