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蠟樣芽孢桿菌食物中毒的檢查方法
閱讀：885 發(fā)布時(shí)間：2011-5-28蠟樣芽孢桿菌食物中毒的檢查方法
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1．直接鏡檢和活菌計(jì)數(shù)
（1）直接鏡檢 采取患者嘔吐物或剩余殘食等為檢樣。將其用無(wú)菌生理鹽水浸漬、稀釋后制涂片，干燥，革蘭染色、鏡檢。若有革蘭陽(yáng)性大桿菌[（4～5）um×1um左右l菌兩端較平整，芽孢不大于菌體寬度，中生或稍偏端，運(yùn)動(dòng)，即為可疑菌。
（2）活菌計(jì)數(shù) 將殘余食物以無(wú)菌生理鹽水稀釋成1：10，1：100，1：1000，…，分別用lml的滅菌吸管各吸取稀釋液0．1ml作傾注培養(yǎng)，或接種于10％卵黃瓊脂平板上，用滅菌的L形棒涂勻于平板表面，置37℃溫箱培養(yǎng)12h后，取出計(jì)數(shù)。3-6h后該菌在卵黃瓊脂平板上產(chǎn)生乳白色渾濁環(huán)，可和不產(chǎn)生乳白色渾濁的枯草桿菌等雜菌區(qū)別。
2。分離培養(yǎng)
將嘔吐物直接劃線或先把剩余殘食等置滅菌乳缽中加適量無(wú)菌生理鹽水研磨后，劃線接種于普通平板或血平板，或10％卵黃瓊脂平板上，置37~C培養(yǎng)18-24h后觀察。如普通瓊脂上生長(zhǎng)呈乳白色，不透明，邊緣不整齊常為擴(kuò)散狀，直徑4～6mm的菌落，迎光觀察似白蠟狀，可疑為蠟樣桿菌。血平板上，菌落為灰色不透明似毛玻璃狀，其周圍呈草綠色溶血。
3。生化反應(yīng)
該菌分解葡萄糖、麥芽糖、糊精、蔗糖；不分解乳糖、鼠李糖、木糖、伯膠糖、甘露醇、肌醇、山梨醇及側(cè)金盞花醇。吲哚陽(yáng)性，甲基紅陰性，V．P陽(yáng)性，檸檬酸鹽利用、卵磷脂酶、KCN均為陽(yáng)性。在24L內(nèi)液化明膠。H：S、脲酶陰性。酪蛋白酶、觸酶陽(yáng)性，溶血還原硝酸鹽，溶血還原美藍(lán)、石蕊牛乳迅速蛋白胨化。
4．卵磷脂酶試驗(yàn)
用鉑耳取疑似蠟樣芽孢桿菌的肉湯培養(yǎng)物點(diǎn)種于10％的卵黃瓊脂平板上，該菌在其上有強(qiáng)烈的磷脂酶作用，生長(zhǎng)迅速，于37~C培養(yǎng)3h后雖未見(jiàn)菌落但可看到因卵磷脂酶分解卵磷脂而呈乳白色渾濁環(huán)，稱乳光反應(yīng)。6h后此環(huán)可擴(kuò)散至5-6mm。