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目錄:上海索寶生物科技有限公司>>生化試劑>>實(shí)驗(yàn)室自產(chǎn)產(chǎn)品>> CA1210-100TCCK-8細(xì)胞增殖及毒性檢測試劑盒

CCK-8細(xì)胞增殖及毒性檢測試劑盒
  • CCK-8細(xì)胞增殖及毒性檢測試劑盒
參考價(jià) 160
訂貨量 ≥1
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
160
≥1
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
  • 型號 CA1210-100T
  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 所在地 北京市
屬性

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更新時(shí)間:2023-04-27 09:10:33瀏覽次數(shù):2713評價(jià)

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供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合
英文名稱CCK-8 Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit
別名CCK-8 WST-8
儲存條件4℃密封避光保存
規(guī)格100T 500T 1000T 10*500T 10*1000T
單位盒
產(chǎn)品簡介
英文名稱CCK-8 Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit
別名CCK-8 WST-8
儲存條件4℃密封避光保存
規(guī)格100T 500T 1000T 10*500T 10*1000T
單位

Cell Counting Kit-8 簡稱CCK-8 試劑盒,為MTT 法的替代方法,是一種基于WST(水溶性四唑鹽,化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒??捎糜谒幬锖Y選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、腫瘤藥敏等試驗(yàn)。

使用說明:
一、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(測定細(xì)胞具體數(shù)量時(shí) (測定細(xì)胞具體數(shù)量時(shí))
1、先用細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)所制備的細(xì)胞懸液中的細(xì)胞數(shù)量,然后接種細(xì)胞。
2、按比例依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個(gè)細(xì)胞濃度梯度,一般要做 3-5 個(gè)細(xì)胞濃度梯度,每組 3-6 個(gè)復(fù)孔。
3、接種后培養(yǎng)至細(xì)胞貼壁,然后加 CCK-8 試劑培養(yǎng)一定時(shí)間后測定 OD 值,制作出一條以細(xì)胞數(shù)量為橫坐標(biāo)(X 軸),OD 值為縱坐標(biāo)(Y 軸)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線可以測定出未知樣品的細(xì)胞數(shù)量(試用此標(biāo)準(zhǔn)曲線的前提是實(shí)驗(yàn)的條件要一致,便于確定細(xì)胞的接種數(shù)量以及加入 CCK-8 后的培養(yǎng)時(shí)間。)

二、細(xì)胞活性檢測

1、在 96 孔板中接種細(xì)胞懸液(100µL/孔)。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)(在 37℃,5% CO2 的條件下)。

2、向每孔加入 10µL CCK-8 溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響 OD 值的讀數(shù))。

3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育 1-4 小時(shí)。

4、用酶標(biāo)儀測定在 450nm 處的吸光度。

5、如果暫時(shí)不測定 OD 值,打算以后測定的話,可以向每孔中加入 10µL 0.1M 的 HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液,并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在 24 小時(shí)內(nèi)吸光度不會發(fā)生變化。

三、細(xì)胞增值-毒性檢測

1、在 96 孔板中配置 100 µL 的細(xì)胞懸液。將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng) 24 小時(shí)(在 37 ℃,5% CO2 的條件下)。

2、向培養(yǎng)板加入 10µL 不同濃度的待測物質(zhì)。在培養(yǎng)箱孵育一段適當(dāng)?shù)臅r(shí)間(例如:6、12、24 或 48 小時(shí))。

3、向每孔加入 10 µL CCK-8 溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響 OD 值的讀數(shù))。如果待測物質(zhì)有氧化性或還原性的話,可在加 CCK-8 之前更換新鮮培養(yǎng)基(除去培養(yǎng)基,并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的培養(yǎng)基),去掉藥物影響。

4、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育 1-4 小時(shí)。

5、用酶標(biāo)儀測定在 450 nm 處的吸光度。

6、如果暫時(shí)不測定 OD 值,打算以后測定的話,可以向每孔中加入 10µL 0.1M 的 HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液,并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在 24 小時(shí)內(nèi)吸光度不會發(fā)生變化。

活力計(jì)算:.

細(xì)胞活力(%)=[A(加藥)-A(空白)]/[ A(0 加藥)-A(空白)]×100

A(加藥):具有細(xì)胞、CCK-8 溶液和藥物溶液的孔的吸光度

A(空白):具有培養(yǎng)基和 CCK-8 溶液而沒有細(xì)胞的孔的吸光度

A(0 加藥):具有細(xì)胞、CCK-8 溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度

細(xì)胞活力:細(xì)胞增殖活力或細(xì)胞毒性活力

注意事項(xiàng):

①建議先做幾個(gè)孔摸索接種細(xì)胞的數(shù)量和加入 CCK-8 試劑后的培養(yǎng)時(shí)間。

②白細(xì)胞可能需要培養(yǎng)較長時(shí)間。

③當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn) 96 孔板時(shí),貼壁細(xì)胞的最小接種量至少為 1 ,000 個(gè)/孔 (100 µL 培養(yǎng)基)。檢測白細(xì)胞時(shí)的靈敏度相對較低,因此推薦接種量不低于 2,500 個(gè)/孔 ( 100 µL 培養(yǎng)基)。如果要使用 24 孔板或 6 孔板實(shí)驗(yàn),請先計(jì)算每孔相應(yīng)的接種量,并按照每孔培養(yǎng)基總體積的 10% 加入 CCK-8 溶液。


④如果沒有 450nm 的濾光片,可以使用吸光度在 430-490 nm 之間的濾光片,但是 450nm 檢測靈敏度最高。

⑤培養(yǎng)基中酚紅的吸光度可以在計(jì)算時(shí),通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不會對檢測造成影響。

備注:
以上數(shù)據(jù)均來自公開文獻(xiàn), Solarbio暫未進(jìn)行獨(dú)立驗(yàn)證, 僅供參考。
These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.


公司簡介

海索萊寶生物科技有限公司是一家集銷售生化試劑、實(shí)驗(yàn)耗材、自產(chǎn)分子生物學(xué)產(chǎn)品為一體,并能提供的專業(yè)性生物科技公司。公司秉承“以客戶為中心,以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨"的發(fā)展理念,在依靠客戶的大力支持和員工的不懈努力下獲得了快速的成長。公司織結(jié)構(gòu)清晰,內(nèi)部管理科學(xué),擁有一支既分工細(xì)致又高度合作的年輕化隊(duì)伍,保持了各個(gè)部門之間的高效合作運(yùn)轉(zhuǎn),充分保障了公司在充滿競爭的市場中處于地位。公司注重與*合作,目前已與 Amersham、AmrescoAxygenBD、Corning、Dragon、Eppendorf等企業(yè)結(jié)成緊密的合作伙伴關(guān)系,代理其世界的*產(chǎn)品,并在全國各地設(shè)有分銷機(jī)構(gòu)。我們將以高度的責(zé)任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和實(shí)驗(yàn)技術(shù)解決方案。豐富的經(jīng)驗(yàn)、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫存、準(zhǔn)確的交貨時(shí)間、競爭力的價(jià)格,所有這些都保證了我們向您提供的是專業(yè)的服務(wù)!立足北京,上海,*,隨著產(chǎn)品營銷戰(zhàn)略的不斷延伸,我們將逐步發(fā)展成為*的專業(yè)性生物科技公司。我們希望能夠和尊敬的客戶一起,利用各自的資源優(yōu)勢和勇于進(jìn)取的敬業(yè)精神,為中國生命科學(xué)研究的發(fā)展作出更多的貢獻(xiàn)。為了更好、更全面的發(fā)展,現(xiàn)公司正在誠招各地代商和招聘若干銷售、研發(fā)人員,歡迎垂詢并期待您的加入!



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