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蛋白質(zhì)印跡(WB)是把電泳分離的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到固定基質(zhì)上，然后利用抗原抗體反應(yīng)來檢測(cè)特異性的蛋白分子的技術(shù)，包括三個(gè)部分：SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳，蛋白質(zhì)的電泳轉(zhuǎn)移，免疫印跡分析。

固相載體表面（如ELISA板，NC膜或者PVDF膜上等）有很多洞洞，通過電轉(zhuǎn)或包被，膠上的蛋白被轉(zhuǎn)移到了膜上，或抗原/抗體固定在板上，蛋白以機(jī)械填補(bǔ)（堆積）和吸附的方式結(jié)合于表面。蛋白塞進(jìn)了表面的很多洞洞里面，但蛋白并不是連續(xù)的，有很多空隙，而且比如說樣品孔之間也有空隙，這些洞洞并沒有填進(jìn)東西，而抗體也是蛋白，也會(huì)被吸附在空的洞里，這樣，就會(huì)有很多非特異性的信號(hào)。封閉液中的蛋白可以與表面上的空白位置結(jié)合，同樣以機(jī)械填補(bǔ)（堆積）和吸附覆蓋的方式結(jié)合在膜上，因?yàn)橛?ldquo;填補(bǔ)”和“覆蓋”蛋白結(jié)合位點(diǎn)以避免一抗的非特異結(jié)合，所以有“封閉”的說法。同樣這兩種作用使封閉液中的蛋白能夠很牢固的結(jié)合在空白位置上。這樣，抗體蛋白就不會(huì)被非特異性的吸附到膜上，而只會(huì)跟特異性蛋白結(jié)合。封閉劑應(yīng)封閉所有的未結(jié)合位點(diǎn)而不替換表面上的靶蛋白、不結(jié)合靶蛋白表位、也不與抗體或檢測(cè)試劑有交叉反應(yīng)，

封閉所用試劑有：BSA, 血清, 脫脂奶粉, 酪蛋白和無蛋白化合物。

KPL為提供了各種WB試劑盒，包括化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)和顯色系統(tǒng)，試劑盒中提供了除雜交膜和一抗外的所有試劑，包括：二抗，抗體稀釋液、封閉液、洗液和底物等，優(yōu)質(zhì)的試劑與優(yōu)化的操作程序?yàn)?的WB提供了保證。其中KPL可供選擇的高性能封閉產(chǎn)品有：

KPL  50-61-00 10% BSA Diluent/Blocking Solution    200 mL  

KPL  50-61-10 10% BSA Diluent/Blocking Solution    1 L     

KPL  50-82-01 Milk Diluent/Blocking Concentrate Kit 200 mL  

KPL  71-83-00 5X Detector Block  240 mL

BSA是zui常用的封閉劑，成分單一適用于大多數(shù)情況。

KPL的產(chǎn)品10% BSA Diluent/Blocking（50-61-00）具有雙重的作用。作為封閉試劑，它可以在主要抗原或抗體結(jié)合到固相表面上以后，與任何剩余蛋白結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合。作為抗原，抗體和其他蛋白質(zhì)的稀釋劑，它可以確保與這些反應(yīng)物之間的以及與固相表面的之間的zui小非特異性反應(yīng)。其主要成分是：10% BSA Diluent/Blocking Solution contains 10% Bovine  Serum Albumin (BSA) in a phosphate buffer

使用比例：

Blotting

Blocking 1:10

(i.e. 1 mL 10% BSA Diluent/Blocking Solution + 9 mL water)

Diluent1:10

(i.e. 1 mL 10% BSA Diluent/Blocking Solution + 9 mL water)

KPL  的產(chǎn)品Milk Diluent/Blocking Concentrate Kit（50-82-01）也是具有和以上試劑雙重的作用，其主要成分是： Milk Diluent/Blocking Solution Concentrate contains 2% non-fat dry milk in a borate buffer.

使用比例：

Blotting

Blocking 1:10

(i.e. 1 mL Milk Diluent/Block + 9 mL water)

Diluent 1:20

(i.e. 1 mL Milk Diluent/Block +19 mL water)

KPL  的產(chǎn)品Detector Block（71-83-00）既可以作為封閉試劑也可以在膜檢測(cè)化驗(yàn)中用作共軛稀釋劑，作為封閉試劑，它可以阻止膜優(yōu)先于共軛酶結(jié)合從而阻止了非特異性背景的發(fā)生。Detector Block專門為此制定了在膜的較高敏感背景下與非特異性位點(diǎn)zui小的交叉反應(yīng)。作為共軛蛋白質(zhì)和抗體的稀釋劑，它zui大限度地減少本身和膜，及其他蛋白質(zhì)的非特異性結(jié)合的共軛。

其主要成分是：5X Detector Block Solution is supplied as a concentrated liquid，使用詳見說明書。

KPL公司是美國(guó)zui早實(shí)現(xiàn)親和素純化二抗商業(yè)化的生物公司，同時(shí)也是世界上zui大的二抗和底物顯色系統(tǒng)的生產(chǎn)商。其可以提供高質(zhì)量的用于分子生物學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)和體外診斷試劑，其產(chǎn)品有：親和純化的抗體和偶聯(lián)物、ELISA和雜交底物、蛋白檢測(cè)和純化試劑盒、核酸標(biāo)記和檢測(cè)試劑以及其它輔助試劑等。

KPL為我們的客戶提供他們所需的*品質(zhì)的產(chǎn)品.西美杰將一如既往的為您提供的植物學(xué)相關(guān)產(chǎn)品和高品質(zhì)的產(chǎn)品技術(shù)服務(wù)。我們能為您提供一站式的產(chǎn)品及實(shí)驗(yàn)解決方案。如果您對(duì)我們的產(chǎn)品感興趣，請(qǐng)致電/9569/8795/4237到西美杰科技有限公司垂詢植物學(xué)相關(guān)的實(shí)驗(yàn)解決方案，或者問詢您所感興趣的產(chǎn)品類型。