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目錄:上海索寶生物科技有限公司>>生化試劑>>實(shí)驗(yàn)室自產(chǎn)產(chǎn)品>> R0050-50T核蛋白提取試劑盒

核蛋白提取試劑盒
  • 核蛋白提取試劑盒
參考價 350
訂貨量 ≥1
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
350
≥1
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
  • 型號 R0050-50T
  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 所在地 北京市
屬性

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更新時間:2023-04-27 10:42:10瀏覽次數(shù):1455評價

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供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合
英文名稱Nuclear Protein Extraction Kit
別名細(xì)胞核蛋白提取試劑盒
儲存條件附件PMSF-20℃,其它試劑4℃。有效期1年
規(guī)格50T 100T
單位盒

產(chǎn)品簡介

英文名稱Nuclear Protein Extraction Kit
別名細(xì)胞核蛋白提取試劑盒
儲存條件附件PMSF-20℃,其它試劑4℃。有效期1年
規(guī)格50T 100T
單位

產(chǎn)品簡介: 本核蛋白提取試劑盒提供了一種簡單、方便的從培養(yǎng)細(xì)胞或新鮮組織中抽提核蛋白的方法。整個過程只需約60分鐘就可以將核蛋白和漿蛋白從細(xì)胞中分離出來。得到的蛋白可以用于Western blot等實(shí)驗(yàn)。本試劑盒通過漿蛋白抽提試劑使細(xì)胞膨脹破裂,釋放出胞漿蛋白,再通過離心得到細(xì)胞核。然后通過核蛋白抽提試劑抽提得到細(xì)胞核蛋白。本試劑盒可以抽提50/100個樣品(每個樣品約2×106個Hela細(xì)胞或40mg組織)。

規(guī)格:50T/100T

產(chǎn)品內(nèi)容:

試劑盒組成

50T

100T      

漿蛋白抽提試劑

25ml      

50ml      

核蛋白抽提試劑

5ml

10ml      

PMSF(100mM)      

300μl

1ml

保存:/漿蛋白抽提試劑4℃保存,PMSF-20 ℃保存。


操作方法:

裂解蛋白的所有步驟都需在冰上或4℃進(jìn)行。

一、對于體外培養(yǎng)細(xì)胞:

1.根據(jù)用量取適當(dāng)?shù)臐{蛋白抽提試劑和核蛋白抽提試劑加入PMSF,使PMSF的最終濃度為1mM。PMSF需現(xiàn)用現(xiàn)加,可以在兩種蛋白抽提液中加入DTT至終濃度0.5mM。

2.對于貼壁細(xì)胞,去除培養(yǎng)液,用PBS洗一遍,用細(xì)胞刮刀收集細(xì)胞,或用EDTA消化后吹打下細(xì)胞。500 g離心2~3分鐘收集細(xì)胞,吸盡上清留下沉淀備用。

3.對于懸浮細(xì)胞:用PBS洗一遍,500 g離心2~3分鐘收集細(xì)胞,吸盡上清,留下細(xì)胞沉淀備用。

4.每20μl細(xì)胞沉淀加入200μl漿蛋白抽提試劑(2×106個細(xì)胞沉淀的體積約20μl或40mg)。

5.用移液器吹打或高速渦旋15秒(可適當(dāng)延長),必須使細(xì)胞沉淀分散開成單細(xì)胞懸液。細(xì)胞沉淀分散不會導(dǎo)致蛋白產(chǎn)量降低。

6.冰浴10分鐘。

7.最高轉(zhuǎn)速劇烈渦旋10秒,4℃ 12000~16000g離心10分鐘。

8.上清即為抽提得到的細(xì)胞漿蛋白,立即吸取上清至預(yù)冷的樣品管中備用,進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western等實(shí)驗(yàn),但蛋白濃度較低,可根據(jù)需要進(jìn)行相應(yīng)濃縮。

9.沉淀即為細(xì)胞核,要吸盡殘余的上清(避免細(xì)胞漿蛋白的污染),加入50-100μl核蛋白抽提試劑。

10.用移液器吹打或高速渦旋15秒(可適當(dāng)延長)至沉淀分開,冰浴10分鐘。

11.最高轉(zhuǎn)速劇烈渦旋10秒,4℃12000~16000g離心10分鐘。12.立即吸取上清至預(yù)冷的樣品管中,此即為抽提得到的細(xì)胞核蛋白??蛇M(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)或-70℃凍存。    對于組織樣品:    把組織稱重后,盡可能切成非常細(xì)小的碎片,按每50mg組織加入200μl-500μl PBS,用勻漿器冰上勻漿制成細(xì)胞懸液,500 g離心2~3分鐘收集細(xì)胞,吸盡上清,收集沉淀。加入200μl漿蛋白抽提試劑后接上述步驟5。

注意事項(xiàng):

1.裂解得到的蛋白樣品,由于含有較高濃度的去垢劑干擾,不能用Bradford法測定蛋白濃度,可以選用本公司生產(chǎn)的BCA蛋白定量試劑盒(貨號PC0020)測定蛋白濃度。

2.對于組織樣品,本試劑盒適用于新鮮組織,對凍存組織抽提效果較差。

3.為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

備注:以上數(shù)據(jù)均來自公開文獻(xiàn), Solarbio暫未進(jìn)行獨(dú)立驗(yàn)證, 僅供參考。These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.

公司簡介

海索萊寶生物科技有限公司是一家集銷售生化試劑、實(shí)驗(yàn)耗材、自產(chǎn)分子生物學(xué)產(chǎn)品為一體,并能提供的專業(yè)性生物科技公司。公司秉承“以客戶為中心,以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨"的發(fā)展理念,在依靠客戶的大力支持和員工的不懈努力下獲得了快速的成長。公司織結(jié)構(gòu)清晰,內(nèi)部管理科學(xué),擁有一支既分工細(xì)致又高度合作的年輕化隊(duì)伍,保持了各個部門之間的高效合作運(yùn)轉(zhuǎn),充分保障了公司在充滿競爭的市場中處于地位。公司注重與*合作,目前已與 AmershamAmresco、AxygenBD、Corning、DragonEppendorf等企業(yè)結(jié)成緊密的合作伙伴關(guān)系,代理其世界的*產(chǎn)品,并在全國各地設(shè)有分銷機(jī)構(gòu)。我們將以高度的責(zé)任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和實(shí)驗(yàn)技術(shù)解決方案。豐富的經(jīng)驗(yàn)、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫存、準(zhǔn)確的交貨時間、競爭力的價格,所有這些都保證了我們向您提供的是專業(yè)的服務(wù)!立足北京,上海,*,隨著產(chǎn)品營銷戰(zhàn)略的不斷延伸,我們將逐步發(fā)展成為*的專業(yè)性生物科技公司。我們希望能夠和尊敬的客戶一起,利用各自的資源優(yōu)勢和勇于進(jìn)取的敬業(yè)精神,為中國生命科學(xué)研究的發(fā)展作出更多的貢獻(xiàn)。為了更好、更全面的發(fā)展,現(xiàn)公司正在誠招各地代商和招聘若干銷售、研發(fā)人員,歡迎垂詢并期待您的加入!




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