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技術(shù)文章

大腦研究抽樣過(guò)程

閱讀:639          發(fā)布時(shí)間:2011-5-21

隨機(jī)選擇一側(cè)大腦半球,將其包埋于6%瓊脂中,切取等距離腦組織切片,切片厚度為7mm,共切取20張切片。我們確定從一側(cè)大腦半球抽取5塊大腦白質(zhì)進(jìn)行研究,首先,將從20張腦組織切片中抽取5片,即每4張等距切片中抽取一張(每隔3張抽取一張)。從前4個(gè)數(shù)字當(dāng)中隨機(jī)選擇一個(gè),這個(gè)數(shù)字則作為*張腦片的抽取位置,假設(shè)選擇3,則第3張腦片作為*個(gè)腦組織塊抽取的位置,然后每隔3張腦片抽取一片,即3,7,11,15,19號(hào)腦片。由于腦片較大,還需在所得腦片上再次抽取組織塊。在所得腦片上隨機(jī)疊放等距有孔測(cè)試點(diǎn),這些測(cè)試點(diǎn)排列均勻,在測(cè)試點(diǎn)其中白質(zhì)的部位取組織塊??墒勾竽X白質(zhì)每個(gè)部位有均等的機(jī)會(huì)被抽取。

大腦半球連續(xù)等距隨機(jī)抽樣示意圖
一側(cè)大腦半球連續(xù)切片共20張。每片7mm。共抽取5張。則每4張抽取一張。*張切片在1~4之間的隨機(jī)數(shù)字中產(chǎn)生.如果為3,應(yīng)抽取的組織切片為3,7,11,15,19
大腦白質(zhì)隨機(jī)抽樣圈
在隨機(jī)抽取的腦組織塊上隨機(jī)疊放一張具有等距離孔的塑料膠片。因?yàn)樗芰夏z片上的孔擊中大腦白質(zhì)的概率是隨機(jī)的。所以.當(dāng)孔擊中大腦自質(zhì).便在該處抽取一個(gè)組織塊 
   實(shí)際應(yīng)用中,可自己設(shè)計(jì)抽取觀察組織塊的多少。對(duì)于一些體積較大的器官,可采取分層等距隨機(jī)抽樣方式。比如先將器官切成等距的組織厚片,從中等距隨機(jī)抽取組織厚片。如果研究對(duì)象是肝臟組織,不難發(fā)現(xiàn),除非所用的測(cè)試點(diǎn)非常稀疏,否則,很難見(jiàn)到一個(gè)組織片上只擊中一個(gè)點(diǎn),而且這樣也不符合體視學(xué)抽樣原則,所以,可將擊中部位組織塊切取后按順序排列,再進(jìn)行第二次等距隨機(jī)抽樣。
    樣本含量取決于抽樣誤差的大小以及待測(cè)結(jié)構(gòu)量的變異情況。一般情況下,選擇5~10個(gè)動(dòng)物為一組,從每個(gè)動(dòng)物器官取3~10個(gè)組織塊(切片)。在均勻隨機(jī)抽樣及適當(dāng)抽樣間距的前提下,從每個(gè)器官獲得的各項(xiàng)基本測(cè)試數(shù)據(jù),如位于待測(cè)結(jié)構(gòu)切面內(nèi)的測(cè)點(diǎn)總數(shù)、交點(diǎn)總數(shù)、輪廓總數(shù)、粒子總數(shù)或直徑個(gè)數(shù)等,一般不必超過(guò)100~200則可獲得滿意的測(cè)試結(jié)果。由此可見(jiàn),體視學(xué)研究可以被理解為一步步等距隨機(jī)抽樣的過(guò)程。
 
多次等距隨機(jī)抽樣圖
在切取大組織器官時(shí)所得到組織片較大,這樣用有孔測(cè)點(diǎn)取下的小組織塊便不只一塊,如果樣本量太大,則可以將所有樣本排列在一起:再次進(jìn)行等距隨機(jī)抽樣
多次連續(xù)等距隨機(jī)抽樣圖
圖中顯示如何從器官隨機(jī)棺取組織片的過(guò)程,即從器官隨機(jī)抽取組織片,從組織片隨機(jī)抽取組織塊,從絹織塊隨機(jī)切取一張組織切片,再?gòu)倪@張組織切片上隨機(jī)抽取視野。*個(gè)視野的位置隨機(jī)選擇,然后視野在X軸和Y軸方向每次以同等距離(dx、dy)移動(dòng)。體視學(xué)分析測(cè)試系統(tǒng)的計(jì)算機(jī)可按抽樣設(shè)計(jì)控制視野移動(dòng)距離

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