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氣相色譜分析法—內(nèi)標(biāo)物的選擇

時(shí)間:2009-11-17閱讀:13743
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一.什么叫內(nèi)標(biāo)法?怎樣選擇內(nèi)標(biāo)物?

      內(nèi)標(biāo)法是一種間接或相對(duì)的校準(zhǔn)方法。在分析測(cè)定樣品中某組分含量時(shí),加入一種內(nèi)標(biāo)物質(zhì)以校誰(shuí)和消除出于操作條件的波動(dòng)而對(duì)分析結(jié)果產(chǎn)生的影響,以提高分析結(jié)果的準(zhǔn)確度。 內(nèi)標(biāo)法在氣相色譜定量分析中是一種重要的技術(shù)。使用內(nèi)標(biāo)法時(shí),在樣品中加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),它可被色譜拄所分離,又不受試樣中其它組分峰的干擾,只要測(cè)定內(nèi)標(biāo)物和待測(cè)組分的峰面積與相對(duì)響應(yīng)值,即可求出待測(cè)組分在樣品中的百分含量。采用內(nèi)標(biāo)法定量時(shí),內(nèi)標(biāo)物的選擇是一項(xiàng)十分重要的工作。理想地說(shuō),內(nèi)標(biāo)物應(yīng)當(dāng)是一個(gè)能得到純樣的己知化合物,這樣它能以準(zhǔn)確、已知的量加到樣品中去,它應(yīng)當(dāng)和被分析的樣品組分有基本相同或盡可能一致的物理化學(xué)性質(zhì)(如化學(xué)結(jié)構(gòu)、極性、揮發(fā)度及在溶劑中的溶解度等)、色譜行為和響應(yīng)特征,是被分析物質(zhì)的一個(gè)同系物。當(dāng)然,在色譜分析條什下,內(nèi)標(biāo)物必須能與樣品中各組分充分分離。需要指出的是,在少數(shù)情況下,分析人員可能比較關(guān)心化臺(tái)物在一個(gè)復(fù)雜過(guò)程中所得到的回收率,此時(shí),他可以使用一種在這種過(guò)程中很容易被*回收的化臺(tái)物作內(nèi)標(biāo),來(lái)測(cè)定感興趣化合物的百分回收率,而不必遵循以上所說(shuō)的選擇原則。 在使用內(nèi)標(biāo)法定量時(shí),有哪些因素會(huì)影響內(nèi)標(biāo)和被測(cè)組分的峰高或峰面積的比值? 影響內(nèi)標(biāo)和被測(cè)組分峰高或峰面積比值的因素主要有化學(xué)方面的、色譜方面的和儀器方面的三類。 由化學(xué)方面的原因產(chǎn)生的面積比的變化常常在分析重復(fù)樣品時(shí)出現(xiàn)。 化學(xué)方面的因素包括: 1、內(nèi)標(biāo)物在樣品里混合不好; 2、內(nèi)標(biāo)物和樣品組分之間發(fā)生反應(yīng), 3、內(nèi)標(biāo)物純度可變等。 對(duì)于一個(gè)比較成熟的方法來(lái)說(shuō),色譜方面的問(wèn)題發(fā)生的可能性更大一些,色譜上常見(jiàn)的一些問(wèn)題(如滲漏)對(duì)面積的影響比較大,對(duì)面積比的影響則要小一些,但如果面積的變化已大到足以使面積比發(fā)生顯著變化的程度,那么一定有某個(gè)重要的色譜問(wèn)題存在,比如進(jìn)樣量改變太大,樣品組分濃度和內(nèi)標(biāo)濃度之間有很大的差別,檢測(cè)器非線性等。進(jìn)樣量應(yīng)足夠小并保持不變,這樣才不致于造成檢測(cè)器和積分裝置飽和。如果認(rèn)為方法比較可靠,而色譜固看來(lái)也是正常的話,應(yīng)著重檢查積分裝置和設(shè)置、斜率和峰寬定位。對(duì)積分裝置發(fā)生懷疑的zui有力的證據(jù)是:面積比可變,而峰高比保持相對(duì)恒定, 在制作內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)應(yīng)注意什么? 在用內(nèi)標(biāo)法做色話定量分析時(shí),先配制一定重量比的被測(cè)組分和內(nèi)標(biāo)樣品的混合物做色譜分析,測(cè)量峰面積,做重量比和面積比的關(guān)系曲線,此曲線即為標(biāo)準(zhǔn)曲線。在實(shí)際樣品分析時(shí)所采用的色譜條件應(yīng)盡可能與制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)所用的條件一致,因此,在制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí),不僅要注明色譜條件(如固定相、柱溫、載氣流速等),還應(yīng)注明進(jìn)樣體積和內(nèi)標(biāo)物濃度。在制作內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí),各點(diǎn)并不*落在直線上,此時(shí)應(yīng)求出面積比和重量比的比值與其平均位的標(biāo)準(zhǔn)偏差,在使用過(guò)程中應(yīng)定期進(jìn)行單點(diǎn)校正,若所得值與平均值的偏差小于2,曲線仍可使用,若大于2,則應(yīng)重作曲線,如果曲線在鉸短時(shí)期內(nèi)即產(chǎn)生變動(dòng),則不宜使用內(nèi)標(biāo)法定量。

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