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技術(shù)文章

蛋白質(zhì)的膠體金標(biāo)記

閱讀:584          發(fā)布時(shí)間:2012-4-7

當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)的zui適穩(wěn)定量及標(biāo)記的*pH值被確定以后,便可進(jìn)行標(biāo)記。具體步驟如下。

(1)根據(jù)標(biāo)記所用膠體金的總量計(jì)算出所需要待標(biāo)記蛋白質(zhì)的總量。

(2)邊攪拌邊將蛋白質(zhì)溶液加入膠體金溶液中,逐漸加入,lmg的蛋白質(zhì)量大約需5min,或在攪拌下將膠體金逐漸加入到蛋白質(zhì)溶液中,大約需5~10min。

(3)繼續(xù)攪拌10min,然后加入5%BSA使其終濃度為1%,或加入3%聚乙二醇(PEG,Mr:20000)使其終濃度為0.05%,其效果BSA要優(yōu)于PEG。

(4)將標(biāo)記好的膠體金裝入透析袋中,兩頭扎緊,放人蔗糖或硅膠中濃縮,濃縮到原體積的1/10量,濃縮完畢后純化。如用離心純化方法時(shí),不需要濃縮。

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