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免疫酶組織化學技術的酶及其特點
閱讀：774 發(fā)布時間：2011-5-27凡對抗體無毒性又具有高催化效率的酶，理論上均可標記抗體。但免疫酶組織化學技術要求酶與底物作用生成的有色產(chǎn)物能在光鏡及電鏡下觀察到，所以這些產(chǎn)物必須具備兩個條件：*，產(chǎn)物必須是不透光或不透電子的，否則不能被光鏡及電鏡觀察到；第二，產(chǎn)物必須是不溶解的，否則產(chǎn)物將發(fā)生擴散，影響其準確定位。而理想的酶也應盡可能符合下列標準：
①性質(zhì)穩(wěn)定，活性高；
②該酶較易獲得純制品，而且純度要很高；
③酶與免疫球蛋白等物質(zhì)結(jié)合時不喪失其活性；
④酶反應產(chǎn)物必須穩(wěn)定，不應發(fā)生擴散，影響組織學定位；
⑤酶相應底物易于保存、制備；
⑥被檢組織中沒有與底物有關的酶作為內(nèi)源性組分存在。
*具備上述條件的酶并不多見，目前常用于標記的酶有辣根過氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）、堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，AKP）、酸性磷酸酶、葡萄糖氧化酶（glucoseoxdase，GOD）、b-半乳糖苷酶、葡萄糖淀粉酶、乙酰膽堿酯酶等。其中辣根過化物酶、堿性磷酸酶、葡萄糖氧化酶應用比較廣泛，且絕大部分免疫酶組織化學技術使用HRP酶是一種*的蛋白質(zhì)催化活性物質(zhì)，現(xiàn)代技術已可生產(chǎn)100％純的酶，如HRP和AKP等，它們的催化效率非常高，
分子高純度酶在lmin內(nèi)可催化10000～1000000分子的底物。酶的活性高低將依賴于下列幾種可變參數(shù)：
①酶和底的濃度；
②緩沖液的pH值和鹽的濃度；
③溫度和光線