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技術(shù)文章

感染性疾病標(biāo)本的類型

閱讀:935          發(fā)布時間:2011-6-20

感染性疾病標(biāo)本的類型

點擊次數(shù):4 發(fā)布時間:2011-3-25

    從感染者體內(nèi)或其排泄物中檢出導(dǎo)致該感染的病原體,即病原學(xué)診斷,是診斷感染性疾病zui可靠的依據(jù)。病原學(xué)診斷對感染性疾病至關(guān)重要,常常在很大程度上影響治療效果和疾病的轉(zhuǎn)歸,甚至起決定性的作用,這一點與其他類型的臨床疾病有所不同。
    檢測病原體進(jìn)行感染性疾病病原學(xué)診斷的手段包括以下4個方面。
    (一)檢出完整的病原體
    例如,在疑似患者的宮頸分泌物拭子直接涂片中查見革蘭陰性雙球菌,可診斷淋??;血培養(yǎng)查見金黃色葡萄球菌可診斷金黃色葡萄球菌敗血癥。
    (二)檢出病原體的抗原成分或機體對其免疫應(yīng)答所產(chǎn)生的抗體
    例如,檢測血清標(biāo)本中的乙型肝炎病毒表面抗原、e抗原、核心抗原及其相應(yīng)抗體等。根據(jù)檢出結(jié)果的不同表現(xiàn)模式,判定患者乙型肝炎病毒感染的不同狀態(tài)。
    (三)檢出病原體的基因成分
    抽提送檢標(biāo)本的核酸,用診斷該病原體的基因探針與核酸抽提物進(jìn)行分子雜交,然后用某種相應(yīng)的方法(如放射性自顯影法、化學(xué)顯色法、發(fā)光法等)顯示雜交分子的存在,即可確定待測基因的存在,亦即病原體在患者體內(nèi)的存在。若采用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)將待測基因拷貝數(shù)擴增放大(可達(dá)數(shù)十萬甚至數(shù)百萬倍)后,再對擴增產(chǎn)物進(jìn)行分子雜交檢測,則可大大提高檢測靈敏度。
    (四)檢出病原體的代謝產(chǎn)物
    例如,經(jīng)特殊染色后,從疑似患者的尿液、唾液、胃液細(xì)胞沉渣中檢出特征性的巨細(xì)胞包涵體,可確診巨細(xì)胞病毒感染。
    總之,病原學(xué)檢測手段很多,但各有其優(yōu)點和局限性。在實際應(yīng)用時,必須根據(jù)需要選擇zui適當(dāng)?shù)臋z測手段。例如,直接檢出完整的病原體是感染性疾病病原學(xué)診斷的金標(biāo)準(zhǔn),但在臨床應(yīng)用時,常常由于以下一些原因使靈敏度或應(yīng)用范圍受到限制:①在采集送檢標(biāo)本前,患者已經(jīng)使用了大量的抗感染藥物,可能使病原體培養(yǎng)的陽性率降低。②培養(yǎng)所需的時間太長,特別是結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)需要6周甚至更久,有時不能滿足臨床快速診斷的要求。例如,當(dāng)患者顱內(nèi)感染需盡快明確病原學(xué)診斷時,就不能久等培養(yǎng)結(jié)
果。③某些病原微生物(如病毒、衣原體等)因培養(yǎng)所需的技術(shù)設(shè)備條件要求太高,難以在一般醫(yī)院廣泛推行。有的病毒目前還不能進(jìn)行臨床意義上的實驗室培養(yǎng),例如乙型肝炎病毒等。④有些病原體僅為條件性致病菌;有些病原體以無癥狀攜帶的方式存在于機體。如傷寒桿菌慢性攜帶者的大便中可檢出大量傷寒桿菌,此時,檢出的傷寒桿菌并不一定即為患者當(dāng)前所患疾病的病因,必須結(jié)合臨床全面評估,才能對其病原學(xué)意義作出恰當(dāng)?shù)呐袛唷?/div>
    相對于通過培養(yǎng)檢出完整的病原體而言,檢測病原體的抗原成分或相應(yīng)的抗體是較為簡便易行的病原學(xué)實驗診斷方法,也是感染性疾病病原學(xué)診斷技術(shù)發(fā)展的重要方向之一。需要指出的是,當(dāng)送檢標(biāo)本中的病原體數(shù)量較低時,病原體抗原成分的檢出率可能受到檢測靈敏度的限制;另一方面,檢測機體免疫應(yīng)答所產(chǎn)生的抗體有時亦不能*臨床的需求。由于IgG型抗體陽轉(zhuǎn)的時相通常處于病程后期,難以用于急性感染的早期診斷;因此,研制IgM型抗體的檢測藥盒是此類診斷技術(shù)開發(fā)研究的一個重點。此外,機體內(nèi)出現(xiàn)各種病原體(包括其基因物質(zhì))、代謝產(chǎn)物及免疫應(yīng)答產(chǎn)物時各自遵循一定的動力學(xué)規(guī)律,其出現(xiàn)的時相可以類似或彼此重疊,也可以相差很大。以傷寒為例,在病程第1~2周時,血培養(yǎng)、骨髓培養(yǎng)的傷寒桿菌檢出率可達(dá)80%一90%,以后陽性率逐漸降低;在病程第3~5周時,大便培養(yǎng)傷寒桿菌的陽性率可達(dá)60%一85%,尿培養(yǎng)也可達(dá)到30%左右;檢測傷寒桿菌菌體抗原和鞭毛抗原相應(yīng)抗體的肥達(dá)反應(yīng)通常在病程的第1周開始出現(xiàn)陽性,以后陽性率逐漸遞增,病程第4周陽性率可達(dá)90%。為了提高病原學(xué)的準(zhǔn)確性和可靠性,應(yīng)當(dāng)按照上述規(guī)律,根據(jù)不同時期選擇*的檢測手段。

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