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如何選擇適用的液相色譜柱

閱讀：497 發(fā)布時(shí)間：2024-12-13

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液相色譜柱是一種高純度、大比表面積、高機(jī)械強(qiáng)度、較高的碳鏈覆蓋率的新一代球形硅膠填料。金屬不純物含量極低，減少了有些螯合物在硅膠基質(zhì)柱上的絡(luò)合作用。固定相極性弱于流動(dòng)相時(shí)的液相色譜法被稱為反相色譜法，固定相極性強(qiáng)于流動(dòng)相時(shí)的液相色譜法被稱為正相色譜法。固定相被涂覆在載體表面，極易流失，為此科學(xué)家對(duì)流動(dòng)相使用給出了合理的建議：流動(dòng)相極性與固定液極性應(yīng)具有較大差別，以減少固定液流失。

在選擇色譜柱之前，先多了解自己的樣品和雜質(zhì)，他們的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等：

1.如果樣品極性太強(qiáng)，或酸性太強(qiáng)；可以選擇CN，NH2或硅膠柱，HILIC（親水色譜），也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱（缺點(diǎn)是離子對(duì)試劑平衡時(shí)間長，對(duì)流動(dòng)相pH要求比較精密，否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn)，另外離子對(duì)試劑很難洗下來，基本上用了離子對(duì)的色譜柱就不能再用于其它實(shí)驗(yàn)）。

2.若樣品是堿性的；可選擇高純硅膠柱（高純硅膠缺少金屬雜質(zhì)，且硅膠端基封尾）或一些經(jīng)過修飾的C18柱（如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等），他們都會(huì)減少堿性化合物的拖尾，一般會(huì)選擇中性或偏堿的條件下做，因?yàn)檫@樣可增加堿性樣品的保留。

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