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液相色譜儀在使用中常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法

液相色譜儀作為一種高精密儀器，如果在使用過(guò)程中操作不當(dāng)?shù)脑?就容易導(dǎo)致一些問(wèn)題，其中常見(jiàn)的就是柱壓?jiǎn)栴}、漂移問(wèn)題。

柱壓?jiǎn)栴}

柱壓?jiǎn)栴}是使用液相色譜過(guò)程中需要密切注意的地方，柱壓的穩(wěn)定與色譜圖峰形的好壞、柱效、分離效果及保留時(shí)間等密切相關(guān)。所謂柱壓穩(wěn)定并不是指壓力值穩(wěn)定于一個(gè)恒定值，而是指壓力波動(dòng)范圍在345kPa以?xún)?nèi)（在使用梯度洗脫時(shí)，柱壓平穩(wěn)、緩慢的變化是允許的）。壓力過(guò)高、過(guò)低都屬于柱壓?jiǎn)栴}。

壓力過(guò)高

這是液相色譜儀在使用中常見(jiàn)的問(wèn)題，指的是壓力突然升高，一般都是由于流路中有堵塞的情況。此時(shí)，我們應(yīng)該分段進(jìn)行檢查。

①首先斷開(kāi)真空泵的入口處，此時(shí)EK管里充滿(mǎn)液體，使EK管低于溶劑瓶，看液體是否自由滴下，如果液體不滴或緩慢滴下，則是溶劑過(guò)濾頭堵塞。處理方法：用30%的硝酸浸泡0.5h，在用超純水沖洗干凈。如果液體自由滴下，溶劑過(guò)濾頭正常，再檢查。

②打開(kāi)Purge閥，使流動(dòng)相不經(jīng)過(guò)柱子，如果壓力沒(méi)有明顯下降，則是過(guò)濾頭堵塞。處理方法：將過(guò)濾頭取出，用10%的異丙醇超聲30min。如果壓力降至690kPa以下，過(guò)濾頭正常，再檢查。

③把色譜柱出口端取下，如果壓力不下降，則是柱子堵塞。處理方法：如果是緩沖鹽堵塞，則用95%的水沖至壓力正常；如果是一些強(qiáng)保留的物質(zhì)導(dǎo)致堵塞，則要用比現(xiàn)在流動(dòng)相更強(qiáng)的流動(dòng)相沖至壓力正常。假如按上面的方法長(zhǎng)時(shí)間沖洗壓力都不下降，則可考慮將柱子的進(jìn)出口反過(guò)來(lái)接在儀器上，用流動(dòng)相沖洗柱子。這時(shí)，如果柱壓仍不下降，只有換柱子入口篩板，但一旦操作不慎，很容易造成柱效下降，所以盡量少用。 

壓力過(guò)低

壓力過(guò)低的現(xiàn)象一般是由于系統(tǒng)泄漏，處理方法：尋找各個(gè)接口處，特別是色譜柱兩端的接口，把泄漏的地方旋緊即可。當(dāng)然還有一個(gè)原因就是泵里進(jìn)了空氣，但此時(shí)表現(xiàn)的往往是壓力不穩(wěn)，忽高忽低，更嚴(yán)重一點(diǎn)會(huì)導(dǎo)致泵無(wú)法吸進(jìn)液體。處理方法：打開(kāi)Purge閥，用3~5ml/min的流速?zèng)_洗，如果不行，則要用針筒在排空閥處借住外力將氣泡吸出。