1100 LC維護(hù)保養(yǎng)知識

1、  色譜柱長時(shí)間不用，存放時(shí)，柱內(nèi)應(yīng)充滿溶劑，兩端封死（如ACN適于反相色譜柱，正相色譜柱用相應(yīng)的有機(jī)相）

2、  對于手動(dòng)進(jìn)樣器，當(dāng)使用緩沖溶液時(shí)，要用水沖洗進(jìn)樣口，同時(shí)搬動(dòng)進(jìn)樣閥數(shù)次，每次數(shù)毫升。

 *3、流動(dòng)相使用前必須過濾，不要使用多日存放的蒸餾水（易長菌）。

 *4、帶seal-wash的 1100，要配制90%水+10%異丙醇，以每分2—3滴的速度虹吸排出，溶劑不能干涸。

  5、其它主意事項(xiàng)見說明書，或由現(xiàn)場工程師介紹。

         維護(hù)知識問答 

   1、 為什么溶劑和樣品要過濾?

    溶劑和樣品過濾非常重要，它會對色譜柱、儀器起到保護(hù)作用，消除由于污染對分析結(jié)果的影響。

色譜柱：由于填料顆粒很細(xì)，色譜柱內(nèi)腔很小，溶劑和樣品中的細(xì)小顆粒會使色譜柱和毛細(xì)管容易堵塞。

儀器：溶劑和樣品中的細(xì)小顆粒會增加進(jìn)樣閥的堵塞和磨損，同時(shí)也會增加泵頭內(nèi)的藍(lán)寶石活塞桿和活塞的磨損。

樣品過濾頭的類型：

30mm內(nèi)徑：適用于大進(jìn)樣量的過濾，由0.2µm和0.45µm兩種規(guī)格,材料有纖維素,醋酸纖維,聚四氟乙烯。處理樣品體積少于50µl。

13mm內(nèi)徑：適用于范圍廣的過濾，由0.2µm和0.45µm兩種規(guī)格,材料為纖維素。

3mm內(nèi)徑：適用于小進(jìn)樣量的過濾，由0.2µm和0.45µm兩種規(guī)格。處理樣品體積為7µl。

濾膜類型：

聚四氟乙烯濾膜：適用于所有溶劑，酸和鹽，并無任何可溶物。

醋酸纖維濾膜：不適用于有機(jī)溶劑，特別適用于水基溶液，推薦  用于蛋白質(zhì)和其相關(guān)樣品。

尼龍66濾膜：適用于絕大多數(shù)有機(jī)溶劑和水溶液，可用于強(qiáng)酸，70%乙醇、二氯甲烷、不適用于二甲基甲酰胺。

再生纖維素濾膜：具有蛋白吸收低，同樣適用水溶性樣品和有機(jī)溶劑。

2、  為什么HPLC用緩沖鹽時(shí)要加在線Seal-wash選項(xiàng)？

    HPLC用緩沖鹽時(shí),由于泵頭內(nèi)的緩沖鹽溶液存在高壓析鹽現(xiàn)象,析出的細(xì)小鹽粒非常堅(jiān)硬,它附著在藍(lán)寶石活塞桿上,隨著藍(lán)寶石活塞桿的往復(fù)運(yùn)動(dòng),容易產(chǎn)生劃痕,并磨損密封墊,造成漏液等故障現(xiàn)象。在線Seal-wash選項(xiàng)能有效的帶走可能存在的緩沖鹽結(jié)晶。緩沖鹽的濃度在0.1mol或大于0.1mol時(shí),必須使用該在線沖洗選項(xiàng).

清洗液配制:  90%水+10%異丙醇.該混合液可抑制菌類生長和減小水的表面張力。以2-3滴/min的速度虹吸流下，不能干涸。

3、  為什么 1100LC的流動(dòng)相管路非常細(xì)?

    在使用HPLC時(shí),應(yīng)特別注意”柱外效應(yīng)”對分析結(jié)果的影響，由于樣品分子在液體流動(dòng)相中的擴(kuò)散系數(shù)比在氣體中小4~5個(gè)數(shù)量級，液體流動(dòng)相的流速也比氣相慢1-2個(gè)數(shù)量級。因此，樣品進(jìn)入色譜柱后，在柱子以外的任何死體積（進(jìn)樣器、柱接頭、連接管、檢測器）中，樣品分子的擴(kuò)散和滯留，都會引起色譜峰的展寬，而使柱效降低。為使柱外效應(yīng)減之更小，獲得理想的分析結(jié)果， 1100LC 使用加工工藝難度高的毛細(xì)管線作為流動(dòng)相管路。

毛細(xì)管線分類：0.17mm內(nèi)徑 ------綠色 ;0.12mm內(nèi)徑-------紅色。             

  PEEK 管線：內(nèi)徑 -----0.13mm;0.18mm;0.25mm;0.5mm。

 毛細(xì)管線優(yōu)點(diǎn): 柔韌性好.

*** 公司同時(shí)備有1/16in 的粗外徑毛細(xì)管線,適用于不同習(xí)慣的用戶 ,優(yōu)點(diǎn)是剛性好,但柔韌性差一些。 

4、  流動(dòng)相使用前為什么要脫氣？

    流動(dòng)相使用前必須進(jìn)行脫氣處理 ，以除去其中溶解的氣體（如O2），以防止在洗脫過程中當(dāng)流動(dòng)相由色譜柱流至檢測器時(shí)，因壓力降低而產(chǎn)生氣泡。氣泡會增加基線的噪音，造成靈敏度下降，甚至無法分析。溶解的氧氣還會導(dǎo)致樣品中某些組份被氧化，柱中固定相發(fā)生降解而改變柱的分離性能。若用FLD，可能會造成熒光猝滅。

常用的脫氣方法比較： 

氦氣脫氣法：利用液體中氦氣的溶解度比空氣低，連續(xù)吹氦脫氣，效果較好，但成本高。

加熱回流法：效果較好，但操作復(fù)雜，且有毒性揮發(fā)污染。

抽真空脫氣法：易抽走有機(jī)相。

超聲脫氣法：流動(dòng)相放在超聲波容器中，用超聲波振蕩10- 15min，此法效果更差。

在線真空脫氣法：1100LC真空脫機(jī)利用膜滲透技術(shù)， 在線脫氣，智能控制，無需額外操作，成本低，脫氣效果明顯優(yōu)于以上幾種方法，并適用于多元溶劑體系。

5、如何防止溶劑瓶內(nèi)溶劑過濾器的堵塞，以及堵塞后的處理？

    溶劑的質(zhì)量或污染以及藻類的生長會堵塞溶劑過濾器，從而影響泵的運(yùn)行，尤其水溶液或磷酸鹽緩沖液（PH=4—7）。以下幾種方法可以有效防止溶劑瓶內(nèi)溶劑過濾器的堵塞。

A：請嚴(yán)格執(zhí)行溶劑過濾。

B：請勿使用多日存放的蒸餾水及磷酸鹽緩沖液

C：如果應(yīng)用許可，可在溶劑中加入0.0001---0.001M的*. 

D:在溶劑瓶內(nèi)溶劑的上方小流量連續(xù)吹氬氣,以隔絕空氣。

E：避免使溶劑瓶暴露在直射陽光下，盡量使用琥珀色的溶劑瓶盛放水溶液或磷酸鹽緩沖液。

堵塞后的處理法方法：

將過濾頭從組件中取下，在濃硝酸（35%）中浸泡1h，然后用二次蒸餾水沖洗干凈并超聲處理。 

6、   1100LC泵如何維護(hù)？

 1100LC泵給色譜柱提供穩(wěn)定、無脈動(dòng)、流量準(zhǔn)確的流動(dòng)相，及時(shí)合理的維護(hù)非常重要。

A：流動(dòng)相使用前請必須脫氣、過濾。

B：使用緩沖鹽時(shí)，要加在線Seal-wash選項(xiàng)。

C：關(guān)機(jī)前，用水沖洗系統(tǒng)20分鐘，然后用有機(jī)溶劑沖洗系統(tǒng)10分鐘（如甲醇），然后關(guān)泵，（適于反相色譜柱）。[正相色譜柱用適當(dāng)?shù)娜軇_洗]

    D：及時(shí)更換Purge Valve內(nèi)的過濾芯。（當(dāng)打開Purge Valve時(shí)，壓力高于10bar，表明過濾芯已堵）。E：使用合適的密封圈。

7、    如何選擇合適的泵頭活塞密封圈？

    泵頭活塞的標(biāo)準(zhǔn)密封圈能適合于大多數(shù)應(yīng)用，但使用正相溶劑（如正己烷），不適合使用標(biāo)準(zhǔn)活塞密封圈，特別是長時(shí)間使用時(shí)，需更換另一種不同的密封圈，我們建議使用聚四氟乙烯密封圈。（p/n0905-1420  2/pk）

***注意：聚四氟乙烯密封圈的壓力范圍為：0—200bar；建議在泵的壓力限制中，將更大壓力設(shè)為200bar。

8、     使用梯度比例發(fā)時(shí)要注意那些事項(xiàng)？

    當(dāng)鹽溶液與有機(jī)溶劑溶液混合時(shí)，鹽溶液能與有機(jī)溶劑溶液*混溶，而不會出現(xiàn)沉淀。但是在比例閥的混合點(diǎn)，重力作用使鹽顆粒沉淀下來，通常，閥A接水相/鹽溶液，D接有機(jī)溶劑，此法連接可有效使鹽回落到鹽溶液中，并被溶解。若顛倒過來，鹽可能落在有機(jī)溶劑中，出現(xiàn)問題。

強(qiáng)烈建議：當(dāng)使用緩沖鹽溶液和有機(jī)溶劑時(shí)，推薦將緩沖鹽通道接在A通道上，有機(jī)溶劑通道直接接在A通道的上方D通道上；定期用水沖洗所有的通道，以除去閥口上可能出現(xiàn)的鹽沉淀。

9、      在線真空脫氣機(jī)使用要注意那些事項(xiàng)？

    一般來說， 1100LC 的真空脫氣機(jī)無需過多維護(hù)，只需注意幾個(gè)注意事項(xiàng)就可以了。

A：*次使用，要用隨儀器附帶的注射器抽滿脫氣機(jī)腔體；更換不同類型的溶劑時(shí)，要先抽空，再抽滿。

B：不用的通道要充滿溶劑或密閉起來。

10、     更換色譜柱時(shí)要注意什么事項(xiàng)?

在使用HPLC時(shí),應(yīng)特別注意”柱外效應(yīng)”對分析結(jié)果的影響，由于樣品分子在液體流動(dòng)相中的擴(kuò)散系數(shù)比在氣體中小4~5個(gè)數(shù)量級，液體流動(dòng)相的流速也比氣相慢1-2個(gè)數(shù)量級。因此，樣品進(jìn)入色譜柱后，在柱子以外的任何死體積（進(jìn)樣器、柱接頭、連接管、檢測器）中，樣品分子的擴(kuò)散和滯留，都會引起色譜峰的展寬，而使柱效降低 。為使柱外效應(yīng)減之更小，獲得理想的分析結(jié)果，儀器的流動(dòng)相管路連接非常重要,一般 1100LC 在*次安裝時(shí),均有受過專業(yè)培訓(xùn)的安裝工程師負(fù)責(zé)安裝,各種接頭會處理的非常。客戶只需在更換色譜柱時(shí)注意接頭處理就可以了，一般柱子入口接頭為不銹鋼卡套接頭，柱子出口為不銹鋼卡套接頭或PEEK管線手?jǐn)Q街頭，當(dāng)完成*次安張后，不銹鋼卡套已固定死，當(dāng)接不同的柱子時(shí)，要注意柱子接頭處的形狀和長度，否則會產(chǎn)生一個(gè)非常大的死體積。

11、     手動(dòng)進(jìn)樣閥需做那些維護(hù)，使用時(shí)要注意什么？

對于手動(dòng)進(jìn)樣器，當(dāng)使用緩沖溶液后，或者進(jìn)濃度差異比較大的樣品時(shí)要用工具而不是用帶針頭的注射器沖洗進(jìn)樣口，同時(shí)搬動(dòng)進(jìn)樣閥數(shù)次，每次數(shù)毫升。

注意事項(xiàng)：

●    安裝時(shí)六通閥的5，6出口要與注射器在同一水平線上，以防止虹吸現(xiàn)象的發(fā)生，導(dǎo)致進(jìn)樣量的重復(fù)性變異。

●       進(jìn)樣量的多少要根據(jù)定量管的LOOP體積決定。

當(dāng)樣品量少時(shí)：  進(jìn)樣體積由注射器的進(jìn)樣體積決定，但更大進(jìn)樣體積 要小于1/2loop體積。

當(dāng)樣品量較多時(shí)：進(jìn)樣體積由定量管的體積決定，為保證樣品*把定量管的流動(dòng)相置換干凈，需注射5—6倍的LOOP體積。

●      C：要使用的液相注射器進(jìn)樣，不可以用氣相的注射器。