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北京迪科馬科技有限公司(迪馬科技)

使用固相萃取方法進(jìn)行樣品凈化處理效果不理想怎么辦?

時間:2020-7-13 閱讀:2159
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固相萃取是基于色譜分離的樣品前處理方法,是近年來應(yīng)用較為普遍成熟的樣品預(yù)處理方法。固相萃取凈化效果不理想應(yīng)怎樣改善?建議從以下幾點(diǎn)考慮:

1、凈化模式的改進(jìn)
通常而言采用保留目標(biāo)化合物的模式比保留雜質(zhì)的模式凈化效果好,如果正在分析的項目為某一種或某一類化合物分析,好是采用保留目標(biāo)化合物的凈化模式;舉一個簡單的例子,同樣是分析蔬菜中的多菌靈和噻菌靈(一類堿性農(nóng)藥),使用陽離子交換柱可以專一性地保留這些農(nóng)藥,使它們基本與干擾物*分離,而使用正相吸附劑或石墨化炭黑進(jìn)行保留干擾物的操作僅能把主要的干擾物除去,仍有較多干擾物存留。
 
另外,如果不止一種SPE柱可用于目標(biāo)化合物的凈化時,應(yīng)挑選選擇性好的吸附劑;選擇性方面,離子交換>正相>反相。
 
2、淋洗液和洗脫液的優(yōu)化
對于反相模式和正相模式,應(yīng)在不影響回收率的前提下,增大淋洗液洗脫的強(qiáng)度并降低洗脫液的洗脫強(qiáng)度。 
 
對于反相模式,可將目標(biāo)化合物的水溶液上樣,然后依次用5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%的甲醇水溶液洗脫,分別收集洗脫液分析,建立淋洗曲線,找出目標(biāo)化合物被洗脫時的溶劑體系,淋洗液中甲醇的含量應(yīng)稍低于目標(biāo)化合物恰好被洗脫時的溶劑體系,而洗脫液中甲醇的含量應(yīng)稍高于目標(biāo)化合物恰好被*洗脫時的溶劑體系;當(dāng)純甲醇不能洗脫目標(biāo)化合物時,應(yīng)試驗甲醇-甲基叔丁基醚混合溶液的洗脫曲線;對于某些既不溶于水也不溶于甲醇的離子型化合物,可以在溶劑體系中加入酸或堿。
 
對于正相體系,可將目標(biāo)化合物的正己烷溶液上樣,然后依次用5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%的正己烷甲基叔丁基醚溶液洗脫,分別收集洗脫液分析,建立淋洗曲線,找出目標(biāo)化合物被洗脫時的溶劑體系,淋洗液中甲基叔丁基醚的含量應(yīng)稍低于目標(biāo)化合物恰好被洗脫時的溶劑體系,而洗脫液中甲基叔丁基醚的含量應(yīng)稍高于目標(biāo)化合物恰好被*洗脫時的溶劑體系。
 
3、對SPE柱進(jìn)行合理的處理
SPE柱中的吸附劑可能存在少量干擾物,有效地活化可以避免這些干擾物進(jìn)入洗脫液,活化溶液應(yīng)選擇整個操作中洗脫強(qiáng)度強(qiáng)的溶劑體系;在反相模式中,從樣品溶液到洗脫液主要涉及0%-100%甲醇水溶液,所以活化溶液應(yīng)選純甲醇,當(dāng)目標(biāo)化合物需要用甲醇-甲基叔丁基醚混合液洗脫時,活化溶液應(yīng)選甲基叔丁基醚;在正相模式中,從樣品溶液到洗脫液主要涉及0%-100%正己烷-甲基叔丁基醚溶液,所以活化溶液應(yīng)選純甲基叔丁基醚。
 

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